目的探討卵泡刺激素β亞基（follicle-stimulating hormoneβ-subunit,FSHβ）在骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（bone morphogenetic protein 9,BMP9）誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells,MSCs）成骨分化中的作用及可能的機(jī)制。方法利用細(xì)胞化學(xué)染色方法檢測(cè)處理因素（重組腺病毒或γ促分泌酶抑制劑DAPT）作用于間充質(zhì)干細(xì)胞5 d后細(xì)胞中堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色的變化。通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR（quantitative real-time PCR,Q-PCR）檢測(cè)BMP9 mRNA、FSHβmRNA和Notch信號(hào)通路靶基因（Hey1） mRNA的表達(dá)水平。利用茜素紅S（alizarin red S,ARS）染色檢測(cè)腺病毒感染間充質(zhì)干細(xì)胞21 d后細(xì)胞中鈣鹽的沉積情況。結(jié)果 FSHβ處理組ALP表達(dá)較GFP對(duì)照組無(wú)明顯改變,BMP9處理組ALP表達(dá)較GFP對(duì)照組明顯增加,而BMP9與FSHβ聯(lián)合處理組ALP表達(dá)較BMP9處理組顯著增加。另外,BMP9處理組晚期成骨標(biāo)志物鈣鹽結(jié)節(jié)、... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2019年06期 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料及方法
    1.1 試劑與細(xì)胞培養(yǎng)
    1.2 目標(biāo)重組腺病毒 （GFP、BMP9、FSHβ） 構(gòu)建
    1.3 實(shí)驗(yàn)分組與重組腺病毒滴度、藥物濃度測(cè)定
    1.4 ALP表達(dá)檢測(cè)
    1.5 茜素紅S染色測(cè)定鈣鹽結(jié)節(jié)
    1.6 細(xì)胞總RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄以及實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
    1.7 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 C3H10T1/2細(xì)胞感染重組腺病毒后相應(yīng)腺病毒mRNA的表達(dá)檢測(cè)和ALP檢測(cè)
    2.2 FSHβ增加BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞的ALP表達(dá)
    2.3 FSHβ增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞成骨中鈣鹽的沉積
    2.4 FSHβ增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞成骨分化中Notch信號(hào)的表達(dá)
    2.5 DAPT抑制FSHβ增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞成骨分化中ALP的表達(dá)
    2.6 DAPT抑制FSHβ增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞成骨分化中Notch信號(hào)的表達(dá)
3 討論



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