【摘要】：目的探討E盒結(jié)合鋅指蛋白(ZEB)2基因3′非翻譯區(qū)(3′UTR)轉(zhuǎn)染人胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1后對其增殖、侵襲、遷移的影響。方法將人工合成的ZEB2 3′UTR質(zhì)粒及miR-200b micmics采用脂質(zhì)體Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染GES-1細(xì)胞。分別設(shè)對照組、突變組和ZEB2 3′UTR組,qRT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后miR-200a/b/c及ZEB1/ZEB2mRNA的表達(dá)。再設(shè)對照組、ZEB2 3′UTR組、ZEB2 3′UTR+無義序列組和ZEB2 3′UTR+miR-200b micmics組。West-ern blot檢測轉(zhuǎn)染后ZEB1/ZEB2、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2/9、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)蛋白的表達(dá);Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞侵襲遷移能力;MTT法檢測細(xì)胞增殖活性。結(jié)果與對照組及突變組相比,轉(zhuǎn)染ZEB2 3′UTR組miR-200a/b/c的表達(dá)均下調(diào),以miR-200b最為明顯,ZEB1/ZEB2 mRNA及蛋白水平表達(dá)上調(diào),其細(xì)胞遷移、侵襲、增殖活性均增強(qiáng)(P0.05)。ZEB2 3′UTR+miR-200b micmics組較ZEB2 3′UTR組遷移、侵襲、增殖活性降低。結(jié)論ZEB2 3′UTR可能通過調(diào)控miR-200a/b/c的表達(dá)進(jìn)而影響其對靶基因的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,增加細(xì)胞的侵襲、遷移能力,導(dǎo)致GES-1細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化傾向。

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本文編號：2734098