目的:觀察Toll樣受體4(TLR4)及其負(fù)性調(diào)控因子白細(xì)胞介素-1受體相關(guān)激酶M(IRAK-M)在實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎(UC)模型大鼠結(jié)腸黏膜中的表達(dá),并探討四神丸干預(yù)UC的作用機(jī)制。方法:將90只Wistar大鼠隨機(jī)分成6組,即空白組,模型組,柳氮磺胺嘧啶組(0. 36 g·kg~(-1)),四神丸低、中、高劑量組(2. 5,5,10 g·kg~(-1)),每組15只。以三硝基苯磺酸/乙醇溶液法制備UC大鼠模型,蘇木素-伊紅(HE)染色觀察大鼠結(jié)腸組織病理學(xué)改變;采用放射免疫法測(cè)定血清游離三碘甲腺原氨酸(FT3),血清游離甲狀腺素(FT4),免疫球蛋白(Ig) E,白細(xì)胞介素(IL)-2的含量;采用黃嘌呤氧化法測(cè)定大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法測(cè)定大鼠血清丙二醛(MDA)的活性。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR),免疫組化和蛋白免疫印跡法(Western blot)分別檢測(cè)TLR4,IRAK-M的mRNA及蛋白表達(dá)。結(jié)果:與空白組比較,模型組大鼠腸黏膜損傷評(píng)分顯著增高(P 0. 01),大鼠血清Ig E,MDA含量顯著升高(P 0. 01),FT3,FT4,IL-2,SOD表達(dá)水平顯著下降(P 0. 01),TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)顯著升高(P 0. 01),IRAK-M mRNA和蛋白表達(dá)顯著降低(P 0. 01);與模型組比較,各治療組鼠腸黏膜損傷評(píng)分均顯著降低(P 0. 01),Ig E,MDA含量明顯下降(P 0. 05,P 0. 01),FT3,FT4,IL-2,SOD水平明顯升高(P 0. 05,P 0. 01),TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)明顯降低(P 0. 05,P 0. 01),IRAK-M mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著升高(P 0. 01)。結(jié)論:UC的發(fā)病機(jī)制與TLR4及其負(fù)性調(diào)控因子IRAK-M的表達(dá)失衡有關(guān),且四神丸可能通過(guò)抑制TLR4mRNA和蛋白的表達(dá),促進(jìn)其負(fù)性調(diào)控因子IRAK-M的表達(dá),起到有效治療UC的作用。
【文章目錄】：
1 材料
    1.1 動(dòng)物
    1.2 藥物
    1.3 試劑
    1.4 儀器
2 方法
    2.1 造模及分組
    2.2 給藥
    2.3 取材及標(biāo)本制備
    2.4 肉眼觀察大鼠結(jié)腸組織黏膜損傷評(píng)分
    2.5 HE染色觀察大鼠結(jié)腸組織病理學(xué)改變
    2.6 檢測(cè)FT3, FT4, IgE, IL-2, SOD, MDA的水平
    2.7 Real-time PCR檢測(cè)TLR4, IRAK-M mRNA的表達(dá)
    2.8 免疫組化法檢測(cè)TLR4, IRAK-M蛋白的表達(dá)
    2.9 蛋白免疫印跡法 (Western blot) 檢測(cè)TLR4, IRAK-M蛋白的表達(dá)
    2.1 0 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 對(duì)UC大鼠一般活動(dòng)狀態(tài)的影響
    3.2 對(duì)UC大鼠結(jié)腸大體形態(tài)學(xué)的影響
    3.3 對(duì)UC大鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)的影響
    3.4 對(duì)UC大鼠血清IgE, IL-2, FT3, FT4, SOD, MDA水平的影響
    3.5 對(duì)UC大鼠結(jié)腸組織TLR4與IRAK-M mRNA表達(dá)的影響
    3.6 對(duì)UC大鼠結(jié)腸組織TLR4與IRAK-M蛋白定位表達(dá)的影響
    3.7 對(duì)UC大鼠結(jié)腸組織TLR4與IRAK-M蛋白表達(dá)的影響
4 討論

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2840235