結核�。╰uberculosis,TB）是由結核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）所致的以呼吸系統(tǒng)感染為主的慢性傳染病。目前全球有1／3的人口感染過MTB，每年有800萬新感染患者和300萬患者死亡，表明TB仍是影響全球人類健康的一個主要公共衛(wèi)生問題。近年來，由于預防疫苗卡介苗（Bacillus Calmette Guerin，BCG）保護性不完善、耐藥MTB流行、與人類免疫缺陷病毒（Human immunodificiciency Virus，HIV）的合并感染以及人口流動等原因使TB疫情日益嚴重。同時，由于BCG的廣泛接種，使純化的結核菌素蛋白衍生物（purified protein derivative of tuberculin，PPD）診斷試劑特異性不高，TB病例的及時發(fā)現(xiàn)成為難題。鑒于以上問題，TB新型疫苗或增強BCG免疫效果以及特異、快速診斷試劑的研究具有重要意義。 動物實驗表明，MTB培養(yǎng)濾液蛋白（culture filtrate proteins，CFP）如MPT64、ESAT-6、Ag85復合體、MPT32等可誘導產(chǎn)生保護... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PCR擴增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳Fig3AgarosegeleleetrePhoresisofPCRProduet，v.

.eoliDI王sa感受態(tài)細胞。隨機挑選2個菌落提取質粒，經(jīng)Ban，Hl不11Hindlll雙酶切后，切出698bp大小的片段，為陽性克隆(圖4)。將陽性克隆命名為pGEM一MPT64。\\一李/Z(〕()()l、pl()(川bp75()l、P5()()l)P25〔)Ilpl()()11P圖4重組質粒的酶切分析Fig4RestrietionenzymeanalysisofthereeombinantPlasmidM:DNAMarkerDLZ，000;l、2:eutwithBan，HlandHl’ndIII

理的pProEXHTb載體片段連接轉化E.eoliDHS。感受態(tài)細胞，隨機挑選4個克隆進行酶切鑒定，用BamHI和Hindm雙酶切后，均可切出698bP的片段(圖6)，證明克隆成功。陽性克隆命名為pProExHTb一MPT64。234\\一///2()‘)()hl)l()()硯)t、萬)75()I一百)5(川hl)2污()hl-l()()hl)圖6重組pProExHTb一MPT64質粒的酶切分析Fig6RestrietionenzymeanalysisofthereeombinantPlasmidPProEXHTb一MPT64M:DNAMarkerDLZ，000;l一4:eutwithBamHI和Hindlll

【參考文獻】：
期刊論文
[1]結核分枝桿菌培養(yǎng)物不同組份蛋白質組研究[J]. 莊玉輝,何秀云,張小剛,李國利,闕海萍,劉紹軍.  微生物學報. 2002(03)
[2]第四次全國結核病流行病學抽樣調查——結核分支桿菌耐藥性分析與評價[J]. 劉宇紅,姜廣路,趙立平,付育紅,李云絮,畢志強,王甦民.  中華結核和呼吸雜志. 2002(04)
[3]抗結核藥物的研究進展[J]. 何國鈞,肖和平.  中華結核和呼吸雜志. 2000(10)
[4]改良消減雜交法篩選結核分枝桿菌毒力相關基因[J]. 李元,李別虎,白光春,范雄林,薛瑩,賈向志,莊玉輝.  第四軍醫(yī)大學學報. 2000(07)

博士論文
[1]結核分枝桿菌基因疫苗的構建及其免疫學特性的初步研究[D]. 范雄林.第四軍醫(yī)大學 2001

碩士論文
[1]結核分枝桿菌分泌蛋白Ag85B基因的克隆、表達、純化及免疫學特性的初步研究[D]. 薛瑩.第四軍醫(yī)大學 2002



本文編號：2949393