目的探索CXC趨化因子配體13(CXCL13)對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSC)自噬和增殖的影響及機(jī)制。方法 hBMSC分為對(duì)照組、缺氧組、 CXCL13處理組、 CXCL13和SB203580的聯(lián)合處理組。除對(duì)照組外,其余各組均在920 mL/L N_2、 30 mL/L O_2和50 mL/L CO_2建立的細(xì)胞缺氧模型下進(jìn)行培養(yǎng)。缺氧組不進(jìn)行任何處理, CXCL13處理組給予50 ng/mL CXCL13重組蛋白刺激,聯(lián)合處理組則預(yù)先添加20μmol/L絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制劑SB203580,培養(yǎng)30 min后,再以50 ng/mL CXCL13刺激。分別采用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)hBMSC增殖活性, annexinⅤ-FITC/PI雙標(biāo)記結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)hBMSC的凋亡, Western blot法檢測(cè)hBMSC的核因子κB(NF-κB)、 beclin-1蛋白水平, ELISA檢測(cè)細(xì)胞裂解液自噬相關(guān)蛋白7(ATG7)的含量。結(jié)果與缺氧組及聯(lián)合處理組相比, CXCL13處理組hBMSC的細(xì)胞增殖活性、 beclin-1及NF-κB蛋白水平均升高、凋亡率明顯降低;細(xì)胞裂解液ATG7水平升高。結(jié)論缺氧環(huán)境下, CXCL13通過(guò)MAPK/NF-κB信號(hào)通路促進(jìn)hBMSC自噬和增殖。
【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞缺氧模型和實(shí)驗(yàn)分組
        1.2.2 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖
        1.2.3 Annexin Ⅴ-FITC/PI雙標(biāo)記結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.2.4 Western blot法檢測(cè)hBMSC的beclin-1、 NF-κB蛋白水平
        1.2.5 ELISA檢測(cè)hBMSC裂解液ATG7水平
        1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 CXCL13處理促進(jìn)hBMSC增殖
    2.2 CXCL13處理減少hBMSC凋亡
    2.3 CXCL13處理增加hBMSC的自噬
    2.4 CXCL13處理增加hBMSC的NF-κB蛋白表達(dá)
3 討論

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