【摘要】：16-24周孕齡的人胎肝是一個處于發(fā)育時相的器官，不僅擔負著物質(zhì)代謝、蛋白分泌等重要生理功能，而且具有造血的機能，采用蛋白質(zhì)組學(xué)研究手段系統(tǒng)發(fā)掘胎肝內(nèi)蛋白信息將助于進一步了解胎肝機能。在蛋白質(zhì)組研究中，低豐度蛋白是研究的主要瓶頸，目前解決的方法主要有兩類，一是去除樣品中的高豐度蛋白質(zhì)；二是對樣品進行分級，簡化樣品的復(fù)雜性。由于真核生物細胞結(jié)構(gòu)的特殊性，使得亞細胞分級得以實現(xiàn)，通過這種方法既可以降低樣品的復(fù)雜性又可實現(xiàn)通量化。本文通過蔗糖密度梯度離心的方法建立了細胞核蛋白提取的平臺，采用免疫印跡、酶活測定和電鏡的方式來觀測細胞核提純的程度，結(jié)果表明細胞核富集了5倍以上。在此基礎(chǔ)上又根據(jù)蛋白的性質(zhì)采用試劑盒進行進一步細化的分級，分為疏水、親水和沉淀三部分。最后采用一維凝膠電泳和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)鑒定，總共獲得422個總蛋白數(shù)據(jù)，其中明確定位于細胞核的蛋白145個，由基因組推測的新蛋白共有16個以及9個SWISS-PROT注釋表明在肝臟中處于低豐度的蛋白。我們還對所得數(shù)據(jù)進行了蛋白性質(zhì)分析、定位分析，表明核蛋白多為偏堿性的親水性蛋白。由功能分類、數(shù)據(jù)庫比較得到的信息顯示所得到的核蛋白多為結(jié)構(gòu)蛋白和參與RNA剪切且為大多數(shù)細胞所具有的蛋白。組織表達分類表明有許多蛋白不僅在肝中表達而且在腦及睪丸中也高表達，提示胎肝內(nèi)表達的一些蛋白可能具有廣泛的生理調(diào)節(jié)功能。對新蛋白的定位預(yù)測表明有10個蛋白可能在細胞核中表達。通過以上的生物信息學(xué)分析和文獻調(diào)研綜合，初步構(gòu)建了人胎肝的細胞核蛋白質(zhì)表達譜。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R341

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;人胎肝基因表達譜揭示重癥肝炎治療奧秘[J];肝博士;2006年03期

2 錢美華!310014杭州,孫酬經(jīng)!310014杭州,歐陽淹,王紅葉!310014杭州,汪漣明!310014杭州,顧錫榮!310014杭州;銅蒸氣激光對人胎肝及臍血造血細胞增殖作用的實驗研究[J];中華內(nèi)科雜志;2000年12期

3 高志紅,張成友,黃天衛(wèi),段志軍,邵青,宮德正;部分純化的人肝細胞生長刺激因子的蛋白組份分析[J];臨床肝膽病雜志;1995年02期

4 　薇，李曉明，黃日波;人胎肝cDNA中EPO基因的克隆[J];廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué);1996年01期

5 賀福初;邢桂春;吳祖澤;;人胎肝cDNA文庫的構(gòu)建[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;1992年02期

6 黃介飛，姚登福，魏群，張弘，倪潤洲，肖明兵，孟憲鏞;人胎肝GGT純化及其抗血清制備[J];南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1995年02期

7 張泳;劉學(xué)紅;徐文娟;趙仲生;;人胎肝組織制作蠟塊脫水時間的探討[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2008年03期

8 樓錦新;人胎肝造血生長因子的提取檢測及應(yīng)用[J];中國腫瘤;1994年01期

9 賀福初,涂強,邢桂春,吳祖澤;人胎肝中肝細胞生長因子poly(A)~+mRNA在非洲爪蟾卵母細胞內(nèi)的翻譯[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;1990年04期

10 侯偉健，劉素媛，邢偉，張玉霞，王殿鴻，劉金蘭;人胎肝細胞生長刺激物質(zhì)與酪氨酸蛋白激酶的關(guān)系[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1996年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 姜穎;王京蘭;程剛;錢小紅;賀福初;;人胎肝磷酸化蛋白質(zhì)表達譜的構(gòu)建[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)首屆學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2003年

2 郝運偉;李曉海;田英華;魏漢東;荔建琦;姜穎;朱云平;錢小紅;賀福初;;16-24周孕齡人胎肝細胞核蛋白質(zhì)表達譜的構(gòu)建[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會論文摘要論文集[C];2004年

3 向陽;張堅松;柒銘銘;李翔;秦曉群;;哮喘易感性相關(guān)粘附分子基因表達譜研究[A];中國生理學(xué)會第五屆全國心血管、呼吸和腎臟生理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2005年

4 田道法;周小軍;唐發(fā)清;;氣虛證模型大鼠CDNA陳列C區(qū)基因表達譜特征及其對治療的反應(yīng)(摘要)[A];第三屆第四次全國中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科學(xué)術(shù)會論文匯編[C];2002年

5 石榮;張養(yǎng)軍;李曉海;魏漢東;荔建琦;吳松鋒;姜穎;朱云平;錢小紅;賀福初;;16-24周孕齡人胎肝線粒體蛋白質(zhì)表達譜的構(gòu)建[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會論文摘要論文集[C];2004年

