【摘要】：在本實(shí)驗(yàn)中，我們以野生型人類2型腺伴隨病毒(Adeno-associated Virus Type 2，，AAV-2)全基因組載體pSSV9，pSSV9-int~-為基礎(chǔ)，構(gòu)建了AAV-2重組病毒載體pSSV9／P40-LacZ(+)，pSSV9／P40-LacZ(-)，pSSV9／MuLV-neosv和pSSV9／MuLV-neosv-IL2，以及表達(dá)載體pGEM-3zf／P40-LacZ。用重組載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，以及重組病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)宿主細(xì)胞后，作了外源基因瞬式表達(dá)研究，探討了該載體外源基因表達(dá)規(guī)律。對(duì)載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和重組病毒感染的細(xì)胞進(jìn)行了初步形態(tài)學(xué)觀察研究，考察了該重組病毒載體在使用中的安全性。此外，我們以EBV載體pBV101為基礎(chǔ)，構(gòu)建了pBV101／AAVitr~-，表達(dá)載體，并初步建立了EBV載體重組AAV包裝細(xì)胞系統(tǒng)。 1、重組AAV載體的構(gòu)建 我們以pSSV9(pSSV9-int~-)AAV-2基因組為載體的基礎(chǔ)，從兩個(gè)Xba Ⅰ切去AAV的rep和Cap基因，替換以外源基因及其轉(zhuǎn)錄控制元件。插入AAVP40啟動(dòng)子和β-半乳糖苷酶基因LacZ(含SV40小T抗原及poly信號(hào))，形成pSSV9／P40-LacZ(+)和pSSV9／P40-LacZ(-)載體。并在克隆過
【圖文】：

PSSVg滬40一LaZ(c+)與PSSVgPf4o一LaZc(一)

用pSSVgP/40一Lacz‘)轉(zhuǎn)染后表達(dá)p半乳糖昔酶的A549細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：1996
【分類號(hào)】：R346

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王義權(quán),周開亞,秦樹臻;用RAPD標(biāo)記檢測(cè)六種蛇基因組DNA多態(tài)性[J];動(dòng)物學(xué)報(bào);1996年02期

2 劉曉鵬,姜寧,何禮遠(yuǎn),王克;馬鈴薯晚疫病菌基因文庫的構(gòu)建[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);1998年03期

3 翁屹,李飚,蘇成芝,閔永潔,趙忠良;間日瘧原蟲特異性DNA克隆片段的序列測(cè)定和分析[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1992年04期

4 樂穎影，徐仁寶，佟振清;糖皮質(zhì)激素受體基因在受體缺失型哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1994年02期

5 王世平,陳燃,黃正一,楊樹青,顧輝清,毛裕民,董惠琴,楊琰云;浙江有尾兩棲動(dòng)物分類與演化的RAPD研究[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1998年04期

6 焦曉蓉,潘啟超,潘偉光,陳劍徑;~(14)C標(biāo)記大腸桿菌的生物合成及提純的簡(jiǎn)單方法[J];廣東醫(yī)學(xué);1994年09期

7 李建軍;載脂蛋白(a)的多態(tài)性研究[J];國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè);1994年01期

8 任羽;楊光穗;尹俊梅;;一種簡(jiǎn)便的石斛DNA提取方法[J];海南師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年04期

9 華衛(wèi)建,管笪,潘沈元,楊克合;家蠶的RAPD及其系統(tǒng)間差異初探[J];江蘇蠶業(yè);1997年02期

10 孫仁山,李文維,譚駿;從尖銳濕疣中克隆人乳頭瘤病毒基因組的初步研究[J];免疫學(xué)雜志;1993年01期

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1 雷雪芹;牛、羊多胎性狀的DNA分子標(biāo)記研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2002年

2 賀虹;中國麥紅吸漿蟲地理種群遺傳變異及基因流研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年

3 李強(qiáng);豌豆根瘤菌染色體hurL基因突變對(duì)其結(jié)瘤基因表達(dá)和結(jié)瘤表型的影響[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2004年

4 郝家勝;鵝的部分品種和有關(guān)野雁的分子系統(tǒng)學(xué)和遺傳多樣性研究[D];南京師范大學(xué);1997年

5 翁屹;間日瘧原蟲DNA文庫的構(gòu)建和克隆篩選及其用于瘧疾基因診斷的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1990年

6 孫永利;固定化—共代謝技術(shù)處理五氯苯酚研究[D];天津大學(xué);2007年

7 魯瑩;東北地區(qū)蝗總科昆蟲特有屬種的分類學(xué)研究（直翅目：蝗亞目）[D];東北師范大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 王偉;青海省部分地區(qū)冬蟲夏草遺傳多樣性RAPD分析[D];青海師范大學(xué);2010年

2 張娜娜;11個(gè)微衛(wèi)星和BMP15外顯子在兩個(gè)山羊品種中遺傳多樣性研究[D];河南科技大學(xué);2010年

3 侯宏曉;乳鏈菌肽前體基因克隆及在乳酸乳球菌中的表達(dá)研究[D];西南農(nóng)業(yè)大學(xué);2002年

4 楊小二;豌豆根瘤菌染色體hxy基因的克隆與功能研究[D];華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

5 陸輝;TGF-β1、MMP-9基因多態(tài)性與慢性乙肝易感性的相關(guān)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2007年

6 張倩;有機(jī)氯化物的生物降解技術(shù)研究[D];武漢理工大學(xué);2007年

7 吳丹;碳?xì)浠衔镂廴就寥赖纳锿L(fēng)研究及微生物狀況分析[D];天津大學(xué);2007年

8 夏柳蔭;持久性有機(jī)污染物五氯苯酚（PCP）的生物降解[D];天津大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2691147