發(fā)布時(shí)間：2020-08-14 16:25

【摘要】： 同種異體骨髓移植（Allo-BMT）技術(shù)在近二三十年得到飛速發(fā)展，為一系列造 血系統(tǒng)或非造血系統(tǒng)疾病的患者提供了新的希望。Allo-BMT的最大局限在于供受者 之間HLA不合程度增高，移植物抗宿主�。℅VHD）的風(fēng)險(xiǎn)增大，受者移植后的無(wú) 病存活率受到影響。其中急性移植物抗宿主�。╝GVHD）是移植早期死亡的主要原 因，而慢性移植物抗宿主�。╟GVHD）則降低了受者的生存質(zhì)量和長(zhǎng)期生存率。組 織配型技術(shù)的提高以及多種免疫抑制劑的聯(lián)合應(yīng)用，使Allo-BMT后GVHD的發(fā)生 率明顯降低。環(huán)孢菌素A（CSA）聯(lián)合短程氨甲喋呤（MTX）作為aGVHD的標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)防方案，在臨床上推廣應(yīng)用，大大降低了aGVHD的發(fā)生率和嚴(yán)重程度。即便如 此，在HLA主要位點(diǎn)完全相合的Allo-BMT，aGVHD的發(fā)生率可達(dá)30％-60％，由 其直接或間接引起的死亡占BMT后死亡率的50％左右。因此，預(yù)防和治療aGVHD 成為提高同種異體骨髓移植（Allo-BMT）成功率的關(guān)鍵。 霉酚酸酯（MMF）是霉酚酯酸（MPA）的酯類前體，MPA選擇性抑制次黃嘌 呤核苷酸脫氫酶（IMPDH）。該酶是鳥(niǎo)嘌呤核苷酸經(jīng)典合成途徑中的限速酶。IMPDH 受抑導(dǎo)致鳥(niǎo)嘌呤核苷酸生成減少，進(jìn)而DNA、RNA合成受阻。MPA對(duì)鳥(niǎo)嘌呤核苷 酸合成的另一途徑，即補(bǔ)救合成途徑?jīng)]有影響。中性粒細(xì)胞可同時(shí)通過(guò)補(bǔ)救途徑， 合成鳥(niǎo)嘌呤核苷酸，而T、B淋巴細(xì)胞則更依賴于經(jīng)典途徑合成，故MPA對(duì)淋巴細(xì) 胞的嘌呤合成具有選擇性抑制作用。MMF在人類實(shí)體臟器移植抗排斥方面有獨(dú) 特的功效，1995年美國(guó)FDA批準(zhǔn)MMF應(yīng)用于臨床腎移植抗排異治療，證明MMF 較傳統(tǒng)硫唑嘌呤治療有明顯的優(yōu)越性。MMF用于預(yù)防和治療異基因骨髓移植中急性 GVHD，在國(guó)際是僅見(jiàn)數(shù)篇報(bào)道。本單位黃河等從1998年開(kāi)始在非親緣異基 因骨髓移植在應(yīng)用MMF聯(lián)合CSA、MTX預(yù)防aGThD，取得良好效果。但MMF 在aGVHD動(dòng)物模型中的作用及機(jī)理研究至今罕見(jiàn)報(bào)道。本研究目的在于建立小鼠 異基因骨髓移植－急性移植物抗宿主病動(dòng)物模型，觀察霉酚酸酯（MMF）以及不同的 聯(lián)合用藥方案（MMF＋CSA＋MTX，CSA＋MTX）對(duì)aGVHD的預(yù)防作用，并進(jìn)一步 探討MMF預(yù)防aGVHD的可能作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第一部分： 霉酚酸酯（MMF）對(duì)小鼠異基因骨髓移植中急性移植物抗宿主炳 ＊cvnn）的預(yù)防作用 目的：探討新型免疫抑制劑一霉酚酸酯（MMF）對(duì)小鼠異基因骨髓移植（allo－BMT） 中急性移植物抗宿主�。╝GVHD）的預(yù)防作用。