結(jié)核�。╰uberculosis,TB）是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）所致的以呼吸系統(tǒng)感染為主的慢性傳染病。目前全球有1／3的人口感染過(guò)MTB，每年有800萬(wàn)新感染患者和300萬(wàn)患者死亡，表明TB仍是影響全球人類健康的一個(gè)主要公共衛(wèi)生問(wèn)題。近年來(lái)，由于預(yù)防疫苗卡介苗（Bacillus Calmette Guerin，BCG）保護(hù)性不完善、耐藥MTB流行、與人類免疫缺陷病毒（Human immunodificiciency Virus，HIV）的合并感染以及人口流動(dòng)等原因使TB疫情日益嚴(yán)重。同時(shí)，由于BCG的廣泛接種，使純化的結(jié)核菌素蛋白衍生物（purified protein derivative of tuberculin，PPD）診斷試劑特異性不高，TB病例的及時(shí)發(fā)現(xiàn)成為難題。鑒于以上問(wèn)題，TB新型疫苗或增強(qiáng)BCG免疫效果以及特異、快速診斷試劑的研究具有重要意義。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，MTB培養(yǎng)濾液蛋白（culture filtrate proteins，CFP）如MPT64、ESAT-6、Ag85復(fù)合體、MPT32等可誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳Fig3AgarosegeleleetrePhoresisofPCRProduet，v.

.eoliDI王sa感受態(tài)細(xì)胞。隨機(jī)挑選2個(gè)菌落提取質(zhì)粒，經(jīng)Ban，Hl不11Hindlll雙酶切后，切出698bp大小的片段，為陽(yáng)性克隆(圖4)。將陽(yáng)性克隆命名為pGEM一MPT64。\\一李/Z(〕()()l、pl()(川bp75()l、P5()()l)P25〔)Ilpl()()11P圖4重組質(zhì)粒的酶切分析Fig4RestrietionenzymeanalysisofthereeombinantPlasmidM:DNAMarkerDLZ，000;l、2:eutwithBan，HlandHl’ndIII

理的pProEXHTb載體片段連接轉(zhuǎn)化E.eoliDHS。感受態(tài)細(xì)胞，隨機(jī)挑選4個(gè)克隆進(jìn)行酶切鑒定，用BamHI和Hindm雙酶切后，均可切出698bP的片段(圖6)，證明克隆成功。陽(yáng)性克隆命名為pProExHTb一MPT64。234\\一///2()‘)()hl)l()()硯)t、萬(wàn))75()I一百)5(川hl)2污()hl-l()()hl)圖6重組pProExHTb一MPT64質(zhì)粒的酶切分析Fig6RestrietionenzymeanalysisofthereeombinantPlasmidPProEXHTb一MPT64M:DNAMarkerDLZ，000;l一4:eutwithBamHI和Hindlll

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)物不同組份蛋白質(zhì)組研究[J]. 莊玉輝,何秀云,張小剛,李國(guó)利,闕海萍,劉紹軍.  微生物學(xué)報(bào). 2002(03)
[2]第四次全國(guó)結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查——結(jié)核分支桿菌耐藥性分析與評(píng)價(jià)[J]. 劉宇紅,姜廣路,趙立平,付育紅,李云絮,畢志強(qiáng),王甦民.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2002(04)
[3]抗結(jié)核藥物的研究進(jìn)展[J]. 何國(guó)鈞,肖和平.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2000(10)
[4]改良消減雜交法篩選結(jié)核分枝桿菌毒力相關(guān)基因[J]. 李元,李別虎,白光春,范雄林,薛瑩,賈向志,莊玉輝.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(07)

博士論文
[1]結(jié)核分枝桿菌基因疫苗的構(gòu)建及其免疫學(xué)特性的初步研究[D]. 范雄林.第四軍醫(yī)大學(xué) 2001

碩士論文
[1]結(jié)核分枝桿菌分泌蛋白Ag85B基因的克隆、表達(dá)、純化及免疫學(xué)特性的初步研究[D]. 薛瑩.第四軍醫(yī)大學(xué) 2002



本文編號(hào)：2949393