目的:探究青藤堿(SM)對腦中動脈阻塞(MCAO)大鼠腦缺血損傷的作用及機制。方法:線栓法復制大鼠MCAO模型,TTC染色檢測腦梗死面積,免疫組化和Western blot檢測增殖、凋亡及自噬標記蛋白的表達,ELISA檢測脂質過氧化物及炎癥因子的含量。結果:SM能顯著減少MCAO大鼠腦梗死面積;免疫組化及Western blot結果顯示,SM能明顯促進MCAO大鼠增殖標記蛋白Ki67及凋亡標記蛋白Bcl-2的表達,降低Caspase-3和Bax表達水平。同時,SM還能明顯降低MCAO大鼠血清脂質過氧化物(LDH、MDA)及炎癥因子(NO、IL-6)的含量。此外,SM可明顯抑制MCAO大鼠自噬標記蛋白Beclin1表達,降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值,促進p62的表達。SM處理后還能顯著抑制m TOR/Ulk1通路蛋白Ulk1表達,升高m TOR表達水平。結論:SM可通過m TOR/Ulk1通路抑制缺血誘導的異常自噬,從而緩解MCAO大鼠腦缺血損傷。
【部分圖文】：

ymphoma2，Bcl-2)的表達，促進Caspase-3和Bcl-2相關X蛋白(Bcl-2asso-ciatedXprotein，Bax)的表達(P＜0.01，P＜0.001，圖3);SM能顯著誘導MCAO大鼠腦組織Ki67和Bcl-2的表達，降低Caspase-3和Bax的表達水平(P＜0.05，P＜0.01，圖3)。2.3SM對MCAO大鼠神經(jīng)炎癥及脂質過氧化的影響ELISA實驗結果表明，缺血缺氧能明顯誘導大鼠血清LDH、MDA、NO和IL-6的分泌(P＜0.01，圖4);SM可顯著降低MCAO大鼠血清LDH、MDA、圖1SM對MCAO大鼠腦梗死的影響Fig．1EffectofSMoncerebralinfractionofMCAOratsNote:A.ThechemicalstructureofSM;B.TheareaofcerebralinfractionwasdeterminedbyTTCstaining.＊＊.P＜0.01versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05versusMCAOgroup.·24·中國免疫學雜志2019年第35卷

NO和IL-6的含量(P＜0.05，圖4)。2.4SM對MCAO大鼠異常自噬及自噬通路的影響為了探究SM緩解MCAO大鼠缺血損傷的機制，我們檢測了自噬標記蛋白及自噬相關通路蛋白的表達情況。與HealthyControl比較，MCAO組大鼠腦組織Beclin1表達水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明顯升高，p62表達水平明顯降低(P＜0.001，圖5);與MCAO組比較，MCAO+SM組大鼠腦組織Beclin1圖2SM對MCAO大鼠腦細胞增殖及凋亡的影響Fig．2EffectsofSMoncellproliferationandapoptosisofratsNote:ImmunohistochemicalwasperformedforexpressionsofKi67andCaspase-3.＊＊.P＜0.01versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05versusMCAOgroup.Allexperimentswererepeatedatleastthreetimes.圖3SM對MCAO大鼠腦組織增殖及凋亡標記蛋白表達的影響Fig．3EffectsofSMonproliferation-andapoptosis-relat-edproteinsofMCAOratsNote:WesternblotwasemployedtodeterminetheproteinlevelsofKi67，Caspase-3，Bcl-2andBax.＊＊.P＜0.01，＊＊＊.P＜0.001versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05，##.P＜0.01versusMCAOgroup.GAPDHwasusedasloadingcontrol.表達水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明顯降低，p62表達水平明顯升高(P＜0.05，P＜0.01，圖5)。此外，缺血能明顯抑制雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mTOＲ)的表達，促進Ulk1的表達(P＜0.01，P＜0.001，圖5);SM能顯著緩解缺血對mTOＲ表達的抑制作用及對Ulk1表達的促進作用(P＜0.05，圖5)。圖4SM對MCAO大鼠神經(jīng)炎癥及脂質過氧化的影?

?HealthyControl比較，MCAO組大鼠腦組織Beclin1表達水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明顯升高，p62表達水平明顯降低(P＜0.001，圖5);與MCAO組比較，MCAO+SM組大鼠腦組織Beclin1圖2SM對MCAO大鼠腦細胞增殖及凋亡的影響Fig．2EffectsofSMoncellproliferationandapoptosisofratsNote:ImmunohistochemicalwasperformedforexpressionsofKi67andCaspase-3.＊＊.P＜0.01versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05versusMCAOgroup.Allexperimentswererepeatedatleastthreetimes.圖3SM對MCAO大鼠腦組織增殖及凋亡標記蛋白表達的影響Fig．3EffectsofSMonproliferation-andapoptosis-relat-edproteinsofMCAOratsNote:WesternblotwasemployedtodeterminetheproteinlevelsofKi67，Caspase-3，Bcl-2andBax.＊＊.P＜0.01，＊＊＊.P＜0.001versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.05，##.P＜0.01versusMCAOgroup.GAPDHwasusedasloadingcontrol.表達水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明顯降低，p62表達水平明顯升高(P＜0.05，P＜0.01，圖5)。此外，缺血能明顯抑制雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mTOＲ)的表達，促進Ulk1的表達(P＜0.01，P＜0.001，圖5);SM能顯著緩解缺血對mTOＲ表達的抑制作用及對Ulk1表達的促進作用(P＜0.05，圖5)。圖4SM對MCAO大鼠神經(jīng)炎癥及脂質過氧化的影響Fig．4EffctsofSMonneuroinflammationandlipidper-oxidationNote:TheconcentrationsofserumLDH，MDA，NOandIL-6weremeas-uredbyELISAassay.＊＊.P＜0.01versusHealthycontrolgroup，#.P＜0.0
【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 尹曉剛;鄧倩;潘瑞華;陳世東;;青藤堿通過抑制缺血誘導的異常自噬緩解MCAO模型大鼠腦損傷[J];中國免疫學雜志;2019年01期

