睡眠剝奪小鼠模型的建立及寧心安神法的干預(yù)作用
本文關(guān)鍵詞:睡眠剝奪小鼠模型的建立及寧心安神法的干預(yù)作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:不寐,在中國古代又有“目不瞑”、“不得眠”等稱謂,現(xiàn)代人們常以失眠來稱此病證,主要是指入睡困難,或者睡眠過程的維持出現(xiàn)障礙(比如易醒、早醒以及醒后難以再入睡等),而導(dǎo)致的睡眠質(zhì)、量的降低,不能滿足機(jī)體的正常的生理需要,對(duì)個(gè)體的日常生活、社會(huì)功能產(chǎn)生較大影響,降低個(gè)體生活質(zhì)量。本課題結(jié)合導(dǎo)師前期失眠的課題研究來繼續(xù)探討失眠的模型建立、中藥復(fù)方干預(yù)及其作用機(jī)制的研究。理論研究:《黃帝內(nèi)經(jīng)》認(rèn)為神與睡眠之間有著復(fù)雜交織的緊密聯(lián)系,神主宰著生命體的一切活動(dòng);人體陰陽的盛衰變化、營衛(wèi)二氣的晝夜循行及蹺脈的盛衰都與人體的睡眠功能關(guān)系密切。營衛(wèi)是魂魄活動(dòng)的基礎(chǔ),其循環(huán)運(yùn)行、陰陽出入的規(guī)律是睡眠活動(dòng)產(chǎn)生的關(guān)鍵所在,營衛(wèi)與晝夜陰陽消長節(jié)律同步的活動(dòng)規(guī)律也保證了睡眠的生理自律性。不寐與許多病因有關(guān),其病理機(jī)制也十分復(fù)雜,或虛或?qū)?或心肝陰血虛而致虛熱內(nèi)擾、或心膽氣虛、或心腎不交,或肝郁化火、或膽郁痰擾、或心火旺盛燒灼心神等。都能使機(jī)體產(chǎn)生不寐病證,同時(shí)因?yàn)闊釘_心神而多伴見心煩躁動(dòng)之癥。對(duì)于本病的治療應(yīng)該詳明其病因病機(jī),辨證施治。實(shí)驗(yàn)研究:方法:先通過模型篩選的方法選出適宜的小鼠睡眠剝奪模型,然后研究三草安神方的促眠藥效學(xué)研究,再根據(jù)結(jié)果選用輕觸疊加換籠的方法作為小鼠睡眠剝奪的方法,選用三草安神方作為中藥復(fù)方的干預(yù)用藥。將小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)后,進(jìn)行水迷宮初篩,淘汰體力差、學(xué)習(xí)記憶能力落后的小鼠;挑選出60只小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、西藥對(duì)照組、三草安神方高劑量組、三草安神方低劑量組五組,每組12只。適應(yīng)性喂養(yǎng)過程中保持單籠飼養(yǎng)方式,光照:黑暗=12h:12h,室內(nèi)溫度控制在(24±2)℃。每天稱重、記錄、灌胃給藥,每天觀察記錄小鼠的體重、動(dòng)作行為、精神狀況、皮毛光澤度、飲食飲水量、大小便等情況。造模。采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測各組實(shí)驗(yàn)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改變情況。采用自主活動(dòng)箱實(shí)驗(yàn)來檢測各組實(shí)驗(yàn)小鼠動(dòng)作、活動(dòng)改變情況。采用組織化學(xué)法檢測各組實(shí)驗(yàn)小鼠腦組織的自由基(SOD、MDA)和NO、NOS以及膽堿酯能(Ch AT、TCh E)水平的變化。結(jié)果:與空白組比較,自主活動(dòng)試驗(yàn)中合并組、輕觸組小鼠的活動(dòng)的次數(shù)和活動(dòng)的總路程明顯下降(P0.05);換籠組有降低趨勢,但差異不顯著。在水迷宮定位航行能力試驗(yàn)中,換籠組、輕觸組、合并組小鼠,其上平臺(tái)的潛伏期與游泳的總的路程較空白組明顯延長(P0.05,P0.01);在空間探索能力檢測中,結(jié)果與前實(shí)驗(yàn)結(jié)果保持一致,換籠組、輕觸組、合并組小鼠的穿越平臺(tái)的次數(shù)、第一象限時(shí)間明顯減少及首次抵原平臺(tái)時(shí)間明顯增長(P0.05,P0.01)。在促眠實(shí)驗(yàn)中結(jié)果表明三草安神方有非常好的鎮(zhèn)靜催眠作用,但需要達(dá)到一定的劑量。經(jīng)過睡眠剝奪的小鼠一般指標(biāo)情況要差于空白組小鼠,體重增長量也要低于空白組小鼠,但是西藥組和三草安神方大劑量組能有效改善此種狀況。