方法：建立主要組織相容性抗原 （MHC）完全不合的兩個(gè)純種近交系小鼠悅鼠：C57BL／6）（H／X雌性；受鼠： BALB／C（HPX雄性］異基因骨髓移植急性移植物抗宿主病bllo書(shū)MT伯） 動(dòng)物模型。根據(jù) aGVHD的發(fā)生強(qiáng)度分：小鼠中度 aGVHD模型（A型，移植小鼠的 平均生存時(shí)間為刀天）：小鼠重度＊GVH D模型舊型，移植小鼠的平均生存時(shí)間 為 6天）。分組：AI組（6只），MMF（30mg／kg／d）；AZ組（6 ．q），CSA＋MTX； A3組（6只），MMF（30mg／kg／d）聯(lián)合 CSA＋MTX；A4組（6只），對(duì)照組，移植 后未用 aGVHD預(yù)防方案山 組（9只），MMF（30mg／kg／d）舊 組（9 ．q），CSA＋MTX； m組（9只），＊＊F（3om叭咖）聯(lián)合mA十＊TX；M組（9只），＊＊F（朋m咖叩） 聯(lián)合 CSA＋MTX；BS組（9 ．q），MMF（10ng／kg／d）聯(lián)合 CSA＋MTX；B6對(duì)照組 （9只），移植后未用 aGWID預(yù)防方案。以小鼠 aGVHD癥狀，移植小鼠中位生存 時(shí)間（MST）、生存率（＋35天）、外周血象的恢復(fù)情況，以及GVHD病理分級(jí)作為 鉀價(jià)指標(biāo)。結(jié)果：在小鼠中度aGVHD移植模型中，移植小鼠于2周后，逐漸出現(xiàn) 消瘦、反應(yīng)遲鈍、脫毛、腹瀉、耳廓充血增厚、雙眼分泌物增多（結(jié)膜炎）等aGVHD 癥狀，不用aGVllD預(yù)防方案的移植小鼠（A4組），則aGVHD持續(xù)發(fā)展，死亡率達(dá) 100％，MST為ZI天。AI－A3組小鼠經(jīng)單用或聯(lián)用MMF、CSA、MTX等免疫抑制 劑后，在不同程度上減輕甚至防止了aGVHD的發(fā)生，在移植后＋35天，小鼠的生存 率分別為50％、50％、33％從3組的生存率較川人 組低，但差異無(wú)顯著性（P＞oj）5）。 3 在小鼠重度aGVHD移植模型中，移植小鼠于＋3－＋5天即出現(xiàn)少食少動(dòng)、消瘦、腹 瀉、弓背體位、毛發(fā)紊亂無(wú)光澤等aGVHD癥狀，不用aGVHD預(yù)防方案的移植小 鼠舊6組）死廣高峰在＋5／7天，死亡率達(dá) 100％。應(yīng)用 ，刪P預(yù)防方案的 BIE 組小鼠aGVHD程度明顯減輕，表現(xiàn)為消瘦、腹瀉、腹脹、脫毛、耳廓增厚充血。 雙眼分泌物增多（結(jié)膜炎）等aGVHD癥狀，MST較B6組顯著延長(zhǎng)（分別延長(zhǎng)3．4 天，丑4無(wú)，9刀天，6．1天，呂．瑟天，P＜0．05）。m－扔組的＊盯較＊組顯著延長(zhǎng)（P＜O．oj）； B3E 組的MST較BZ組稍延長(zhǎng)，但無(wú)顯著性差異；B3、BS組的MST較B4組延 長(zhǎng)，差異有顯著性（P＜0．05）；m組與m組的＊盯無(wú)顯著性差異。外周血象變化： 發(fā)生重度 aGVHD的移植小鼠舊6組），MST僅為 6天，故觀察不到其血象回升過(guò) 程。中度和重度aGVHD應(yīng)用預(yù)防案組的移植小鼠（AI．A3，BI．5組），＋5天左右白 細(xì)胞開(kāi)始?
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：R457.7;R392.4

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 張琰;非清髓移植后致敏供者淋巴細(xì)胞輸注的實(shí)驗(yàn)研究[D];東南大學(xué);2005年

本文編號(hào)：2793265