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固相包被用二抗的研制

發(fā)布時間:2020-10-13 02:01
   采用雜交瘤技術,獲得了四株抗兔IgG單克隆抗體的雜交瘤細胞株 (其中RG48G_8一株為針對兔IgG Fc片段的單抗)。 采用親和層析法純化驢抗羊IgG抗體及驢抗兔IgG抗體,并將純化 的二抗應用于固相包被管的制備。確定了包被條件:以0.1mol·L~(-1) PH4.8 檸檬酸緩沖液作為包被緩沖液,包被抗體濃度:驢抗羊二抗為10μg/ml, 驢抗兔二抗為 20μg/ml。建立了孕酮及 T_3的固相試管放射免疫分析方 法。其中,T_3固相試管放免分析法的靈敏度0.15ng/ml,批內(nèi)變異系數(shù) 3.5%~13.0%,批間變異系數(shù)9.1%~11.2%,回收率103%~134%,該方法 與T_3固相微球放免分析法的血樣測定值相關系數(shù)為0.786。孕酮固相試 管放免分析法的靈敏度0.17ng/ml,批內(nèi)變異系數(shù) 2.2%~9.4%,回收率 88.1%~119%,該方法與孕酮固相微球放分析法的血樣測定值相關系數(shù) 為0.943。
【學位單位】:中國原子能科學研究院
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2000
【中圖分類】:R392-33
【文章目錄】:
一、摘要
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  • 二、綜述
        2.1 固相放射免疫分析
        2.2 制備單克隆抗體雜交瘤細胞的原理及方法
        2.3 親和層析原理及方法
    三、實驗部分
        3.1 實驗材料
        3.2 實驗方法
        3.3 實驗結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
        3.6 附圖
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  • 致 謝

    【參考文獻】

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    1 吳馮波,王衍真,韓世泉,賀佑豐,侯惠仁;免疫分析固相技術(Ⅰ)[J];標記免疫分析與臨床;1998年04期

    2 李振甲;試管固相放射免疫技術研究中有關問題的探討[J];標記免疫分析與臨床;1994年02期

    3 李振甲;放射免疫技術研究的現(xiàn)狀及展望(綜述)[J];標記免疫分析與臨床;1996年01期

    4 葉維新;放射免疫分析的方法學研究現(xiàn)狀[J];國外醫(yī)學(衛(wèi)生學分冊);1995年01期

    5 徐志凱;《實用單克隆抗體技術》[J];細胞與分子免疫學雜志;1991年03期

    6 劉家慧,張一泉,褚麗萍,張桂華,馬春節(jié),張曉蓉,林漢;抗人心肌肌凝蛋白輕鏈單克隆抗體的制備和鑒定[J];細胞與分子免疫學雜志;1997年03期



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