相對于細(xì)菌和動物細(xì)胞,人的細(xì)胞用于基因突變實(shí)驗有更大的意義,其結(jié)果更能客觀地反映人體的情況,可避免從細(xì)菌和動物細(xì)胞所得的結(jié)果外推到人類可能產(chǎn)生的誤差。在哺乳類細(xì)胞基因突變實(shí)驗中,以TK基因突變實(shí)驗和HPRT實(shí)驗使用最為廣泛。目前已經(jīng)發(fā)展了數(shù)種可用于TK基因突變實(shí)驗的TK~(+/-)雜合型人細(xì)胞,其中使用最多的是從WI-L2類淋巴母細(xì)胞發(fā)展起來的一系列細(xì)胞,包括TK6,TK6-E6,WTK1等。這幾種細(xì)胞p53基因的狀態(tài)各不相同,TK6是p53野生性,TK6-E6是p53缺失型,WTK1是p53突變型。WI-L2家族細(xì)胞目前多用于輻照的致突變實(shí)驗,用以研究p53功能,在遺傳毒性評價方面的應(yīng)用還不廣泛。 本研究選取了四種不同結(jié)構(gòu)和致突變類型化學(xué)物EMS(甲磺酸乙酯,ethyl methanesulfonate),MMS(甲磺酸甲酯,methyl methanesulfonate),GLY(乙二醛,glyoxal),OPD(鄰苯二胺,o-phenylenediamine)做受試物,實(shí)驗方法采用MLA實(shí)驗非常成熟的微孔培養(yǎng)板法。系統(tǒng)比較TK6,TK6-E6兩種不同p53狀態(tài)細(xì)胞在TK和HPRT兩個位點(diǎn)的基因突變實(shí)驗。為WK-L2家族的人淋巴母細(xì)胞在遺傳毒性檢測和評價中的應(yīng)用積累資料。實(shí)驗結(jié)果如下: TK6和TK6-E6細(xì)胞對四種受試物的毒性耐受力不同,TK6-E6比TK6對受試物毒性較為耐受,RS(相對存活率)是較好的能真實(shí)反映毒性水平指標(biāo),但RSG(相對懸浮生長率)測定所用時間短,在劑量設(shè)計時RSG是方便和有效的選擇。TK自發(fā)突變率:TK6細(xì)胞為5.48～10.72×10-6,TK6-E6為15.09～19.75×10-6,HPRT自發(fā)突變率:TK6細(xì)胞為5.33～9.55×10-6,TK6-E6細(xì)胞
【學(xué)位單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：R346
【部分圖文】：

研究生學(xué)位論文TK6和TK6一E6細(xì)胞TK、HPTR基因突變實(shí)驗比較研究2.2細(xì)胞生長和接種效率指標(biāo)比較:受試物的細(xì)胞毒性用受試物處理后不同時間細(xì)胞增殖情況如CG(細(xì)胞增角率)，RSG(相對懸浮增長率)，RS(相對存活率)，RPE(相對接種效率)來反映。2.2.1TK6，TK6一E6兩種細(xì)胞增殖率(RsG)的比較:處理后第一個3天和第二個3天細(xì)胞相對懸浮增長率分別用RSG3和RSG6表示，RSG3和RSG6在兩種細(xì)胞中比較見圖l。TK6細(xì)胞的致突變實(shí)驗中，RSG3小于RSG6;但是在TK6一E6細(xì)胞致突變實(shí)驗中，是RSG3大于RSG6。

研究生學(xué)位論文TK6和TK6一E6細(xì)胞TK、HPTR基因突變實(shí)驗比較研究PRE6來表示。兩種細(xì)胞不同時間的相對接種效率(RPEn)比較見圖2。RPEO同即E3，RPE6t匕，在TK6，TK6一E6中都是最低。即E3和RPE6的情況在兩種細(xì)胞中的情況不同，在TK6細(xì)胞中，即E3t匕RPE6高;在TK6一E6細(xì)胞中，RPE6t匕即E3高。

研究生學(xué)位論文TK6和TK6一E6細(xì)胞TK、HP盯基因突變實(shí)驗比較研究2.4慢生長突變集落比例RSC比較。表11.兩種細(xì)胞自發(fā)和誘發(fā)的相對慢生長突變集落(RSC)比較TK6TK6一E6EMSMMSGLYOPOGl萬OPD0707gR︸，n︸O八︶.…000UnO八︶00︸勺O八︸990八︸.…000000，jo‘J44，J000八U00︸、︶﹃、︼4氣j，、︼，‘000042423530on︶00Rn八︸O了n︸33:20000溶劑對照低劑量中劑量高劑量EMSMMS0‘850.840.800.800‘810.910.850.90
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本文編號：2855010