6 張文廣;李金泉;張燕軍;常子麗;蘇蕊;高愛琴;;山羊基因表達譜芯片(CDMA)的定制及其應(yīng)用[A];中國動物遺傳育種研究進展——第十五次全國動物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2009年

7 應(yīng)康;;cDNA芯片在急性白血病中研究基因表達譜和拷貝數(shù)變化的應(yīng)用[A];第九屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2003年

8 呂紅斌;秦嶺;李廣文;張穎愷;陳啟明;梁國穗;;低強度脈沖超聲波對Saos-2細胞基因表達譜的影響[A];第七屆全國體育科學(xué)大會論文摘要匯編（二）[C];2004年

9 劉鶯;劉平;朱文鋒;李俊軍;;胃癌相關(guān)基因的表達譜研究[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會第七次全國實驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2004年

10 梁九波;劉碧朗;占智高;何寧佳;;家蠶表皮蛋白基因鑒定、生物信息學(xué)分析及其表達譜的構(gòu)建[A];中國蠶學(xué)會第六屆青年學(xué)術(shù)研討會論文集（1）[C];2009年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 匯正財經(jīng);G星湖 主升浪在即[N];證券時報;2006年

2 何增壽;食管癌相關(guān)基因研究獲進展[N];中國醫(yī)藥報;2004年

3 通訊員吳志軍 劉征云;咬定青山不放松[N];科技日報;2002年

4 胡永忠;專家熱論生物醫(yī)藥[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

5 張淼 于莘明;“人類蛋白質(zhì)組計劃”有望突破肝癌診治[N];江蘇科技報;2007年

6 申淳;“人類蛋白質(zhì)組計劃”有望實現(xiàn)肝癌診治突破性進展[N];中國知識產(chǎn)權(quán)報;2007年

7 本報記者 李恩青;生物“芯”何日“奔騰”？[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2001年

8 張石革;盛夏三伏話痱子[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

9 張淼邋記者 于莘明;我構(gòu)建世界第一張人類器官蛋白質(zhì)組“藍圖”[N];科技日報;2007年

10 中國科學(xué)院院士 賀福初;中國蛋白質(zhì)組計劃[N];科技日報;2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 郭立海;人胎肝細胞質(zhì)膜和人紅細胞膜蛋白質(zhì)組分析[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

2 姜穎;兔肉腥味物質(zhì)的鑒定及其形成機理初探&人胎肝磷酸化蛋白質(zhì)表達譜的構(gòu)建[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

3 賈棟;大鼠腦缺血再灌注對線粒體RNA表達和蛋白質(zhì)體外合成的影響及干預(yù)因素的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 王玉芳;惡性黑色素瘤細胞凋亡相關(guān)基因和蛋白表達譜[D];四川大學(xué);2004年

5 肖蕓;1，4-苯醌誘導(dǎo)的人骨髓間充質(zhì)干細胞蛋白質(zhì)表達譜改變[D];浙江大學(xué);2012年

6 王京蘭;磷酸化蛋白質(zhì)分析方法研究及其在人胎肝磷酸化蛋白質(zhì)組研究中的應(yīng)用[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2004年

7 崔光紅;丹參道地藥材cDNA芯片構(gòu)建及毛狀根基因表達譜研究[D];中國中醫(yī)科學(xué)院;2006年

8 杜慶鋒;慢性髓系白血病相關(guān)PTP家族成員的表達譜芯片篩選和初步功能研究[D];中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué);2003年

9 吳坤陸;WRKY基因家族的進化及水稻W(wǎng)RKY基因表達譜的研究[D];浙江大學(xué);2005年

10 陳廷貴;22周孕齡人胎肝轉(zhuǎn)錄組及SARS-CoV（BJ-01）基因組的生物信息學(xué)研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 郝運偉;16-24周孕齡人胎肝細胞核蛋白質(zhì)表達譜的構(gòu)建[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2004年

2 曾燕舞;兩種家豬心臟組織表達序列標簽的分析[D];浙江大學(xué);2004年

3 呂玉宇;人宮頸鱗狀上皮永生化細胞和癌細胞的核蛋白質(zhì)組及微管蛋白比較分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

4 萬鵬;草菇低溫表達譜的數(shù)據(jù)分析及冷誘導(dǎo)相關(guān)代謝途徑中關(guān)鍵基因表達量變化分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

5 汪涵;小鼠第14.5天和18.5天磨牙牙胚基因表達譜的比較[D];武漢大學(xué);2005年

6 胡丹;MicroRNA表達譜和計算機分析人類子宮內(nèi)膜著床窗期基因表達[D];華中科技大學(xué);2011年

7 陳龍;乙型腦炎病毒感染U251細胞microRNA表達譜的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

8 田慶;一個新的肺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因—LCMR1的克隆，序列分析，表達譜研究及其生物學(xué)功能的初步研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2003年

9 唐震;人類胚胎發(fā)育過程中胎兒肝臟脂代謝相關(guān)基因表達譜的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2003年

10 張金標;豬琥珀酸脫氫酶D亞基基因的單核苷酸多態(tài)性檢測、表達譜研究、輻射雜種板定位及性狀關(guān)聯(lián)分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

本文編號：2791758