【摘要】： 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）可促進抗原提呈細胞（antigen presenting cells，APC）的成熟和激活增強抗原的提呈，具有免疫佐劑作用。HBV前S2蛋白在介導乙肝病毒進入，肝細胞中起著重要的作用，而且前S2抗原的T細胞表位有助于提高機體對S抗原的抗體應答水平。為研究GM-CSF和PreS2對乙肝DNA疫苗的免疫增強作用，本研究通過PCR方法、T-A克隆技術(shù)以及基因定向克隆手段，將重組人GM-CSF基因與乙肝病毒前S2抗原和表面抗原基因（HBVPreS2S，S2S）融合，構(gòu)建了融合基因真核表達載體PcDNA3.1-S2S-rhGM-CSF，并在HepG2細胞中表達，初步得出以下結(jié)果： 1. 重組質(zhì)粒PcDNA3.1-S2S-GM-CSF, PcDNA3.1-S2Sc，PcDNA3.1-S -GM-CSF和PcDNA3.1-Sc經(jīng)酶切、PCR和DNA測序鑒定構(gòu)建正確。 2. 重組質(zhì)粒PcDNA3.1-S2S-GM-CSF, PcDNA3.1-S2Sc, PcDNA3.1-S -GM-CSF和PcDNA3.1-Sc可在HepG2細胞中表達, 而且表達出的蛋白 WP=10 能與相應的單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合，說明融合基因表達質(zhì)粒體外成 功表達； 本研究結(jié)果為新型乙肝DNA疫苗的研制奠定了一定基礎。
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2003
【分類號】：R346

【參考文獻】

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本文編號：2763026