目的探討血小板衍生生長因子受體(PDGFR)信號通路對小鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系增殖的影響。方法取出生1～3 d的小鼠乳鼠大腦皮質(zhì)培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞,取腦膜培養(yǎng)成纖維細(xì)胞,免疫細(xì)胞化學(xué)熒光染色膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)鑒定星形膠質(zhì)細(xì)胞純度,染色纖連蛋白(FN)鑒定成纖維細(xì)胞純度。通過向小鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)細(xì)胞體系中加入細(xì)胞因子血小板衍生生長因子-BB(PDGF-BB)刺激細(xì)胞或抑制劑AG1296進(jìn)行干預(yù),觀察各組細(xì)胞增殖情況,Western blot檢測共培養(yǎng)細(xì)胞系中p-PDGFR-β、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)的表達(dá)變化。結(jié)果鑒定結(jié)果顯示星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的細(xì)胞純度達(dá)到90%。顯微鏡下觀察顯示,加入PDGF-BB后星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系增殖明顯并形成團(tuán)塊,給予抑制劑AG1296則增殖受到抑制,團(tuán)塊明顯減少。Western blot結(jié)果顯示加入PDGF-BB時(shí),p-PDGFRβ、p-Akt表達(dá)增多(P0.01);給予抑制劑AG1296則表達(dá)減少(P0.05)。結(jié)論 PDGFR信號通路促進(jìn)體外小鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的增殖。
【部分圖文】：

４期裴丹，李洪鵬．ＰＤＧＦＲ信號通路促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞簇的成團(tuán)效應(yīng)數(shù)字平臺：ｈｔｔｐ：／／ｙｘｘｂ．ｘｊｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ微信公眾號：西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)醫(yī)學(xué)版２結(jié)果２．１免疫熒光染色鑒定星形膠質(zhì)細(xì)胞及成纖維細(xì)胞免疫熒光ＧＦＡＰ和ＦＮ染色結(jié)果，傳代３代以上的小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞ＧＦＡＰ和成纖維細(xì)胞ＦＮ陽性表達(dá)高于９５％（圖１）。據(jù)此確認(rèn)體外培養(yǎng)的腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞純度可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。圖１小鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果Ｆｉｇ．１Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇｏｆｍｏｕｓｅｂｒａｉｎａｓｔｒｏ－ｃｙｔｅｓａｎｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓＡ：星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物ＧＦＡＰ蛋白陽性表達(dá)為紅色；Ｂ：成纖維細(xì)胞標(biāo)記物ＦＮ蛋白陽性表達(dá)為綠色。２．２ＰＤＧＦ－ＢＢ刺激共培養(yǎng)體系的細(xì)胞增殖當(dāng)腦膜成纖維細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，未加任何處理因素時(shí)，單獨(dú)生長形成獨(dú)立平坦的集落（圖２Ａ）。用ＰＤＧＦ－ＢＢ刺激時(shí)，細(xì)胞明顯增殖并聚集生長形成結(jié)節(jié)（圖２Ｂ）。說明ＰＤＧＦ－ＢＢ可促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系的細(xì)胞增殖。圖２ＰＤＧＦ－ＢＢ對腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系增殖的影響Ｆｉｇ．２ＥｆｆｅｃｔｏｆＰＤＧＦ－ＢＢｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｓｔｒｏ－ｃｙｔｅａｎｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍＡ：空白對照組，即共培養(yǎng)體系未加任何處理因素；Ｂ：１０ｎｇ／ｍＬＰＤＧＦ－

圖２ＰＤＧＦ－ＢＢ對腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)體系增殖的影響
【參考文獻(xiàn)】

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1 趙任杰;李均;;PDGF及PDGFR在腎間質(zhì)纖維化中的研究進(jìn)展[J];西部醫(yī)學(xué);2013年05期

【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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1 王一辰;王志平;;血小板源性生長因子在腎臟疾病的研究進(jìn)展[J];國際泌尿系統(tǒng)雜志;2010年03期

2 戎贊華;段惠軍;;血小板源性生長因子與腎臟疾病的研究進(jìn)展[J];河北醫(yī)藥;2010年07期

3 袁向飛;陸敏;;Ras/MAPK與PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及其相互作用[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2006年03期