2 趙靜;劉偉偉;李雪萍;高永翔;;青藤堿對佐劑誘導性關節(jié)炎模型大鼠炎癥相關因子表達的影響[J];重慶醫(yī)學;2018年07期

3 劉東平;青藤堿的研究進展[J];安徽醫(yī)藥;2005年11期

4 張寧,徐蓮英,徐培康,鐘高仁;~(125)I-青藤堿大鼠經(jīng)皮滲透試驗研究[J];中藥材;2002年06期

5 秦國慶;王毅;姜黎明;羅志剛;李建軍;;青藤堿對腎移植模型大鼠外周血淋巴細胞穿孔素表達水平的影響[J];醫(yī)學臨床研究;2006年11期

6 劉強,周莉玲,李銳;青藤堿的研究概況[J];中草藥;1997年04期

7 朱昱豪;譚梅傲;佘世鋒;蘭紹陽;曹敏;梁藝;;青藤堿通過免疫調節(jié)防護刀豆蛋白A誘導的大鼠急性免疫性肝損傷[J];廣州中醫(yī)藥大學學報;2018年03期

8 劉啟德，梁美蓉，歐衛(wèi)平，葉少梅，馮美蓉，王寧生;青藤堿時辰藥代動力學研究[J];中藥新藥與臨床藥理;1995年01期

9 抗晶晶;劉曉寧;;青藤堿抗炎作用的新進展[J];中國野生植物資源;2017年06期

10 張轉平,朱朝德,高海,王宏濤,孫文基;青風藤中青藤堿的含量考察[J];西北藥學雜志;1998年06期

相關博士學位論文 前10條

1 呂興華;青藤堿上調microRNA-124對小鼠腎缺血再灌注損傷保護效應的研究[D];蘭州大學;2018年

2 張英豐;微透析法進行青藤堿貼劑透皮特性及藥物動力學的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2006年

3 程維明;青風藤化學成分及青藤堿大鼠體內代謝研究[D];沈陽藥科大學;2005年

4 張立;青藤堿對實驗性糖尿病大鼠腎臟保護作用機制的研究[D];吉林大學;2007年

5 白方會;正天丸和川芎嗪對偏頭痛模型大鼠三叉神經(jīng)血管系統(tǒng)神經(jīng)遞質表達的影響[D];南方醫(yī)科大學;2016年

6 頓晶晶;補腎中藥更康顆粒的藥效學及急性毒理實驗研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2016年

7 王躍旗;楓寥腸胃康對腹瀉型腸易激綜合征大鼠結腸動力及氯離子分泌的影響[D];北京中醫(yī)藥大學;2017年

8 穆道周;芍藥苷抗抑郁促動力作用的實驗研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2016年

9 楊貞;益氣血法通過調節(jié)GDF9分泌對大鼠超排卵卵丘細胞凋亡的影響及其作用機制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2017年

10 曾玉群;大黃及其活性物質灌腸對慢性腎臟病模型大鼠作用的分子機制[D];廣州中醫(yī)藥大學;2017年

相關碩士學位論文 前10條

1 周國勝;青藤堿對三硝基苯磺酸誘導的實驗性大鼠結腸炎作用及其作用機制的研究[D];安徽醫(yī)科大學;2009年

2 王朋;青藤堿對大鼠腎臟缺血再灌注時HIF-1α和VEGF表達的影響[D];蘭州大學;2016年

3 孫越華;青藤堿的鎮(zhèn)痛作用及其機制研究[D];南通大學;2016年

4 董琪;青藤堿與艾拉莫德對膠原誘導關節(jié)炎的時間治療學研究[D];華北理工大學;2018年

5 熊力群;基于TLR2、TLR4基因沉默探索青藤堿對小鼠DC2.4炎性因子表達的影響[D];成都中醫(yī)藥大學;2018年

6 徐芳;青藤堿對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用[D];錦州醫(yī)科大學;2018年

7 李文龍;青藤堿對DC2.4細胞TLR2/TLR4-MyD88/TRIF信號通路的影響[D];成都中醫(yī)藥大學;2017年

8 晉小榮;青藤堿對DC2.4 JAK/STAT信號通路磷酸化的影響[D];成都中醫(yī)藥大學;2017年

9 張悅陽;青藤堿對乳腺癌細胞誘導的骨破壞的影響和分子免疫機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2017年

10 吳玉;青藤堿對戊四氮致癇大鼠海馬神經(jīng)元的保護作用及機制研究[D];安徽醫(yī)科大學;2017年

本文編號：2846831