司來吉蘭對(duì)帕金森病模型大鼠胃腸TH、nNOS和α-Syn表達(dá)的影響
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【摘要】:目的觀察司來吉蘭(selegiline)對(duì)帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠胃竇、結(jié)腸酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,n NOS)和α-突觸核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)表達(dá)的影響,探討司來吉蘭對(duì)PD胃、腸功能障礙治療的作用及可能機(jī)制。方法1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組將72只健康雄性SD實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(對(duì)照組)、PD模型組(模型組)和司來吉蘭治療組(司來吉蘭組),每組又隨機(jī)分為4d、8 d兩個(gè)亞組,每組各12只大鼠。2帕金森病模型大鼠制備將葵花油與魚藤酮充分混勻震蕩,使其配置成2mg/ml的魚藤酮葵花油乳化液,后兩組大鼠采用頸背部皮下注射魚藤酮制備PD模型,仔細(xì)觀察并詳細(xì)記錄給魚藤酮后實(shí)驗(yàn)大鼠的行為學(xué)變化。發(fā)生行為學(xué)計(jì)分后即中止給藥。參照帕金森病大鼠模型行為學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行行為學(xué)檢測,選取2-6分實(shí)驗(yàn)大鼠作為PD模型。3給藥方法對(duì)照組:每日頸背部皮下注射葵花油2mg/kg,待模型制備成功后停止皮下注射,并灌胃給等體積生理鹽水直至?xí)r間點(diǎn)。模型組:在大鼠頸背部每日皮下注射魚藤酮葵花油乳液2mg/kg,待模型制備成功后停止皮下注射,并予等體積生理鹽水灌胃直至?xí)r間點(diǎn)。司來吉蘭組:模型制備成功后,每日予司來吉蘭0.5mg/kg灌胃,根據(jù)亞組分組情況分別連續(xù)給藥4 d或8 d。4胃固體食物殘留率和1 h糞便排出量及含水率測定每組大鼠分別于治療后4 d、8 d測定胃固體食物殘留率和1 h糞便排出量及含水率。5應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色和Western blot法,分別檢測各組大鼠胃竇、結(jié)腸TH、n NOS、和ɑ-Syn的表達(dá)變化情況。6組織切片采用OLYMPUS攝像顯微鏡(400×)攝像,并應(yīng)用Motic Med 6.0數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析,Western blot結(jié)果用Image J分析。7采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。數(shù)據(jù)做正態(tài)性W檢驗(yàn)和方差齊性Levene檢驗(yàn),采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)方差分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1與對(duì)照組比較,模型組大鼠各時(shí)間點(diǎn)胃內(nèi)固體食物殘留率顯著高于對(duì)照組(均P0.01);與模型組相比較,治療組大鼠各時(shí)間點(diǎn)胃內(nèi)固體食物殘留率顯著低于模型組(P0.05或P0.01);與治療4 d組相比較,治療8 d組大鼠胃內(nèi)固體食物殘留率顯著低于治療4 d組(P0.05)。2與對(duì)照組比較,模型組大鼠各時(shí)間點(diǎn)1h糞便排出量及含水率均低于對(duì)照組(均P0.01);與模型組比較,治療組大鼠各時(shí)間點(diǎn)1 h糞便排出量及含水率均高于模型組(P0.05),與治療4 d亞組相比較,治療8 d亞組大鼠1 h糞便排出量及含水率高于治療4 d亞組(P0.05)。3與對(duì)照組比較,模型組各時(shí)間點(diǎn)胃竇、結(jié)腸TH表達(dá)均明顯減少,n NOS、α-Syn表達(dá)均明顯增加,有顯著性差異(均P0.01)。與模型組比較,治療組各時(shí)間點(diǎn)胃竇、結(jié)腸TH表達(dá)均明顯增多,n NOS、α-Syn表達(dá)均明顯減少,均有顯著性差異(P0.05或P0.01)。與治療4 d組比較,治療8 d組大鼠時(shí)間點(diǎn)胃竇、結(jié)腸TH表達(dá)均升高(P0.05),n NOS、α-Syn表達(dá)降低(P0.05)。結(jié)論1帕金森病模型大鼠胃竇、結(jié)腸TH表達(dá)均減少,n NOS、α-Syn表達(dá)均增多,TH、n NOS和α-Syn參與了帕金森病胃腸功能障礙的發(fā)病過程。2司來吉蘭可改善PD大鼠胃腸功能障礙,其作用機(jī)制可能與其減輕PD模型大鼠胃腸多巴胺能神經(jīng)元的損傷和抑制n NOS、α-Syn表達(dá)有關(guān),且隨著時(shí)間的延長,作用更明顯。
【關(guān)鍵詞】:帕金森病 胃竇 結(jié)腸 司來吉蘭 酪氨酸羥化酶 神經(jīng)元型一氧化氮合酶 α-突觸核蛋白
【學(xué)位授予單位】:華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R742.5;R-332
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 英文縮略表10-11
- 引言11-13
- 第1章 實(shí)驗(yàn)研究13-48
- 1.1 材料與方法13-22
- 1.1.1 主要試劑13
- 1.1.2 主要儀器13-14
- 1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組14
- 1.1.4 帕金森病模型制備14-15
- 1.1.5 給藥方法15
- 1.1.6 胃固體食物殘留率測定15
- 1.1.7 糞便排出量及含水量測定15
- 1.1.8 免疫組織化學(xué)染色法檢測方法15-17
- 1.1.9 免疫印跡(Western blot)法檢測方法17-22
- 1.1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析22
- 1.2 結(jié)果22-37
- 1.2.1 各組大鼠胃固體食物殘留率的比較結(jié)果22
- 1.2.2 各組大鼠 1 h糞便排出量及含水率的比較結(jié)果22-24
- 1.2.3 各自大鼠胃竇、結(jié)腸TH、n NOS和 α-Syn蛋白免疫組化的檢測結(jié)果24-32
- 1.2.4 各組大鼠胃竇、結(jié)腸TH、n NOS和α-Syn蛋白Western blotting檢測結(jié)果32-37
- 1.3 討論37-43
- 1.3.1 帕金森動(dòng)物模型的制備38-40
- 1.3.2 TH、n NOS、α-Syn在帕金森病胃腸功能障礙中的作用40-42
- 1.3.3 司來吉蘭對(duì)PD胃腸功能障礙的治療作用及其對(duì)胃腸TH、n NOS和 α-Syn表達(dá)的影響42-43
- 1.4 小結(jié)43
- 參考文獻(xiàn)43-48
- 第2章 綜述 帕金森病消化功能紊亂的機(jī)制及治療研究進(jìn)展48-59
- 2.1 流涎48-51
- 2.2 吞咽困難51
- 2.3 胃排空延遲51-53
- 2.4 便秘53-55
- 參考文獻(xiàn)55-59
- 結(jié)論59-60
- 致謝60-61
- 導(dǎo)師簡介61-62
- 作者簡介62-63
- 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集63
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:司來吉蘭對(duì)帕金森病模型大鼠胃腸TH、nNOS和α-Syn表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):287514
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