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人卵母細胞紡錘體的觀測在人類輔助生殖領域的初步臨床應用

發(fā)布時間:2020-11-09 14:25
   目的:(1) 探討人紡錘體與第一極體的位置關系,以驗證傳統(tǒng)ICSI操作的安全性;(2)探討紡錘體與人MⅡ期卵子正常受精、異常受精、卵裂以及第3天良好胚胎形成率的關系;(3)探討早期卵裂與胚胎質量的關系以及MⅡ期人卵紡錘體存在與否與早期卵裂的關系;(4)觀察環(huán)境溫度的改變對MⅡ期人卵紡錘體結構的影響。 方法:(1)36例因男性因素行單精子卵細胞漿內(nèi)注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治療的不孕婦女。用紡錘體成像系統(tǒng)(Polscope)觀察獲得的成熟(MⅡ期)卵子紡錘體的情況。未成熟(BⅤ期和MⅠ期)卵子在體外培養(yǎng)24~48h后觀察體外成熟卵子的紡錘體情況。根據(jù)第一極體與紡錘體之間形成的角度分為0°,0~80°,80~100°以及>100°組。同時還比較了體內(nèi)成熟卵和體外成熟卵紡錘體位置的差別。(2)在本中心接受ICSI治療的50例因丈夫男性因素就診的不孕婦女,取卵后用紡錘體成像系統(tǒng)觀察MⅡ期卵子紡錘體的存在情況,ICSI后16~20h后在倒置顯微鏡下觀察受精情況。于取卵后第3天的上午評價胚胎質量。將卵裂球數(shù)目>6個,碎片≤20%,卵裂球無明顯大小差異,無多核卵裂球的胚胎定義為良好胚胎。比較有無紡錘體組卵子的正常受精率、異常受精率、卵裂率以及良好胚胎形成率。(3)于ICSI后25~27h觀察卵裂情況。若此時出現(xiàn)了卵裂就認為該受精卵發(fā)生了早期卵裂(early cleavage,EC)。比較有無早期卵裂組的良好胚胎形成率以及早期卵裂與MⅡ期卵子紡錘體的關系。(4)40例非男性因素的不孕婦女,將常規(guī)IVF后未受精的MⅡ期卵子置于室溫(23~25℃)下直至紡錘體消失。于紡錘體消失后,將卵子分入3個實驗組:第1組為紡錘體消失以后立即復溫組;第2組為紡錘體消失以 后又在室溫下靜置smin再復溫組;第3組為紡錘體消失以后又 在室溫下靜置lomin再復溫組。卵子復溫后smin,10min,Zh 分別觀察紡錘體的復現(xiàn)情況。 結果:(1)體內(nèi)成熟組40個卵子,體外成熟組35個卵子。 處于0“組的體內(nèi)、體外成熟卵分別占5.9%和7.7%,0~80“ 組分別占88.2%和88.5%,80一100“組均為0.0%;100。組 分別為5.9%和3.8%。選擇同時有體內(nèi)和體外成熟卵子的患者 16例,體內(nèi)成熟組第一極體與人MH期卵子紡錘體之間的角度 (44.臉31 .1。)顯著高于體外成熟組(25.處26.5“) (只0.001)。(2)正常受精率和良好胚胎形成率,觀察到紡錘 體組均顯著高于未觀察到紡錘體組(只0.05)。兩組之間正常受 精的卵子卵裂率無顯著差異(乃0.05)。單原核和多原核的形成 率因為例數(shù)較少,未進行比較。(3)早期卵裂與紡錘體存在與 否的r,值為0.422,P二0.000。認為早期卵裂與MH期卵子紡 錘體存在呈正相關。EC組的良好胚胎形成率(86.4%)高于NEC 組(43.8%),差異有顯著性份毛二0.001)。(4)20個未受精的 Mll期卵子置于室溫下smin內(nèi)紡錘體均消失。立即復溫組中的 8個卵子復溫以后均再次出現(xiàn)了MH期紡錘體。靜置smin組中 的6個卵子復溫以后也均再次出現(xiàn)了MH期紡錘體。靜置10min 組中的6個卵子只有3個卵子再次出現(xiàn)了MH期紡錘體。對照 組的18個卵子放置于37oC恒溫板上觀察30min,紡錘體均未 見消失。 結論:(l)大多數(shù)MH期人卵第一極體的位置都不能精確 推測紡錘體的位置。傳統(tǒng)的工CSI操作基本是安全的。當然,在 紡錘體成像系統(tǒng)觀測下行工CS工將更為安全。(2)觀察到紡錘體 的Mll期卵子具有更高的正常受精率和D3天良好胚胎形成率。 (3)出現(xiàn)早期卵裂的胚胎D3天良好胚胎形成率高。早期卵裂 與紡錘體存在與否有較為密切的關系。(4) MH期卵子紡錘體對 環(huán)境溫度的改變非常敏感。溫度降低將導致紡錘體消失,隨著 時間的延長,紡錘體復現(xiàn)幾率明顯減少。
【學位單位】:第一軍醫(yī)大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2004
【中圖分類】:R321
【文章目錄】:
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 應用紡錘體成像系統(tǒng)探究人MⅡ期卵母細胞第一極體與紡錘體的位置關系
    材料和方法
    結果
    討論
第二部分 紡錘體與人卵母細胞質量的關系
    材料和方法
    結果
    討論
第三部分 人MⅡ期卵母細胞紡錘體與正常受精卵早期卵裂的關系
    材料和方法
    結果
    討論
第四部分 培養(yǎng)環(huán)境的溫度變化與人MⅡ期卵母細胞紡錘體形態(tài)學變化的關系
    材料和方法
    結果
    討論
全文小節(jié)
附圖
參考文獻
致謝
研究生在讀期間撰寫文章
綜述: 卵母細胞紡錘體的觀察及其在人類輔助生殖領域的應用與展望

【參考文獻】

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1 邢福祺,陳士嶺,閆宗合,陳東紅,孔令紅,宋蘭林,陳思梅;卵細胞質內(nèi)單精子注射治療不孕癥34例臨床總結[J];第一軍醫(yī)大學學報;1999年04期

2 羅琛,邢福祺,羅深秋;對曾育21三體綜合征患兒者行胚胎種植前遺傳學診斷獲妊娠1例[J];第一軍醫(yī)大學學報;2002年03期

3 朱亮,羅琛,黃敏珍,李紅,邢福祺;應用兩種麥管系統(tǒng)對小鼠囊胚的玻璃化冷凍[J];第一軍醫(yī)大學學報;2003年09期

4 朱亮;卵母細胞紡錘體觀察及在輔助生殖領域應用與展望[J];國外醫(yī)學(計劃生育分冊);2003年04期



本文編號:2876558

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