發(fā)布時間：2020-10-29 09:27

　　 目的對幾種天然環(huán)二核苷酸(cyclic dinucleotide,CDN)作為人體佐劑作用的潛力進(jìn)行比較。方法以相同劑量的CDN(c-di-GMP、c-di-AMP、3′3′cGAMP和2′3′cGAMP)同人體來源的單核細(xì)胞白血病細(xì)胞(human monocytic leukaemia cells,THP-1)共孵育,同時將CDN(c-di-GMP和2′3′cGAMP)與脂質(zhì)體混合后同THP-1細(xì)胞共孵育,刺激5 h后,收集細(xì)胞及培養(yǎng)液,采用實時定量PCR及ELISA法檢測IFNβ基因及蛋白的表達(dá)水平,同時檢測脂質(zhì)體對不同類型CDN刺激作用的影響。結(jié)果 4種CDN均能有效刺激THP-1細(xì)胞IFNβ基因及蛋白表達(dá)水平的提高,且對人體細(xì)胞作用從強(qiáng)到弱依次為2′3′cGAMP、3′3′cGAMP、c-di-AMP和c-di-GMP,各自之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P 0. 01)。脂質(zhì)體能顯著增強(qiáng)典型和非典型CDN對THP-1細(xì)胞的刺激作用,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P 0. 01)。結(jié)論 4種天然CDN對人體均具有潛在的佐劑效應(yīng),從作用強(qiáng)度看,2′3′cGAMP是最優(yōu)選擇,同時脂質(zhì)體能增強(qiáng)CDN的這種效應(yīng),為將來進(jìn)一步對CDN類化合物的佐劑作用的研究奠定基礎(chǔ)。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 CDN及細(xì)胞
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.4 CDN與細(xì)胞的共孵育
    1.5 IFNβ基因m RNA轉(zhuǎn)錄水平的檢測
    1.6 IFNβ蛋白表達(dá)水平的檢測
    1.7 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 不同類型CDN對人體細(xì)胞IFNβ基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
    2.2 不同類型CDN對人體細(xì)胞IFNβ蛋白表達(dá)的影響
    2.3 脂質(zhì)體對CDN刺激作用的影響
3 討論

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