【摘要】：GDNF是剛被發(fā)現(xiàn)的一種新型神經(jīng)營養(yǎng)因子，由于對(duì)中樞多巴胺能神經(jīng)元、腦脊運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元這兩類易受損而產(chǎn)生退行性變神經(jīng)元具有極強(qiáng)的特異性促營養(yǎng)活性而倍受研究工作者們的重視，通過基因敲除技術(shù)已發(fā)現(xiàn)它對(duì)交感、副交感，軀體感覺神經(jīng)元以及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的發(fā)育起重要作用，然而，對(duì)于其在神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的詳細(xì)發(fā)育分布狀況卻至今知之不多。本實(shí)驗(yàn)利用原位雜交技術(shù)結(jié)合RT-PCR技術(shù)觀察了GDNF從E16～成年大鼠神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的分布；為了更進(jìn)一步研究GDNF在神經(jīng)發(fā)育中的作用與作用機(jī)制，，本實(shí)驗(yàn)還利用基因克隆技術(shù)克隆了人GDNF基因并進(jìn)行了原核表達(dá)GDNF蛋白的研究。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： (1)．GDNF在神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的分布：主要集中在紋狀體、僵核、腦脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)核團(tuán)、脊髓前后角、三叉神經(jīng)節(jié)、背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)，散在于海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)。在紋狀體、僵核內(nèi)，于E16～P7期間表達(dá)較強(qiáng)，三叉神經(jīng)節(jié)、背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)，在P0～P10期間出現(xiàn)一過性表達(dá)，在腦、脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元核團(tuán)內(nèi)，GDNF表達(dá)在所研究的時(shí)間范圍內(nèi)出現(xiàn)兩次峰值，即E16～P0、P7～P14。以述區(qū)域內(nèi)，在P21以后，表達(dá)迅速下降，至成年，幾乎很少出現(xiàn)陽性信號(hào)。這些結(jié)果提示：GDNF可能在大鼠出生前后，對(duì)上述區(qū)域內(nèi)效應(yīng)神經(jīng)元的生長、發(fā)育起調(diào)控作用。 (2)．本研究利用RT-PCR技術(shù)克隆了編碼人GDNF基因，通過測序表明所克隆到的序列與發(fā)表序列一致，在原核細(xì)胞中表達(dá)出了GDNF蛋白，測活表明具有促中腦神經(jīng)元營養(yǎng)活性，為我們進(jìn)一步研究GDNF打下了基礎(chǔ)。
【圖文】：

GDNF于尾殼核內(nèi)分布

GDNF在舌下神經(jīng)核內(nèi)的分布
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：1997
【分類號(hào)】：R346


本文編號(hào)：2710366