發(fā)布時間：2020-11-01 03:45

　　 骨骼肌在興奮收縮偶聯(lián)過程中的實時超微結(jié)構(gòu)形態(tài)變化以及肌漿網(wǎng)內(nèi)Ca~(2+)如何釋放的問題是生物物理學(xué)及細胞生物學(xué)最感興趣的研究課題之一。由于常規(guī)研究方法不能在毫秒級水平獲得骨骼肌興奮收縮偶聯(lián)過程中的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)變化以及Ca~(2+)變化的相關(guān)信息，因此該課題也是目前國內(nèi)外研究的難點課題之一。 本課題以探索解決上述難題為研究目標，采用計算機實時控制的電刺激(時間分辨率為10us)—超低溫快速冷凍實時固定技術(shù)，結(jié)合冷凍置換技術(shù)和透射電子顯微鏡對骨骼肌在興奮收縮偶聯(lián)過程中各時間點的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)進行了實時分析研究，并對骨骼肌在興奮收縮偶聯(lián)過程中的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)的時相變化以及鈣離子釋放的可能機制進行了分析討論。結(jié)果發(fā)現(xiàn)： 一、采用快速冷凍實時固定技術(shù)固定的骨骼肌內(nèi)各種超微結(jié)構(gòu)保存完好，清晰可見。 二、骨骼肌在興奮收縮偶聯(lián)過程中三聯(lián)體的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)發(fā)生實時變化 三、骨骼肌興奮收縮偶聯(lián)時，細胞膜上及細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)大量小泡 1．施加電刺激4.6ms后，細胞膜下出現(xiàn)大量小泡，小泡間趨向融合，形成3-8個小泡組成的多聚體。 2．電刺激24ms后小泡消失，僅殘余少量有被小泡緊靠細胞膜下 結(jié)果提示細胞內(nèi)鈣離子濃度升高有可能通過小泡轉(zhuǎn)運方式將細胞外鈣離子轉(zhuǎn)入細胞內(nèi)實現(xiàn)，激光共聚焦顯微鏡下觀察到的Ca~(2+)∶sparks現(xiàn)象也可能通過多個小泡聚合引起局部鈣離子濃度升高。超低溫快速冷凍實時固定技術(shù)及電鏡技術(shù)是研究毫秒級生理活動的極為有效的手段，為今后研究生理活動的瞬時功能形態(tài)變化奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：Q67
【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
中文詳細摘要
前言
材料與方法
    一、 實驗用試劑及配制
        （一） 、 實驗用試劑
        （二） 、 溶液的配制
    二、 實驗器械和儀器
    三、 實驗動物及樣品的取材
        （一） 、 實驗動物
        （二） 、 樣品的取材
    四、 電刺激-超低溫快速冷凍固定毫秒級實時處理系統(tǒng)
        （一） 、 電刺激-超低溫快速冷凍固定毫秒級實時處理系統(tǒng)的組成
        （二） 、 電刺激-超低溫快速冷凍固定毫秒級實時處理系統(tǒng)的原理
        （三） 、 縫匠肌組織的電刺激-超低溫快速冷凍固定實時處理的操作
    五、 冷凍置換
    六、 制樣和電鏡觀察
        （一） 、 脫水、浸透和包埋
        （二） 、 切片和染色
        （三） 、 電鏡觀察
結(jié)果
    一、 冷凍固定后骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的特點
    二、 骨骼肌在興奮-收縮偶聯(lián)過程中超微結(jié)構(gòu)形態(tài)的實時變化
        （一） 骨骼肌肌膜下小泡超微結(jié)構(gòu)形態(tài)實時變化
        （二） 骨骼肌三聯(lián)體的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)實時變化
討論
    一: 電刺激-超低溫快速冷凍實時固定系統(tǒng)建立的意義
    二: 骨骼肌三聯(lián)體在興奮一收縮偶聯(lián)過程中實時超微結(jié)構(gòu)形態(tài)變化與其功能的關(guān)系
    三: 骨骼肌肌膜下小泡與激光聚焦顯微鏡下觀察Ca-2+sparks現(xiàn)象的關(guān)系
小結(jié)
參考文獻
綜述
    綜述正文
    綜述參考文獻
學(xué)習(xí)期間發(fā)表的文章和擬發(fā)表的文章
致謝

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 楊勇驥,鄭尊,夏愿耀,顏永碧,王根英;生物樣品的快速冷凍及冰凍置換[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1991年06期

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本文編號：2864988