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超抗原與免疫耐受的研究

發(fā)布時間:2020-07-01 19:16
【摘要】: 超抗原(superantigen,SAg)是一組既能與MHC-II結(jié)構(gòu)結(jié)合,又能激活表達(dá)適當(dāng)?shù)腣_β-TCR的T細(xì)胞的有二重功能的蛋白質(zhì)分子。在SAg刺激下,T細(xì)胞出現(xiàn)增殖、凋亡、無能等一系列變化。SAg被用于體內(nèi)外周T細(xì)胞耐受的模型中,對體內(nèi)T細(xì)胞免疫反應(yīng)的耐受的研究具有重要意義。本研究目的是探討在超抗原金黃色葡萄球菌腸毒素(SEB)誘導(dǎo)外周T細(xì)胞免疫耐受的作用機制。方法:用SEB體外刺激C57BL/6J(B_6)小鼠的脾細(xì)胞。以MTT染色法測定細(xì)胞A值,檢測細(xì)胞增殖狀況;用PI染色法經(jīng)流式細(xì)胞儀(FCM)分析不同時相處于S期、G_0-G_1期的T細(xì)胞及無能T細(xì)胞的凋亡情況,并測定分析B細(xì)胞、T細(xì)胞亞群及MHC-I(H-2K~b)表達(dá)的變化;通過瓊脂糖凝膠電泳觀察了不同時間段T細(xì)胞凋亡的DNA特征;蘇木素染色,光鏡下觀察凋亡小體。結(jié)果:部分去除CD8~+T細(xì)胞后,SEB可刺激B6小鼠脾細(xì)胞中CD4~+T細(xì)胞的大量增殖。在SEB刺激第3天,CD4~+T細(xì)胞中處于S期的比率最大,此后即開始下降,而處于G_0-G_1期的CD4~+T細(xì)胞變化則相反;在初刺激第3天,增殖的CD4~+T細(xì)胞出現(xiàn)無能,用FCM、DNA ladder、蘇木素染色光鏡下觀察均證實在第7天時無能CD4~+T細(xì)胞出現(xiàn)凋亡,且凋亡的比率逐漸增多,不因加入抗CD3抗體、ConA、SEB、IL-2和APC逆轉(zhuǎn);在SEB刺激后,CD4~+T細(xì)胞表面分子MHC-IH-2K~b的表達(dá)隨細(xì)胞無能的出現(xiàn)而明顯降低。結(jié)論:CD4~+T細(xì)胞在SEB刺激后雖有增埴,但增殖后的CD4~+T細(xì)胞的增殖能力逐漸下降,對二次抗原刺激增殖受抑,即處于無能狀態(tài);無能先于凋亡出現(xiàn),無能CD4~+T細(xì)胞的產(chǎn)生與凋亡無關(guān);無能T細(xì)胞的凋亡是逐漸發(fā)生的,與重要營養(yǎng)素的缺乏、毒性代謝產(chǎn)物的積聚無關(guān)。SEB誘導(dǎo)的免疫耐受可能與其所引起的體內(nèi)CD4~+T細(xì)胞無能、凋亡及下調(diào)節(jié)細(xì)胞表面分子MHC-I的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2003
【分類號】:R392

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本文編號:2737167


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