模擬高原缺氧大鼠骨髓細(xì)胞EPOR的研究
發(fā)布時(shí)間:2020-10-25 03:33
目的:高原缺氧時(shí)紅細(xì)胞增多,紅細(xì)胞適度增多可以改善組織供氧,是缺氧習(xí)服-適應(yīng)的重要機(jī)制之一。EPO是體內(nèi)調(diào)節(jié)紅細(xì)胞生成的最重要的糖蛋白,能刺激紅系祖細(xì)胞的增殖、分化和成熟。一般認(rèn)為組織缺氧時(shí)EPO分泌增加可能是高原缺氧紅細(xì)胞增多的原因。本文旨在研究模擬高原缺氧時(shí)骨髓細(xì)胞EPOR的變化,探討高原缺氧時(shí)紅細(xì)胞增多的機(jī)制。 方法:實(shí)驗(yàn)用Wistar大鼠,體重150g-200g,雌雄各半。隨機(jī)分為4組:常氧對(duì)照組和模擬缺氧5天、15天和30天組。模擬缺氧組在低壓艙實(shí)驗(yàn)室模擬海拔5000米缺氧。每天減壓23小時(shí),1小時(shí)喂食和打掃衛(wèi)生。提取大鼠骨髓細(xì)胞的總mRNA,用RT-PCR方法檢測(cè)4組大鼠骨髓細(xì)胞EPORmRNA的表達(dá)。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳,進(jìn)行密度掃描,并以共同擴(kuò)增的β-actin蛋白基因作為內(nèi)參照,二者擴(kuò)增帶密度之比表示EPORmRNA表達(dá)水平。用~(125)I-EPO與骨髓密度分離細(xì)胞(ρ<1.077g/ml)進(jìn)行放射性配體受體結(jié)合實(shí)驗(yàn),測(cè)定各組大鼠骨髓細(xì)胞表面EPOR的數(shù)量和親和力的變化。同時(shí)用瑞氏染色觀察了各組大鼠骨髓像。 結(jié)果:1.缺氧5天,15天大鼠骨髓細(xì)胞EPOR基因表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組,缺氧30天則接近了對(duì)照水平。2.缺氧5天的大鼠骨髓有核細(xì)胞EPOR親和力是升高的,而缺氧15天和30天大鼠的骨髓有核細(xì)胞EPOR親和力是減小的。EPOR的數(shù)量在整個(gè)缺氧過(guò)程中呈現(xiàn)增高的趨勢(shì)。3.骨髓像觀察到缺氧5天大鼠骨髓紅系計(jì)數(shù)比例高于對(duì)照,缺氧15天和30天骨髓淋巴系計(jì)數(shù)比例高于對(duì)照,缺氧30天骨髓粒系計(jì)數(shù)比例低于對(duì)照。 結(jié)論: 1.缺氧可調(diào)節(jié)大鼠骨髓細(xì)胞EPORmRNA的表達(dá),缺氧5天與缺氧15 天大鼠骨髓細(xì)胞 EPOR mRNA的表達(dá)與對(duì)照組相比差異顯著,缺氧 30天與 對(duì)照組無(wú)顯著性差異。 2.骨髓細(xì)胞表達(dá)高親和力的EPOR(Kd值為2960PM),缺氧5天的 大鼠骨髓有核細(xì)胞 EPOR親和力是升高的,而缺氧 15天和 30天大鼠的骨髓 有核細(xì)胞EPOR親和力是減小的。EPOR的數(shù)量在整個(gè)缺氧過(guò)程中呈現(xiàn)增高 的趨勢(shì)。測(cè)得的細(xì)胞表面EPOR數(shù)目與EPOR mRNA表達(dá)量在高原缺氧過(guò) 程中的變化是相似。EPO-EPOR系統(tǒng)是參與調(diào)節(jié)紅細(xì)胞生成的最主要因子, 高原缺氧后期紅細(xì)胞的增多可能有其他因素的參與。 3.缺氧對(duì)大鼠骨髓像的影響并不僅限于紅系,其對(duì)粒系和淋巴系比例 的改變也有影響。缺氧還影響了骨髓細(xì)胞的形態(tài)。這些可能是組織對(duì)缺氧過(guò) 程的適應(yīng)性改變。
【學(xué)位單位】:第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2002
【中圖分類】:R363
【文章目錄】:
英文摘要
中文摘要
論文正文 模擬高原缺氧大鼠骨髓細(xì)胞EPOR研究
前言
第一部分 模擬高原缺氧大鼠骨髓細(xì)胞EPOR基因表達(dá)的研究
材料與方法
結(jié)果
第二部分 模擬高原缺氧大鼠骨髓細(xì)胞EPOR親和力及數(shù)量的測(cè)定
材料與方法
結(jié)果
第三部分 模擬高原缺氧大鼠骨髓像改變的觀察
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
照片
參考文獻(xiàn)
致謝
文獻(xiàn)綜述 EPO-EPOR系統(tǒng)與缺氧
參考文獻(xiàn)
【引證文獻(xiàn)】
本文編號(hào):2855403
【學(xué)位單位】:第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2002
【中圖分類】:R363
【文章目錄】:
英文摘要
中文摘要
論文正文 模擬高原缺氧大鼠骨髓細(xì)胞EPOR研究
前言
第一部分 模擬高原缺氧大鼠骨髓細(xì)胞EPOR基因表達(dá)的研究
材料與方法
結(jié)果
第二部分 模擬高原缺氧大鼠骨髓細(xì)胞EPOR親和力及數(shù)量的測(cè)定
材料與方法
結(jié)果
第三部分 模擬高原缺氧大鼠骨髓像改變的觀察
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
照片
參考文獻(xiàn)
致謝
文獻(xiàn)綜述 EPO-EPOR系統(tǒng)與缺氧
參考文獻(xiàn)
【引證文獻(xiàn)】
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1 穆秉桃;慢性高原病骨髓單個(gè)核細(xì)胞及上清液IGF-1和IGF-2的表達(dá)研究[D];青海大學(xué);2011年
2 曹蕾;“高住低練”對(duì)大鼠骨髓促紅細(xì)胞生成素受體的影響[D];湖南師范大學(xué);2006年
3 皮亦華;高住低訓(xùn)促進(jìn)大鼠紅系造血的研究[D];湖南師范大學(xué);2006年
本文編號(hào):2855403
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