發(fā)布時間：2020-08-13 12:40

【摘要】： 丙型肝炎病毒（HCV）是輸血后非甲非乙型肝炎以及社區(qū)獲得性肝炎的 主要病原因子。雖然通過對獻血者進行抗HCV的篩選使輸血后HCV的感染 率顯著降低，但在高危人群中仍存在社區(qū)獲得性的HCV感染。目前全世界約 有1.7億HCV感染者，其中約有50％急性感染者轉(zhuǎn)變?yōu)槁�，進而發(fā)展為肝 硬化和肝細胞性肝癌。HCV感染后缺乏有效的保護性免疫。目前對HCV感染 尚未找到有效的治療手段，一般采用干擾素與病毒唑聯(lián)合治療法，但此法僅對 少數(shù)患者有效，因此需要提高治療手段和發(fā)展有效的疫苗以控制HCV感染。 近年來各國學者運用基因重組技術(shù)對HCV包膜糖蛋白的結(jié)構(gòu)和功能進行 了深入研究，以期進一步理解HCV感染后慢性化機制及病毒/宿主相互作用關(guān) 系，并尋找有效的保護性疫苗及治療藥物。HCV為正鏈RNA病毒，屬于黃病 毒屬的一員。其基因組全長9.4kb，編碼約3000aa的多聚蛋白前體，在宿主及 病毒蛋白酶的作用下，將其切割成3個結(jié)構(gòu)蛋白和7個非結(jié)構(gòu)蛋白，其中有2 個糖蛋白：E_1和E_2，為HCV的包膜蛋白。由于其位于病毒顆粒的最外側(cè)，是 宿主攻擊的主要目標，也是HCV疫苗研究的首選抗原。 第四軍醫(yī)大學碩士學位論文 一 本研究構(gòu)建了含HCV H株E基因5端 1575hp片段的桿狀病毒轉(zhuǎn)移載W E－BacPAKS，將其與BacPAK6線性DNA共轉(zhuǎn)染昆蟲細胞Sfg，獲得重組病毒 rE－Bac，用空斑滴定法純化病毒，并感染Sfg進行蛋白表達。SDS－PAGE鑒定 結(jié)果表明，HCV E基因在昆蟲細胞中表達出多條蛋白帶，其 Mr分別為 60 000、 35 000、33 000、26 000和 22 000。Western blot結(jié)果顯示，表達產(chǎn)物可與 HCV RNA陽性感染者的血清發(fā)生反應(yīng)，出現(xiàn)幾條蛋白帶。其中M為60 000的是 EZ，35 000～22 000的則可能是不同程度糖基化的q蛋白。應(yīng)用表達的重組蛋 白對 HCV感染者血清中的抗 E抗體進行了檢測，結(jié)果總檢出率為 11．4％。其 中，抗HCV核心抗體陽性的血清中抗E抗體檢出率低于RNA陽性血清中抗E 抗體的檢出率。
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2001
【分類號】：R392

【參考文獻】

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1 苗季,譚文杰,叢旭,叢郁,陳剛,畢勝利,詹美云;中國株丙型肝炎病毒(HCV)結(jié)構(gòu)區(qū)蛋白在昆蟲細胞中的表達及加工[J];病毒學報;1998年04期

2 王永剛;丙型肝炎病毒包膜糖蛋白的研究進展[J];國外醫(yī)學.病毒學分冊;1998年03期

3 曹鳳,史宣玲,王海濤,季陽;HCV包膜蛋白的免疫與疫苗研究進展[J];國外醫(yī)學.病毒學分冊;2000年02期

本文編號：2792009