正常規(guī)免疫組化染色過程中為防止試劑外溢,許多單位會使用商品化的組化筆。商品化的組化筆雖然使用方便,阻水效果好,但使用周期較短,價(jià)格高,額外增加了成本。本科室在參考相關(guān)文獻(xiàn)經(jīng)驗(yàn)~([1-3])的基礎(chǔ)上,在實(shí)踐中通過反復(fù)實(shí)驗(yàn),自制一款阻水劑應(yīng)用于日常免疫組化實(shí)驗(yàn)過程中,效果良好,現(xiàn)介紹如下。1材料與方法1. 1材料切片石蠟10 g,蜂蠟10 g,石蠟油10 g,空白唇
【部分圖文】：

膏在距離組織約0．2cm處畫圈2～3圈封邊［1］，即可開始下一步染色。2結(jié)果使用上述自制的阻水劑對免疫組化切片進(jìn)行畫圈后可以獲得比較滿意的效果(圖1、2)，能夠有效的避免抗體溢到組織外，反復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:免疫組化染色效果與使用商品化免疫組化筆相比無明顯差別。注意每次制作時(shí)只需要多做一些阻水劑待其凝固后便能夠長期存放置于冰箱的冷凍格中，待到使用時(shí)，從冰箱中取出，用小刀修整切面以便于畫圈。①②圖1使用阻水劑在組織周圍畫圈，滴加一抗后阻水劑封閉圈較完整，不影響一抗的孵育圖2一抗過夜后PBS沖洗切片阻水劑封閉圈仍然完整沒有缺口3討論目前最常用于免疫組化染色的商品化免疫組化筆畫圈時(shí)方便快捷，封圈牢固，抗體不易外溢，但也有諸如使用時(shí)產(chǎn)生揮發(fā)性化學(xué)性氣味、價(jià)格昂貴等缺點(diǎn)，使用期限也較短。而本科室自制阻水劑所使用的材料如石蠟和蜂蠟都來源于病理科日常工作中，兩者常溫皆為無色無味的固體，穩(wěn)定性較好，另一種材料石蠟油在臨床工作中常被用于灌腸時(shí)潤滑腸管及導(dǎo)尿管的潤滑，價(jià)格低廉，容易獲取，并且具有較低致敏性，對人體無影響，同時(shí)也具有良好的阻水作用。經(jīng)本科室多次操作及鏡下觀察，應(yīng)用于畫圈的阻水劑在免疫組化實(shí)驗(yàn)后期切片透明處理過程中，二甲苯可完全溶解而去除其中的石蠟，經(jīng)過2～3道二甲苯透明可以將阻水劑中的少量石蠟去除干凈，不影響觀察效果。綜上所述:本科室自制的阻水劑成本低，無污染，使用方便，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)對比，用自制的阻水劑代替免疫組化筆進(jìn)行封圈效果良好，染色結(jié)果穩(wěn)定，可以替代免疫組化筆在日常工作中的應(yīng)用，值得推廣。(本文承蒙江蘇省人民醫(yī)院病理科張煒明老師指導(dǎo)，特此致謝!)參考文獻(xiàn):

性樹膠固封。接受日期:2018－10－13作者單位:海南省人民醫(yī)院病理科，�？�570311作者簡介:陳世梁，男，主管技師。Tel:(0898)68642544，E-mail:chenshiliang168@163．com2結(jié)果103例乳腺癌前哨淋巴結(jié)冷凍切片組織結(jié)構(gòu)基本完整，薄厚均勻，未出現(xiàn)明顯皺折、裂隙及脫片現(xiàn)象，鏡下組織結(jié)構(gòu)清晰，紅藍(lán)對比鮮明，透明度較好，細(xì)胞無明顯腫脹和收縮，極少有冰晶形成，接近對應(yīng)冰剩組織石蠟切片(圖1、2)。①②圖1乳腺癌前哨淋巴結(jié)冷凍切片:組織結(jié)構(gòu)清晰，紅藍(lán)對比鮮明，透明度好，無冰晶形成圖2乳腺癌前哨淋巴結(jié)石蠟切片:組織結(jié)構(gòu)清晰，紅藍(lán)對比鮮明，透明度清晰3討論早期乳腺癌前哨淋巴結(jié)不同于一般淋巴結(jié)，其內(nèi)含有數(shù)量不等的脂肪，脂肪與淋巴組織參雜在一起造成制作高質(zhì)量的冷凍切片難度較大，因此要切好高質(zhì)量的前哨淋巴結(jié)冷凍切片應(yīng)注意以下幾個(gè)方面。3．1冰晶問題冷凍切片出現(xiàn)冰晶的主要原因是沒有迅速將組織冷凍到合適溫度，其形成機(jī)制主要有:(1)冰晶形成與結(jié)晶核的數(shù)目和晶體形成的速度有一定關(guān)系［1］。水在－4℃時(shí)體積最大的物理性質(zhì)決定了組織在－4℃停留時(shí)間越長，組織內(nèi)產(chǎn)生的冰晶體積越大，因此要最短時(shí)間內(nèi)使組織迅速冷凍降至－4℃以下，使結(jié)晶核形成快而多，使冰晶體積變小［2］。(2)組織中的水、脂肪和蛋白質(zhì)在同一冷凍溫度下冷凍速度不一致，在溫度下降某階段時(shí)，水在組織中容易從液體狀態(tài)轉(zhuǎn)化為固體狀態(tài)結(jié)冰成冰晶，若此時(shí)前哨淋巴結(jié)臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志JClinExpPathol2019Mar;35(3)·163·
【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

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本文編號：2869761