1．目的 研究改構(gòu)型酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF)對缺血-再灌注所致腸道損傷的防治作用及其相關(guān)機制。 2．材料和方法 采用腸系膜上動脈夾閉-松夾方式制成腸缺血-再灌注模型。Wistar大鼠144只，體重200-250克，隨機分成假手術(shù)組(C)、腸缺血組(I)、腸缺血-再灌注組(R)和aFGF治療組(A)。根據(jù)缺血后再灌注時間的不同又將R組和A組又分成15m、30m、1h、2h、6h、12h、24h和48h共8組，每組8只動物。R組和A組在松開動脈夾的同時經(jīng)右頸靜脈注入aFGF 20 μg／kg或生理鹽水0.15ml。各時相點取腹主動脈血及小腸組織，檢測血漿D-乳酸水平和小腸組織內(nèi)細(xì)胞凋亡率；利用免疫組織化學(xué)方法檢測P53、P21、Bcl-2和Bax在缺血-再灌注后小腸組織的表達(dá)；用RT-PCR方法測定小腸組織中p53、p21、bcl-2和bax基因的表達(dá)水平。 3．主要結(jié)果 3．1 腸道缺血后，小腸、盲腸和部分結(jié)腸變蒼白、水腫，再灌注后腸段明顯充血、水腫及壞死，以再灌注后12h最明顯。血漿D-乳酸水平升高，細(xì)胞凋亡率增大。外源性改構(gòu)型aFGF治療可顯著減輕以上改變。 3．2 I／R后小腸p53mRNA的表達(dá)逐漸升高，p21 mRNA在再灌注后迅速升高，隨后降低，恢復(fù)到正常對照組水平。A組p21mRNA和p53 mRNA的表達(dá)較R組減少。 3．3 I／R后小腸bax mRNA的表達(dá)逐漸升高，在再灌注1h達(dá)到頂峰，隨后又逐漸恢復(fù)到對照組水平。bcl-2 mRNA在再灌注后迅速降低，基因表達(dá)明顯低于假手術(shù)組。A組bcl-2 mRNA的表達(dá)較R組增加，而bax基因表達(dá)相反，在A組中的表達(dá)量較R組降低。 3．4 缺血后小腸絨毛上半部分粘膜中P21和P53陽性細(xì)胞開始增加。隨著再灌注時間的延長，陽性細(xì)胞的比例逐漸升高，在缺血再灌注12h達(dá)到頂峰，隨后又恢復(fù)到正常對照組水平。A組較R組相應(yīng)時間點兩種蛋白表達(dá)降低。 3．5 在各組大鼠小腸組織中Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)的變化規(guī)律不相一致。缺血和再灌注使Bax蛋白表達(dá)增強，在6h達(dá)到高峰，在小腸絨毛的各層細(xì)胞內(nèi)都有該蛋白的陽性表達(dá)顆粒。A組大鼠的表達(dá)較R組減弱；而缺血再灌注能夠?qū)е翨cl-2蛋白表達(dá)降低，在6h降低至最低，該蛋白顆粒主要分布于粘膜上皮細(xì)胞和肌層細(xì)胞內(nèi)，A組大鼠的表達(dá)較R組增多。 第二軍醫(yī)大學(xué)碩士論文 改構(gòu)型aFGF抑制缺血再灌注大鼠小腸絨毛細(xì)胞凋亡及其機制的研究 結(jié)論: 1外源性改構(gòu)型aFGF治療有助于減輕由于缺血一再灌注引起的腸道損傷， 降低小腸絨毛細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率，有助于控制腸道損傷的進(jìn)展并進(jìn)而預(yù)防 MODS的發(fā)生。 2外源性改構(gòu)型aFGF治療減輕腸道損傷的作用可能是通過抑制pZI、p” 和Bax基因和蛋白表達(dá)，提高Bd一2蛋白含量，進(jìn)而激活各種途徑促進(jìn)腸道損傷的 修復(fù)，降低小腸組織的細(xì)胞凋亡率。 綜上所述，外源性改構(gòu)型aFGF能夠通過基因水平調(diào)控促進(jìn)缺血，再灌 注后腸道的修復(fù)，其作用可能與調(diào)控凋亡相關(guān)基因表達(dá)，這為從分子水平 利用生長因子干預(yù)或調(diào)控腸道損傷后的修復(fù)過程提供了重要的理論依據(jù)。
【學(xué)位單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：R363
【部分圖文】：

不同處理的大鼠小腸組織的形態(tài)學(xué)變化(HE，ZooX)

不同處理的大鼠小腸組織中細(xì)胞凋亡的變化(HE，ZooX)

(B)不同時間對生理鹽水(A)和該構(gòu)型aFGF(B)處理的大鼠小腸組影響再灌注24h，3:再灌注12h，4:再灌注6h，5:再灌注Zh，6:再灌注lh，smin，9:急性缺血，10:假手術(shù)組，11:DNAmarker
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 陳偉,付小兵,孫同柱,孫曉慶,趙志力,盛志勇;Bax和Bcl-2在增生性瘢痕中的表達(dá)特征及其意義[J];創(chuàng)傷外科雜志;2002年05期

2 付小兵，王亞平，葉一秀，孫同柱，馬諾山，常國友，許明火，周寶桐，盛志勇;堿性成纖維細(xì)胞生長因子對腸道與肝缺血性損傷的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;1996年02期

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本文編號：2843344