【相似文獻(xiàn)】

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1 Alberini CM;Cruz E;Descalzi G;Bessières B;Gao V;唐穎馨;;星形膠質(zhì)細(xì)胞糖原和乳酸:學(xué)習(xí)和記憶機(jī)制探索新發(fā)現(xiàn)[J];神經(jīng)損傷與功能重建;2017年06期

2 趙海軍;李燕;盧巖;王媛;韓冰冰;王世軍;;星形膠質(zhì)細(xì)胞對神經(jīng)元能量代謝的影響[J];卒中與神經(jīng)疾病;2015年06期

3 楊茜;周華軍;;反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞與軸突再生[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2015年03期

4 劉慧,王小軍,胡榮,楊忠,蔡文琴;星形膠質(zhì)細(xì)胞[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2004年01期

5 Nina Vardjan;Vladimir Parpura;Robert Zorec;王晶;;星形膠質(zhì)細(xì)胞松散的興奮-分泌耦合(英文)[J];神經(jīng)損傷與功能重建;2016年03期

6 接琳琳;管英俊;陳燕春;周風(fēng)華;趙會(huì);丁寶龍;;星形膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元間通訊的研究進(jìn)展[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2014年06期

7 ;研究人員發(fā)現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞可調(diào)節(jié)呼吸強(qiáng)度[J];中國科技信息;2010年17期

8 余濤;劉秋菊;金璐;文鐵橋;;星形膠質(zhì)細(xì)胞低溫去分化條件[J];上海大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年06期

9 朱濤,姚智,袁漢娜,陸伯剛,楊樹源;腦星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌IL-6的體外研究[J];中國免疫學(xué)雜志;1998年06期

10 Janosch P.Heller;Dmitri A.Rusakov;王晶;;星形膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)可塑性:理解突觸微環(huán)境[J];神經(jīng)損傷與功能重建;2016年01期

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2 李煜興;星形膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸釋放機(jī)制的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

3 王巖;損傷引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)可塑性研究[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2005年

4 張雄;海馬齒狀回星形膠質(zhì)細(xì)胞的長時(shí)程增強(qiáng)[D];浙江大學(xué);2005年

5 陳曉科;神經(jīng)遞質(zhì)囊泡分泌孔道的動(dòng)力學(xué)特征及其調(diào)控[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2005年

6 盛建松;Bystin在反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)及其功能研究[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2006年

7 呂蘭海;過氧化氫、Aβ（1-42）和Tau蛋白對兩原代培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞的效應(yīng)對比研究[D];浙江大學(xué);2007年

8 張猛;星形膠質(zhì)細(xì)胞來源的BDNF對晚期LTP具有關(guān)鍵的調(diào)控作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

9 唐文紅;NDRG2調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞攝取谷氨酸的作用及機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

10 王革非;流感病毒誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的病理變化及天然免疫反應(yīng)[D];汕頭大學(xué);2008年

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1 張利平;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在脂肪基質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞過程中的作用[D];華北理工大學(xué);2018年

2 程雪軍;用大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞作為飼養(yǎng)層制備小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的研究[D];杭州師范大學(xué);2018年

3 王娜;星形膠質(zhì)細(xì)胞TWIK-1通道調(diào)控海馬神經(jīng)元活動(dòng)的作用研究和機(jī)制初探[D];華中科技大學(xué);2018年

4 曹陽;三方突觸STDP可塑性動(dòng)力學(xué)模型研究[D];北京郵電大學(xué);2018年

5 劉國偉;葉酸在星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用及其機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2018年

6 于秋梅;星形膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)干細(xì)胞特性研究[D];蘇州大學(xué);2017年

7 涂然;永生化小鼠大腦星形膠質(zhì)細(xì)胞系建立[D];陜西師范大學(xué);2016年

8 朱猛;1、2型星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離純化培養(yǎng)及其生物學(xué)特性研究[D];蘇州大學(xué);2001年

9 胡遵魯;干擾Fign基因表達(dá)對大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移的影響及機(jī)制研究[D];南通大學(xué);2016年

10 朱喜忠;Scleraxis慢病毒載體介導(dǎo)hAMSCs向韌帶成纖維細(xì)胞分化的體外研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2018年

本文編號：2862568