背景:深低溫停循環(huán)術(shù)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥已經(jīng)日益成為人們注意的焦點,其核心機(jī)制仍是全腦缺血再灌注損傷。目的:探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對海馬神經(jīng)細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷的保護(hù)性作用及其機(jī)制。方法:將培養(yǎng)至第7天的海馬神經(jīng)細(xì)胞隨機(jī)分為正常對照組、氧糖剝奪再灌注損傷組及骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體組,后2組進(jìn)行2 h氧糖剝奪再灌注損傷。造模后,3組海馬神經(jīng)細(xì)胞均更換為神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體組加入骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體,正常對照組和氧糖剝奪再灌注損傷組加入等量的PBS溶液。繼續(xù)培養(yǎng)24 h收集細(xì)胞進(jìn)行Western blot檢測,培養(yǎng)48 h進(jìn)行免疫熒光染色統(tǒng)計海馬神經(jīng)細(xì)胞存活率和突起生長情況。結(jié)果與結(jié)論:①與正常對照組比較,氧糖剝奪再灌注損傷組海馬神經(jīng)細(xì)胞存活率明顯降低,突起長度及分支數(shù)明顯受損,促炎因子表達(dá)水平顯著上升;②與氧糖剝奪再灌注損傷組比較,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體組神經(jīng)細(xì)胞存活率和突起長度及分支數(shù)顯著增加,肝細(xì)胞生長因子和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)水平顯著增加,促炎癥因子表達(dá)水平顯著下降;③結(jié)果提示,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體能減輕海馬神經(jīng)細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷,其機(jī)制可能與抑制促炎因子分泌和促進(jìn)肝細(xì)胞生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)有關(guān)。
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臣蒲Х椒ㄒ丫?ü?泄?嬌拼笱??锿?計學(xué)專家審核。文章版權(quán)：文章出版前雜志已與全體作者授權(quán)人簽署了版權(quán)相關(guān)協(xié)議。開放獲取聲明：這是一篇開放獲取文章，根據(jù)《知識共享許可協(xié)議》“署名-非商業(yè)性使用-相同方式共享4.0”條款，在合理引用的情況下，允許他人以非商業(yè)性目的基于原文內(nèi)容編輯、調(diào)整和擴(kuò)展，同時允許任何用戶閱讀、下載、拷貝、傳遞、打英檢索、超級鏈接該文獻(xiàn)，并為之建立索引，用作軟件的輸入數(shù)據(jù)或其它任何合法用途。圖注：Westernblot電泳圖片(A)和半定量分析(B，C)。與氧糖剝奪再灌注損傷組相比，aP<0.01。圖4Westernblot法檢測各組神經(jīng)細(xì)胞中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、肝細(xì)胞生長因子表達(dá)水平Figure4Westernblotwasusedtodetecttheexpressionlevelsofhepatocytegrowthfactorandbrain-derivedneurotrophicfactorinhippocampalneuronsineachgroup2.52.01.51.00.501.51.00.50aa肝細(xì)胞生長因子腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子Tubulin正常對照組氧糖剝奪再灌注損傷組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體組腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)量(相對于Tubulin)肝細(xì)胞生長因子表達(dá)量(相對于Tubulin)正常對照組氧糖剝奪再灌注損傷組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體組正常對照組氧糖剝奪再灌注損傷組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體組ABC圖注：Westernblot電泳圖片(A)和半定量分析(B-D)。與正常對照組相比，aP<0.001；與氧糖剝奪再灌注損傷組相比，bP<0.001。圖5Westernblot法檢測各組神經(jīng)細(xì)胞中促炎因子環(huán)氧化酶2、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和腫瘤壞死因子α表達(dá)水平Figure5Westernblotwasusedtodetectthe
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