在水迷宮試驗(yàn)中,三草安神方干預(yù)組的小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)及目標(biāo)象限時(shí)間明顯增加,第1次抵原平臺(tái)時(shí)間明顯縮短,但各組間差異顯著性不一(P0.01,P0.05)。經(jīng)過三草安神方干預(yù)的小鼠SOD活性上升(P0.05),MDA含量下降(P0.05),NO及NOS含量降低(P0.05),Tch E活性及Ch AT活性明顯升高(P0.05)。結(jié)論:1.輕拍合并換籠法是安全、可靠、可行且經(jīng)濟(jì)方便適用的睡眠剝奪方法。2.三草安神方有顯著的鎮(zhèn)靜催眠作用,高劑量的三草安神方作用顯著。3.三草安神方能有效改善小鼠睡眠質(zhì)量,增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶能力。
【關(guān)鍵詞】:睡眠剝奪 自由基 神經(jīng)遞質(zhì)
【學(xué)位授予單位】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R-332;R256.23
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- ABSTRACT7-11
- 英文縮略詞表11-12
- 前言12-14
- 第一部分 理論研究14-32
- 1 中醫(yī)對(duì)寤寐的認(rèn)識(shí)14-17
- 1.1 神與寤寐14-15
- 1.2 陰陽變化與寤寐15-16
- 1.3 營衛(wèi)循行與寤寐16-17
- 1.4 蹺脈盛衰與寤寐17
- 2 中醫(yī)對(duì)不寐的辨治17-26
- 2.1 不寐的病因病機(jī)17-22
- 2.2 不寐的治療22-26
- 3 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)失眠的認(rèn)識(shí)26-30
- 3.1 失眠機(jī)制及病因研究26-28
- 3.2 失眠癥的治療28-30
- 4 失眠與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系30-32
- 第二部分 實(shí)驗(yàn)xO究32-49
- 實(shí)驗(yàn)1 睡眠剝奪小鼠模型的建立及篩選32-36
- 1.1 實(shí)驗(yàn)材料32
- 1.2 實(shí)驗(yàn)方法32-35
- 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-36
- 實(shí)驗(yàn)2 三草安神方促眠作用的實(shí)驗(yàn)研究36-39
- 2.1 實(shí)驗(yàn)材料36-37
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法37-38
- 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-39
- 實(shí)驗(yàn)3 三草安神方對(duì)睡眠剝奪小鼠一般特征及學(xué)習(xí)記憶的影響39-46
- 3.1 實(shí)驗(yàn)材料39-40
- 3.2 實(shí)驗(yàn)方法40-43
- 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果43-46
- 實(shí)驗(yàn)4 三草安神方對(duì)睡眠剝奪小鼠腦內(nèi)自由基、NO、NOS及學(xué)習(xí)記憶相關(guān)膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)的影響46-49
- 4.1 實(shí)驗(yàn)材料46
- 4.2 實(shí)驗(yàn)實(shí)施46-47
- 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果47-49
- 討論49-54
- 1 睡眠剝奪小鼠模型的評(píng)價(jià)49-50
- 1.1 失眠動(dòng)物模型研究現(xiàn)狀49
- 1.2 動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)49-50
- 2 寧心安神法對(duì)小鼠的干預(yù)作用50-54
- 結(jié)論54-55
- 參考文獻(xiàn)55-62
- 附錄62-70
- 計(jì)算公式62-63
- 綜述63-70
- 參考文獻(xiàn)66-70
- 致謝70
【參考文獻(xiàn)】
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