【摘要】： 前言 蛙皮素(bombesin，BN)是一種腦腸肽，具有廣泛的生理作用。許多研究者認(rèn)為，蛙皮素是體溫調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用最強(qiáng)的物質(zhì)之一。蛙皮素的降溫作用與環(huán)境溫度密切相關(guān)。當(dāng)外界環(huán)境溫度不同時，蛙皮素對動物體溫的作用不同。但其影響體溫的作用機(jī)制尚不十分清楚。目前對蛙皮素的研究主要集中于不同環(huán)境溫度對蛙皮素降溫作用的影響，而對其降溫機(jī)制未做深入研究。蛙皮素是否通過影響中樞發(fā)熱介質(zhì)而實(shí)現(xiàn)其降溫作用，cAMP是否參與了其降溫機(jī)制至今未見報道。 cAMP作為發(fā)熱反應(yīng)的重要中樞介質(zhì)，在體溫調(diào)節(jié)中的作用受到研究者們的普遍關(guān)注。白細(xì)胞介素-1β(Interlukin-1β，IL-1β)是一種內(nèi)生致熱原，由單核／巨嗜細(xì)胞合成和釋放的。多種動物研究表明IL-1β可引起典型的發(fā)熱反應(yīng)，并與劑量相關(guān)。 本實(shí)驗觀察不同環(huán)境溫度下蛙皮素的降正常大鼠及IL-1β致熱大鼠體溫的作用并且檢測下丘腦組織、血漿中cAMP含量的變化，以探索BN的降溫作用與cAMP含量的關(guān)系。 材料與方法 1．動物和手術(shù) SD大鼠，雄性，體重180-220g，由中國醫(yī)科大學(xué)動物中心提供。室溫(20±2)℃，單籠飼養(yǎng)，自由進(jìn)食水。所有實(shí)驗均在7：00～14：00時進(jìn)行。在鹽酸氯氨酮和鹽酸甲苯噻嗪的聯(lián)合麻醉下，參照大鼠腦圖譜，用立體定位儀向一側(cè)側(cè)腦室插入外徑為1 mm的塑料管，用牙科水泥固定，檢測導(dǎo)管通暢后封閉頂端。大鼠單籠飼養(yǎng)，常規(guī)喂養(yǎng)一周后實(shí)驗。實(shí)驗前給大鼠測溫，以使其適應(yīng)實(shí)驗者手法，適應(yīng)7 d。低溫實(shí)驗前1 h將大鼠放入4℃冰箱。測量體溫，將溫度探頭插入直腸6 cm處，待數(shù)字穩(wěn)定后讀數(shù)，以給藥前1h測得的三次溫的平均值為大鼠給藥前基礎(chǔ)體溫，然后分別在注藥后15、30、45、60、90、120和180 min記錄大鼠體溫。實(shí)驗結(jié)束后，檢查插管位置，舍掉 插管位置不正確的數(shù)據(jù)。 2.cAMP含量測定 下腔靜脈穿刺取血2血，離心取上清，置一30℃保存。取大鼠腦組織后 放人液氮冷凍，稱取下丘腦50xng勻漿、離心，取上清按cAMP放免試劑說 明書處理待測。 3.數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(又土s)表示;體溫變化情況采用盯和體溫反應(yīng) 指數(shù)分析;各組均數(shù)間顯著性差異用t檢驗法。 實(shí)驗結(jié)果 1.室溫或4℃時，在IL一1日誘導(dǎo)發(fā)熱大鼠中，下丘腦及血漿中cAMP含 量均顯著升高; 2.室溫或4℃時，BN均降低大鼠正常體溫，下丘腦cAMP含量亦隨之 顯著降低; 3.在兩種溫度情況下預(yù)先側(cè)腦室注射BN能明顯抑制大鼠IL一1日性 發(fā)熱，4℃時作用更顯著;下丘腦cAMP含量亦均明顯下降。 討論 本實(shí)驗中，側(cè)腦室注射IL一lp后引起體溫升高，下丘腦中cAMP含量 也相應(yīng)升高，與對照組相比差異有十分顯著意義，這與以前的報道一致。血 液中cAMP的含量升高，表明IL一lp引起的體溫升高確與cAMP的增多有 關(guān)。至于腦內(nèi)cAMP含量升高的機(jī)制，最新的資料表明，EP可能通過提高 Na+/CaZ+比值再引起腦內(nèi)cAMP的增高，即EP*下丘腦Na+/CaZ+比 值牛、cAMPt，因此可通過同時測定下丘腦內(nèi)Na+/CaZ+來進(jìn)一步探討 IL一lp引起cAMP升高的機(jī)制。 本研究觀察到側(cè)腦室微量注射BN后引起大鼠體溫降低。4℃條件下 30而n左右即明顯下降，45 min達(dá)最低點(diǎn)。室溫時則在60 min時降至最 低。兩者在降溫幅度上無顯著差別，這與以前的報道不完全一致。側(cè)腦室 注射BN引起降溫的同時，下丘腦中cAMP含量降低，提示BN的降溫作用 與cAMP有關(guān)。BN可能通過抑制產(chǎn)熱過程來降低體溫。參與體溫調(diào)控的 中樞除了Po/AH為代表的正調(diào)節(jié)中樞外，尚有VSA為代表的負(fù)調(diào)節(jié)中樞。 BN引起下丘腦。AMP含量降低的同時，vSA中其含量、是否也隨之降低，甚 至是否以VSA中cAMP含量的降低為主因，尚需進(jìn)一步實(shí)驗證實(shí)。 在上述研究的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗觀察到室溫或4℃時側(cè)腦室注射BN均明 顯抑制了大鼠IL一lp性發(fā)熱反應(yīng)，而且此時發(fā)熱大鼠下丘腦cAMP的含量 顯著低于IL一lp組，提示BN可抑制IL一lp的發(fā)熱作用，其作用機(jī)制有可 能是通過抑制下丘腦cAMP含量的升高來抑制IL一lp引起的體溫升高。 但由于影響體溫調(diào)節(jié)的因素較多，故也不排除BN引起VsA中eAMP含量 降低或其它負(fù)調(diào)節(jié)物如AVP(精氨酸加壓素)和a一MSH(a一促黑激素)含 量升高來抑制發(fā)熱的可能。 結(jié)論 1.。AMP參與了大鼠IL一lp性發(fā)熱過程。 2.BN的降正常體溫及對幾一lp性發(fā)熱的抑制作用可能與抑制cAMP 的合成或促進(jìn)其分解有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R338

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2806941