【摘要】： HCMV感染在免疫功能低下人群尤其是幼兒、AIDS病人以及器 官移植受者中可引起嚴(yán)重疾病，甚至導(dǎo)致患者死亡。針對免疫功能低 下人群HCMV疫苗接種是保護(hù)這一人群的有效途徑。HCMVgB、gH糖蛋 白具有強(qiáng)抗原性，其序列中存在一些主要中和抗體和T細(xì)胞作用位點(diǎn)， 故而是HCMV亞單位疫苗的優(yōu)選表位。HCMVgB基因N末端（gBn）、gp116 和gp55間的蛋白質(zhì)裂解區(qū)（gBclv）以及HCMVgH基因N末端存在核苷 酸序列差異，分析這些位點(diǎn)可將HCMV臨床分離株分為4個gB基因型 和2個gH基因型。在器官移植受者中，關(guān)于HCMVgB基因型的分布及 生物學(xué)意義的研究日益增多，提示HCMVgB基因型與病毒毒力相關(guān)，可 作為判斷臨床預(yù)后的指標(biāo)之一；HCMVgB基因型分布存在一定的地域、 種族差異，可能有新的基因型被發(fā)現(xiàn)。關(guān)于器官移植受者gH基因分型 也有研究，但其生物學(xué)意義尚未闡明。在我國關(guān)于器官移植受者 HCMVgB、gH基因型的研究尚未見報(bào)道。 本研究旨在了解浙江省器官移植受者HCMV分離株糖蛋白gB、gH 基因型分布情況，為進(jìn)一步研究HCMV的致病性、免疫性以及選擇HCMV 亞單位疫苗的理想表位提供依據(jù)。 本研究收集了自1999年12月至2000年9月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬 第一醫(yī)院腎移植、肝移植、骨髓移植受者術(shù)后1～40周外周血標(biāo)本97 例252份。其中骨髓移植18例98份系列血標(biāo)本；肝移植20例93份 系列血標(biāo)本；腎移植57人份；心臟移植2例4份。所有標(biāo)本經(jīng)EDTA 抗凝，并于采血后S小時內(nèi)分離出淋巴細(xì)胞，提取基因組DNA。根據(jù) HCMVgB、gH基因序列設(shè)計(jì)六對引物，采用巢式 PCR（nestPCR，nPCR） 分別擴(kuò)增HCMVgBfl（54～485hp）、HCMVgBCIV（1284～1600hp）、gH（－58～ 230hP）核昔酸片段，擴(kuò)增產(chǎn)物分別為431hP、316hP、288hP，擴(kuò)增片 段包含 HCMVgBn、nBc IV、oH基因 核苦酸變異集中位點(diǎn)。選擇陽性產(chǎn) 物，經(jīng)純化后直接測序，通過序列分析將其分型。分析浙江省HCMV 分離株基因型分布情況。標(biāo)準(zhǔn)株參考AD 169及Towne實(shí)驗(yàn)株。統(tǒng)計(jì)學(xué) 分析采用SPSS干C軟件進(jìn)行X‘檢驗(yàn)。 結(jié)果顯示： 1．在 252份標(biāo)本中，有 23例移植受者（10例 BMT，5例 LT，8例 RT） 的標(biāo)本經(jīng) uPeR檢山 HCMVsBn、srsc IV、sHm性。通過核昔酸及相應(yīng) 氨基酸分析進(jìn)行分型。16例得到nBn基因分型結(jié)果，其中nBnl型 3例（18．80），2地 1例（6．3％），3型 11例（68．8％），l、3混合 刑1例（6．3％），十見4型，gBrl基岡型分布以gBn3型為主（X’二12．286， P二0．006）；14例得到gBCIV基因分型結(jié)果，分屬于gBCIVI～3型， 其中g(shù)Bc VI刑8例（57．l％），2型3例（21．4％），3v3例（21．4％）， 術(shù)見 4 型，gBclv基因型早散在分布（x‘二3．571，P＝0．168）；20 例得到 gH地基岡結(jié)果，分屬了 gHI～2型，其中洲 則 10例（50％）， gHZ型6例（朋％），gHI、2混合型4例（m％），gH基因型呈散在分 布（x’。400，p二0．135）。 2·［［」V鄧n、卯oh、咄基岡型在各移植類型間的分布米見差異。 3．在 11例 HCMV臨床分離株中，有 5例（45 5％）相應(yīng) vBn、nBclv基 岡地別不一致。表現(xiàn)為gBc Ivl－gBn3型4例，gBclvlgBnl、3型1 例。vBnZ～3型與gBc IvZ～3 F：l則呈現(xiàn)出對應(yīng)關(guān)系。 4·HCMVgB、gH基因型之間沒有對應(yīng)關(guān)系。 本研究結(jié)果得到如卜結(jié)論： 1．浙江省器官移植受者 HCMV臨床分離株，其糖蛋白基因分別屬于 gB 基因型l～3型，nH基因型1～2型。nBn基因型分布以nBn3型為主。 2 gBC與 gH基因型呈散在分布。gB基因型分布與歐美等地有差異， 與日本、香港類似。HCMVgB基因型分布受到地域、種族限制。 2．浙江省器官移植受者HCMVgB、gH基因型分布與移植種類無關(guān)。 3．浙江省器官移植受者 HCMV臨床分離株存在較多的 gBclv與 gBn基因 型別的不對應(yīng)現(xiàn)象，提示該地區(qū) HCMV臨床株有較高頻率株內(nèi)基因重 組發(fā)生，是否由此導(dǎo)致病毒抗原性發(fā)生改變，逃避機(jī)體免疫監(jiān)視， 值得進(jìn)一步研究。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號】：R373;R617

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 謝萬灼;骨髓移植后巨細(xì)胞病毒感染的防治研究[J];國外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊;2001年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 謝萬灼;高三尖杉酯堿對白血病細(xì)胞凋亡相關(guān)基因及端�！肆Ｃ傅挠绊懷芯縖D];浙江大學(xué);2000年

本文編號：2722767