本文關(guān)鍵詞：細胞中microRNA的分析及細胞形態(tài)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：細胞不僅是機體的基本組成單位,更是機體進行一切生命活動的基本單元。因此,近年來人們圍繞細胞開展了一系列的科學(xué)研究。本論文以細胞研究為主題,開展了利用連接核酸擴增技術(shù)對單細胞中microRNA進行檢測的工作；通過呼吸圖案法制備了具有穩(wěn)定微井結(jié)構(gòu)的聚苯乙烯薄膜對細胞形態(tài)進行分析；利用電紡絲技術(shù)獲得無細胞毒性的不可逆聚環(huán)氧乙烷濕度檢測器進行環(huán)境濕度監(jiān)控。下面對研究內(nèi)容進行逐一介紹：一、單細胞中microRP NA分析目前人們開展的關(guān)于細胞中的核酸研究大多針對細胞平均水平進行,從而忽略了單細胞個體之間的差異性。然而這類信息在疾病的早期診斷和預(yù)防治療中都非常重要。同時,單細胞也是組織進行新陳代謝的基本單位,針對單細胞開展研究不僅可以為人們研究新型藥物靶點提供信息,還可以為致病機理的闡明提供新的思路。因此,本論文通過對目前開展的關(guān)于單細胞中核酸分析方法進行改進,提出了連接核酸擴增的方法來實現(xiàn)對單細胞中microRNA進行檢測。這種連接核酸擴增的方法具有很高的靈敏度,而且操作簡單快速,因此,它可以作為單細胞中核酸分析的有效途徑。二、細胞形態(tài)研究細胞體外培養(yǎng)的微環(huán)境會影響細胞形態(tài)。當(dāng)細胞所處的生長環(huán)境發(fā)生變化時,細胞會通過調(diào)節(jié)自身狀態(tài)來適應(yīng)這種變化。隨著近年來人們開展的關(guān)于細胞及其生長環(huán)境關(guān)系的研究,人們發(fā)現(xiàn)細胞形態(tài)分析在細胞分析中具有重要意義。因此,關(guān)于細胞形態(tài)分析的研究逐漸發(fā)展起來。目前開展的對于細胞形態(tài)分析的主要方法是采用不同表面結(jié)構(gòu)的材料作為細胞生長基質(zhì),從而模擬環(huán)境變化對細胞產(chǎn)生的影響,進而開展對細胞形態(tài)的分析研究。本論文通過呼吸圖案法制備了聚苯乙烯微井薄膜,將這種具有不同表面特性的微井薄膜作為細胞新陳代謝的物質(zhì)基礎(chǔ),從而為細胞形態(tài)分析的相關(guān)研究提供更可靠的基礎(chǔ)材料。三、環(huán)境濕度檢測細胞培養(yǎng)技術(shù)在工業(yè)化時代得到了廣泛的應(yīng)用。我們可以發(fā)現(xiàn)在醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生物學(xué)以及農(nóng)學(xué)等領(lǐng)域都需要細胞培養(yǎng)技術(shù)。因此,細胞培養(yǎng)技術(shù)成為現(xiàn)代生產(chǎn)工業(yè)中的重要技術(shù)。而在細胞培養(yǎng)過程中應(yīng)該以細胞體內(nèi)生長環(huán)境為依據(jù)為細胞體外培養(yǎng)提供更接近其原來生長狀況的培養(yǎng)條件,這樣才能進一步培養(yǎng)出接近其原來生長狀態(tài)的細胞。關(guān)于細胞培養(yǎng)技術(shù),對細胞生長環(huán)境濕度的控制尤為重要。因此,本論文采用水溶性的聚環(huán)氧乙烷為原料,通過靜電紡絲技術(shù)制備靜電紡絲薄膜,以這種薄膜作為濕度檢測器來實現(xiàn)對環(huán)境濕度的檢測。
【關(guān)鍵詞】：單細胞 microRNA 呼吸圖法 電紡絲 濕度檢測
【學(xué)位授予單位】：陜西師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：O652;R329.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 第1章 緒論9-31
• 1.1 MicroRNA簡介9-18
• 1.1.1 Northern印跡技術(shù)檢測miRNA10-11
• 1.1.2 DNA芯片技術(shù)檢測miRNA11-14
• 1.1.3 均相溶液中檢測miRNA14-18
• 1.2 單細胞中miRNA分析18-20
• 1.2.1 毛細管電泳技術(shù)18-19
• 1.2.2 微流控芯片技術(shù)19-20
• 1.3 細胞形態(tài)研究20-24
• 1.3.1 光刻蝕法21
• 1.3.2 軟刻蝕法21-22
• 1.3.3 掃描電子束刻蝕技術(shù)22
• 1.3.4 呼吸圖案法22-24
• 1.4 環(huán)境濕度檢測24-28
• 1.4.1 細胞培養(yǎng)技術(shù)簡介24-25
• 1.4.2 細胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用25-26
• 1.4.3 靜電紡絲技術(shù)26-28
• 1.5 選題目的及意義28-31
• 第2章 研究報告31-53
• 2.1 單細胞中microRNA分析31-42
• 2.1.1 引言31-32
• 2.1.2 實驗部分32-36
• 2.1.3 結(jié)果與討論36-41
• 2.1.4 本章小結(jié)41-42
• 2.2 細胞形態(tài)研究42-46
• 2.2.1 引言42
• 2.2.2 實驗部分42-43
• 2.2.3 結(jié)果與討論43-46
• 2.2.4 小結(jié)46
• 2.3 環(huán)境濕度檢測46-53
• 2.3.1 引言46
• 2.3.2 實驗部分46-48
• 2.3.3 結(jié)果與討論48-51
• 2.3.4 小結(jié)51-53
• 結(jié)論53-55
• 參考文獻55-65
• 致謝65-67
• 攻讀學(xué)位期間研究成果67

