【摘要】：目的 尋找AFM觀察人體紅細(xì)胞樣本的最佳溶液，觀察紅細(xì)胞的表面細(xì)微結(jié)構(gòu)，探測AFM下溶液滲透壓對紅細(xì)胞形態(tài)的影響。 材料與方法 利用AFM對實驗室常見的8種溶液進(jìn)行觀察，這8種溶液包括1％甲醛溶液、PBS緩沖液(ph=7.2)、枸櫞酸鹽緩沖液(ph=6.0)、生理鹽水、(?)％葡萄糖溶液、TAE溶液、1640培基、5％EDTA-K_2溶液，8種溶液做成(?)個可進(jìn)行掃描的樣本，采用Contact模式，對每個樣本掃描10個區(qū)域，(?)描范圍為50μm，掃描速率為1Hz。 利用AFM(?)察經(jīng)上述8種溶液處理過的人紅細(xì)胞，采用Tapping模式，每種樣本(?)描5個區(qū)域；每個區(qū)域掃描范圍為30μm～0.5μm，掃描順序依次為(?)μm、一個紅細(xì)胞、紅細(xì)胞膜表面周邊和中央分別掃描1μm及0.5μ(?)大小的區(qū)域(0.5μm區(qū)域是在1μm區(qū)域內(nèi)的進(jìn)一步放大)；掃描速(?)為0.5Hz～1.5Hz。 利用AFM(?)察經(jīng)0.6％Nacl溶液和1.5％Nacl溶液處理過的紅細(xì)胞，采用Tapping(?)，每種樣本掃描5個區(qū)域；每個區(qū)域掃描范圍為30μm～0.5μm，(?)描順序依次為30μm、一個紅細(xì)胞、紅細(xì)胞膜表面周邊和中央分別掃(?)1μm及0.5μm大小的區(qū)域(0.5μm區(qū)域是在1μm區(qū)域內(nèi)的進(jìn)一步(?)大)；掃描速率為0.5Hz～1.5Hz。 結(jié)果 1％甲醛溶液、枸櫞酸鹽緩沖液、5％葡萄糖溶液、TAE溶液、5％EDTA-K_2溶液含有不規(guī)則形顆粒，顆粒數(shù)量不多；PBS緩沖液含4種形狀的顆粒，顆粒數(shù)量多；生理鹽水含4種形狀的顆粒，顆粒數(shù)量多；1640培基含雪花狀顆粒，顆粒數(shù)量多。 8種溶液對紅細(xì)胞處理后，從樣本的背景顆粒、紅細(xì)胞的大小形態(tài)、紅細(xì)胞膜表面的微細(xì)結(jié)構(gòu)來考慮，1％甲醛全血樣本、枸櫞酸鹽全血樣本、5％葡萄糖全血樣本、TAE全血樣本背景顆粒少，紅細(xì)胞大小形態(tài)正常，膜表面細(xì)微結(jié)構(gòu)清晰、呈孔洞和條形隆起狀。 與5％葡萄糖這種等滲溶液處理過的全血樣本相比，0.6％Nacl溶液處理過的紅細(xì)胞膨脹，直徑增大，細(xì)微結(jié)構(gòu)中孔洞呈裂隙狀，條形隆起 原子力顯微鏡對八種溶液及經(jīng)溶液處理后人紅細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察 增粗;1.5%Nacl溶液處理過的紅細(xì)胞皺縮，直徑變小，細(xì)微結(jié)構(gòu)中孔洞 呈裂隙狀，條形隆起變窄。 結(jié)論1%甲醛溶液，構(gòu)椽酸鹽緩沖液，5%葡萄糖溶液和TAE溶液可繼 續(xù)應(yīng)用于原子力顯微鏡紅細(xì)胞的觀察研究。紅細(xì)胞膜表面細(xì)微結(jié)構(gòu)呈孔 洞狀、條形隆起狀。0.6%Nacl溶液和1 .5%Nacl溶液處理過的紅細(xì)胞由 于滲透壓改變，紅細(xì)胞大小形態(tài)和膜表面微細(xì)結(jié)構(gòu)發(fā)生相應(yīng)的改變。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R361.3

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