目的探討血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)信號(hào)通路對(duì)小鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系增殖的影響。方法取出生1～3 d的小鼠乳鼠大腦皮質(zhì)培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞,取腦膜培養(yǎng)成纖維細(xì)胞,免疫細(xì)胞化學(xué)熒光染色膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)鑒定星形膠質(zhì)細(xì)胞純度,染色纖連蛋白(FN)鑒定成纖維細(xì)胞純度。通過(guò)向小鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)細(xì)胞體系中加入細(xì)胞因子血小板衍生生長(zhǎng)因子-BB(PDGF-BB)刺激細(xì)胞或抑制劑AG1296進(jìn)行干預(yù),觀察各組細(xì)胞增殖情況,Western blot檢測(cè)共培養(yǎng)細(xì)胞系中p-PDGFR-β、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)的表達(dá)變化。結(jié)果鑒定結(jié)果顯示星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的細(xì)胞純度達(dá)到90%。顯微鏡下觀察顯示,加入PDGF-BB后星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系增殖明顯并形成團(tuán)塊,給予抑制劑AG1296則增殖受到抑制,團(tuán)塊明顯減少。Western blot結(jié)果顯示加入PDGF-BB時(shí),p-PDGFRβ、p-Akt表達(dá)增多(P0.01);給予抑制劑AG1296則表達(dá)減少(P0.05)。結(jié)論 PDGFR信號(hào)通路促進(jìn)體外小鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的增殖。
【部分圖文】：

４期裴丹，李洪鵬．ＰＤＧＦＲ信號(hào)通路促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞簇的成團(tuán)效應(yīng)數(shù)字平臺(tái)：ｈｔｔｐ：／／ｙｘｘｂ．ｘｊｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ微信公眾號(hào)：西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)醫(yī)學(xué)版２結(jié)果２．１免疫熒光染色鑒定星形膠質(zhì)細(xì)胞及成纖維細(xì)胞免疫熒光ＧＦＡＰ和ＦＮ染色結(jié)果，傳代３代以上的小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞ＧＦＡＰ和成纖維細(xì)胞ＦＮ陽(yáng)性表達(dá)高于９５％（圖１）。據(jù)此確認(rèn)體外培養(yǎng)的腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞純度可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。圖１小鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果Ｆｉｇ．１Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇｏｆｍｏｕｓｅｂｒａｉｎａｓｔｒｏ－ｃｙｔｅｓａｎｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓＡ：星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物ＧＦＡＰ蛋白陽(yáng)性表達(dá)為紅色；Ｂ：成纖維細(xì)胞標(biāo)記物ＦＮ蛋白陽(yáng)性表達(dá)為綠色。２．２ＰＤＧＦ－ＢＢ刺激共培養(yǎng)體系的細(xì)胞增殖當(dāng)腦膜成纖維細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，未加任何處理因素時(shí)，單獨(dú)生長(zhǎng)形成獨(dú)立平坦的集落（圖２Ａ）。用ＰＤＧＦ－ＢＢ刺激時(shí)，細(xì)胞明顯增殖并聚集生長(zhǎng)形成結(jié)節(jié)（圖２Ｂ）。說(shuō)明ＰＤＧＦ－ＢＢ可促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系的細(xì)胞增殖。圖２ＰＤＧＦ－ＢＢ對(duì)腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系增殖的影響Ｆｉｇ．２ＥｆｆｅｃｔｏｆＰＤＧＦ－ＢＢｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｓｔｒｏ－ｃｙｔｅａｎｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍＡ：空白對(duì)照組，即共培養(yǎng)體系未加任何處理因素；Ｂ：１０ｎｇ／ｍＬＰＤＧＦ－

圖２ＰＤＧＦ－ＢＢ對(duì)腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系增殖的影響
【參考文獻(xiàn)】

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