【摘要】：在本實驗中，我們以野生型人類2型腺伴隨病毒(Adeno-associated Virus Type 2，，AAV-2)全基因組載體pSSV9，pSSV9-int~-為基礎，構建了AAV-2重組病毒載體pSSV9／P40-LacZ(+)，pSSV9／P40-LacZ(-)，pSSV9／MuLV-neosv和pSSV9／MuLV-neosv-IL2，以及表達載體pGEM-3zf／P40-LacZ。用重組載體質粒轉染宿主細胞，以及重組病毒轉導宿主細胞后，作了外源基因瞬式表達研究，探討了該載體外源基因表達規(guī)律。對載體質粒轉染和重組病毒感染的細胞進行了初步形態(tài)學觀察研究，考察了該重組病毒載體在使用中的安全性。此外，我們以EBV載體pBV101為基礎，構建了pBV101／AAVitr~-，表達載體，并初步建立了EBV載體重組AAV包裝細胞系統(tǒng)。 1、重組AAV載體的構建 我們以pSSV9(pSSV9-int~-)AAV-2基因組為載體的基礎，從兩個Xba Ⅰ切去AAV的rep和Cap基因，替換以外源基因及其轉錄控制元件。插入AAVP40啟動子和β-半乳糖苷酶基因LacZ(含SV40小T抗原及poly信號)，形成pSSV9／P40-LacZ(+)和pSSV9／P40-LacZ(-)載體。并在克隆過
【圖文】：

PSSVg滬40一LaZ(c+)與PSSVgPf4o一LaZc(一)

用pSSVgP/40一Lacz‘)轉染后表達p半乳糖昔酶的A549細胞
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：1996
【分類號】：R346

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

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2 劉曉鵬,姜寧,何禮遠,王克;馬鈴薯晚疫病菌基因文庫的構建[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;1998年03期

3 翁屹,李飚,蘇成芝,閔永潔,趙忠良;間日瘧原蟲特異性DNA克隆片段的序列測定和分析[J];第四軍醫(yī)大學學報;1992年04期

4 樂穎影，徐仁寶，佟振清;糖皮質激素受體基因在受體缺失型哺乳動物細胞中的表達[J];第一軍醫(yī)大學學報;1994年02期

5 王世平,陳燃,黃正一,楊樹青,顧輝清,毛裕民,董惠琴,楊琰云;浙江有尾兩棲動物分類與演化的RAPD研究[J];復旦學報(自然科學版);1998年04期

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8 任羽;楊光穗;尹俊梅;;一種簡便的石斛DNA提取方法[J];海南師范學院學報(自然科學版);2006年04期

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6 張倩;有機氯化物的生物降解技術研究[D];武漢理工大學;2007年

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8 夏柳蔭;持久性有機污染物五氯苯酚（PCP）的生物降解[D];天津大學;2007年

本文編號：2691147