【摘要】：研究背景 神經(jīng)干細(xì)胞是一種未分化細(xì)胞，具有自我更新、增殖的特性和分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的潛能。目前已經(jīng)證實(shí)，哺乳動(dòng)物胚胎期的大部分腦區(qū)和成年期的腦室下區(qū)、海馬齒狀回都含有豐富的神經(jīng)干細(xì)胞。這種細(xì)胞能依賴(lài)于無(wú)血清培養(yǎng)液中絲裂原的感應(yīng)而增殖，其它的原代細(xì)胞在這種培養(yǎng)液中不能存活。因而，可以在體外培養(yǎng)、擴(kuò)增并獲得高純度的神經(jīng)干細(xì)胞。研究表明將體外擴(kuò)增的神經(jīng)干細(xì)胞移植到成年鼠腦內(nèi)，發(fā)現(xiàn)這些被移植的細(xì)胞在宿主腦內(nèi)能很好地存活，并向周?chē)w移，最后分化成同移植部位宿主細(xì)胞表型類(lèi)似的神經(jīng)細(xì)胞，而且與周?chē)纳窠?jīng)元形成突觸聯(lián)系。神經(jīng)干細(xì)胞具有分化成移植部位局部特異性細(xì)胞的能力，是損傷或病變腦組織細(xì)胞移植的理想的組織來(lái)源，為神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病和顱腦損傷的治療開(kāi)辟了一條廣闊的道路。 本課題以海人酸特異性毀損成年大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞，將來(lái)源于胎鼠海馬的神經(jīng)干細(xì)胞移植于毀損區(qū)，觀察神經(jīng)干細(xì)胞的存活、遷移和分化。為臨床神經(jīng)干細(xì)胞替代治療做準(zhǔn)備。 研究目的 1．研究胎鼠腦海馬神經(jīng)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、增殖及分化特點(diǎn)。 2．觀察胎鼠神經(jīng)干細(xì)胞移植入海人酸毀損大鼠海馬中的遷移和分化情況。 研究方法 1．采用無(wú)血清培養(yǎng)、單細(xì)胞克隆技術(shù)及免疫細(xì)胞化學(xué)方法，觀察海馬源性神經(jīng)干細(xì)胞的體外擴(kuò)增和貼壁分化情況。 2．立體定位注射海人酸毀損大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞。 3．毀損一周后，將Hoechst33342標(biāo)記的神經(jīng)干細(xì)胞移植毀損區(qū)，分別于術(shù)后1周、2周、4周、8周取材，利用免疫熒光技術(shù)，追蹤移植的神經(jīng)干細(xì)胞在毀損側(cè)海馬中的存活、遷移和分化情況。 研究結(jié)果 1．從大鼠胚胎腦海馬分離的細(xì)胞具有增殖能力，可以傳代培養(yǎng)，子代細(xì)胞免疫組化顯示神經(jīng)巢蛋白(Nestin)陽(yáng)性。經(jīng)含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，貼 南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 壁可分化為微管相關(guān)蛋白一2(MAP:)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽(yáng) 性細(xì)胞。 2.海人酸特異性毀損大鼠海馬CAI區(qū)錐體細(xì)胞。 3.移植的神經(jīng)干細(xì)胞在海馬錐體層呈鏈狀遷移，并分化為MAP:陽(yáng)性細(xì) 胞和GFAP陽(yáng)性細(xì)胞。 研究結(jié)論 1.用本方法分離培養(yǎng)的細(xì)胞具有自我復(fù)制和多向分化的能力，是中樞神 經(jīng)系統(tǒng)的干細(xì)胞。 2.立體定位注射小劑量海人酸特異性毀損海馬錐體細(xì)胞，不影響過(guò)路神 經(jīng)纖維。 3.移植的神經(jīng)干細(xì)胞在海馬錐體層呈鏈狀遷移，可分化為神經(jīng)元和星形 膠質(zhì)細(xì)胞，大部分神經(jīng)干細(xì)胞分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類(lèi)號(hào)】：R329

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王海燕;任艷霞;杜寧;;海人酸致癇大鼠中多藥耐藥相關(guān)蛋白1和主穹窿蛋白的表達(dá)及作用[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2011年03期

2 劉利敏;趙雅桐;康勁松;李

本文編號(hào)：2788329