【摘要】： 目的 通過對肺表面活性物質(zhì)(PS)利超氧化物歧化酶(SOD)結(jié)合的研究，探索一條提高超氧化物歧化酶在肺內(nèi)轉(zhuǎn)運并增強抗氧化損傷的途徑，減輕體外循環(huán)、高氧及一氧化氮對肺的損傷，為進(jìn)一步應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。方法 1 通過半邊膜滲透法(Clark法)，將超氧化物歧化酶進(jìn)行異硫氰酸熒光素(FITC)工《熒光標(biāo)記，用紫外分光光度計計算熒光素與超氧化物歧化酶的結(jié)合率(F／P)，并應(yīng)用超氧化物歧化酶檢測試劑盒分析標(biāo)記前后超氧化物歧化內(nèi)酶的活性；2 通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法將超氧化物歧化酶與肺表面活性物質(zhì)一起構(gòu)建PS-SOD脂質(zhì)體，電鏡測定PS-SOD脂質(zhì)體的粒徑大小，表面張力儀檢測PS-SOD脂質(zhì)體的表面張力，并檢測脂質(zhì)體中超氧化物歧化酶的包封率和超氧化物歧化酶的活性；3將上述方法制備的PS-SOD脂質(zhì)體經(jīng)氣管注入大鼠肺中，分別于術(shù)后2h和24h處死大鼠，取出肺組織，電鏡觀察脂質(zhì)體在肺泡上皮的形態(tài)特征；冰凍切片后通過熒光顯微鏡進(jìn)行熒光強度的定性、定量分析；同時，對大鼠肺進(jìn)行灌洗和制備組織勻漿，并對灌洗液和組織勻漿液進(jìn)行超氧化物歧化酶的生化活性測定，設(shè)立對照組，應(yīng)用SPSS10.0軟件包對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果 1 超氧化物歧化酶可以通過Clark法成功的被FITC標(biāo)記，而活性不受影響，F(xiàn)／P值為2.76；2 通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法，可以將超氧化物歧化酶與肺表面活性物質(zhì)成功構(gòu)建PS-SOD脂質(zhì)體，包封率為40％，PS-SOD脂質(zhì)體的表面張力較天然肺表面活性物質(zhì)無明顯下降，超氧化物歧化酶的抗氧化活性在脂質(zhì)體制備后無明顯改變；3 電鏡顯示脂質(zhì)體可分散或聚集存在于肺泡上皮細(xì)胞中，熒光照片定量、定性分析結(jié)果顯示，PS-SOD脂質(zhì)體組中肺組織FITC熒光強度高于其他對照組，PS-SOD脂 論文：＊s．s＊D脂質(zhì)體攜載S＊D在帥山V坷的實驗研究 質(zhì)體組肺灌洗液和肺組織勻漿的超氧化物歧化酶活性高于其他對照 組。結(jié)論1利用半透膜滲透法，可以成功火觀FITC對超氧化物歧化 酶的標(biāo)記，而超氧化物歧化酶的活性無lWM改變。2．利用反向蒸發(fā) 法，可以利用天然肺表面活性物質(zhì)與超氧化物歧化酶成功制備高活性 的 PS－SOD脂質(zhì)體，而各組分的性質(zhì)無明I，l＼L＆變。3．利用制備的 PS－ SOD脂質(zhì)體，可以成功攜載超氧化物歧化地實現(xiàn)向肺泡上皮細(xì)胞的 轉(zhuǎn)運，并延長超氧化物歧化酶的作用時閃，在肋表面活性物質(zhì)發(fā)揮作 用的同時又增強超氧化物歧化酶在肺內(nèi)的1，＼諷化作用。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R341

【參考文獻(xiàn)】

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1 封志純，彭宜君，梁巧明，吳秉毅，馮永清，王福琴，郝衛(wèi);不同處理法提取的豬肺表面活性物質(zhì)化學(xué)成份比較[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1994年03期

2 劉明耀,張亞霏;小牛肺表面活性物質(zhì)的提取及化學(xué)成分理化特性的測定[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1986年05期

3 楊琳琳,封志純;肺表面活性物質(zhì)蛋白A的提純及其表面活性功能分析[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2000年04期

4 邢泉生,張善通,陳張根,賈兵,孫波,湯順榮;外源性肺表面活性物質(zhì)減輕體外循環(huán)肺缺血-再灌注損傷的臨床研究[J];國外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊;1998年03期

5 陳忠斌,王升啟,王弘,朱寶珍,孫志賢;pH敏脂質(zhì)體對反義寡核苷酸抗流感病毒活性的影響[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;1999年04期

6 施根林，何海明，汪建華，周寧，王國寶;傷寒患者腫瘤壞死因子和Cu－Zn超氧化物歧化酶活性的動態(tài)變化[J];武警醫(yī)學(xué);1995年06期

7 郭洪聲!天津300162,王敏,鄧桂茹!天津300162;超氧化物歧化酶的結(jié)構(gòu)、功能及模擬配合物合成研究進(jìn)展[J];武警醫(yī)學(xué);1999年11期

8 常桂民,段芳齡,盛劍秋,楊淑英;半乳糖脂修飾的脂質(zhì)體靶肝特性實驗研究[J];中華核醫(yī)學(xué)雜志;1998年04期

9 邢泉生,張善通,陳張根,孫波,宓亞平,湯順榮;外源性肺表面活性物質(zhì)對小兒體外循環(huán)肺保護(hù)的療效觀察[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1999年02期

本文編號：2749380