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王玫;李思光;羅玉萍;;microRNA識別和鑒定方法[J];細胞生物學(xué)雜志;2007年04期

2 王晶;朱榮勝;宋萬坤;張聞博;劉春燕;胡國華;陳慶山;;microRNA的實驗和生物信息學(xué)開發(fā)方法[J];生物技術(shù)通報;2008年S1期

3 田明;費菁;胡曉湘;李寧;劉娣;孟慶勇;;microRNA-1,-133,-206在鼠肌肉中的表達譜[J];中國畜牧獸醫(yī);2009年08期

4 LEE Younghee;LUSSIER Yves A;;Identification of common microRNA-mRNA regulatory biomodules in human epithelial cancer[J];Chinese Science Bulletin;2010年31期

5 王芳;余佳;張俊武;;小RNA(MicroRNA)研究方法[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2006年10期

6 鄭玉姝;趙樸;趙宏坤;;microRNA及其應(yīng)用前景[J];生物技術(shù)通訊;2007年01期

7 王春梅;李慶章;;microRNA在小鼠乳腺不同發(fā)育時期差異表達譜及作用(英文)[J];遺傳學(xué)報;2007年11期

8 鄒文輝;;新奇的調(diào)控分子——microRNA[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年34期

9 ;MIRE: A GRAPHICAL R PACKAGE FOR MICRORNARELATED ANALYSIS[J];Chinese Medical Sciences Journal;2008年04期

10 張坤山;李思光;羅玉萍;;調(diào)控過氧化物酶體生物合成和增殖的microRNA的計算機分析[J];細胞生物學(xué)雜志;2009年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 荊清;袁文俊;秦永文;;microRNA的基因調(diào)控新功能[A];中國生理學(xué)會第五屆全國心血管、呼吸和腎臟生理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2005年

2 靳新;駱志剛;王金華;管乃洋;;microRNA靶標(biāo)研究進展[A];中國遺傳學(xué)會功能基因組學(xué)研討會論文集[C];2006年

3 ;Comparasion of Inhibitory Effects on Survivin Gene Expression in Prostate Cancer by Vector-based microRNA and siRNA[A];2008年全國生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要[C];2008年

4 朱丹霞;徐衛(wèi);繆扣榮;方成;朱華淵;董華潔;王冬梅;范磊;喬純;李建勇;;慢性淋巴細胞白血病microRNA異常表達研究[A];第13屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要[C];2011年

5 Yangchao Chen;;Small molecule modulators of microRNA-34a with anti-cancer activities[A];2013醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十三屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2013年

6 金希;厲有名;;單純性脂變與非酒精性脂肪性肝炎間差異microRNA表達譜研究[A];2009香港-北京-杭州內(nèi)科論壇暨2009年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

7 賈新正;盧肖男;聶慶華;張細權(quán);;雞部分microRNA的同源預(yù)測與克隆驗證[A];中國動物遺傳育種研究進展——第十五次全國動物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2009年

8 李炯;段德民;鄭克孝;;新型非標(biāo)記高通量microRNA芯片技術(shù)[A];第一屆全國生物物理化學(xué)會議暨生物物理化學(xué)發(fā)展戰(zhàn)略研討會論文摘要集[C];2010年

9 徐小濤;陸曉;孫婧;束永前;;肺癌側(cè)群細胞microRNA表達譜檢測及初步分析[A];2010’全國腫瘤分子標(biāo)志及應(yīng)用學(xué)術(shù)研討會暨第五屆中國中青年腫瘤專家論壇論文匯編[C];2010年

10 王俊峰;李巍;吳小江;阮康成;;大鼠附睪microRNA表達譜的研究[A];第十一次中國生物物理學(xué)術(shù)大會暨第九屆全國會員代表大會摘要集[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳英云 喬蕤琳;哈醫(yī)大成功研發(fā)國內(nèi)首例microRNA轉(zhuǎn)基因及敲減小鼠模型[N];黑龍江經(jīng)濟報;2010年

2 記者 陳青;2厘米以下肝癌檢出率88%[N];文匯報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 崔洪亮;microRNA的腫瘤表達研究及協(xié)同調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析[D];中南大學(xué);2014年

2 馬建華;高粱低磷低氮形態(tài)生理特征及低氮響應(yīng)的microRNA研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 李虔楨;microRNA相關(guān)基因遺傳多態(tài)性與冠心病臨床關(guān)聯(lián)及預(yù)后研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王耀輝;血清microRNA作為乳腺癌診斷標(biāo)志物的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 周霽子;環(huán)境因素對心臟畸形胎兒影響的表觀遣傳學(xué)機制[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

6 張麗;microRNA通過調(diào)控小膠質(zhì)細胞炎性反應(yīng)參與血管性認知障礙發(fā)生發(fā)展[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 查若鵬;肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)microRNA的鑒定及其分子機制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

8 方硯田;結(jié)腸癌干細胞分選、差異microRNA表達譜檢測以及miR-449b-CCND1、E2F3通路在結(jié)腸癌干細胞自我更新的機制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

9 辛成齊;椰棗microRNA鑒定及其在果實發(fā)育過程中的表達譜研究[D];中國科學(xué)院北京基因組研究所;2015年

10 李棟;先天性心臟病血漿microRNA表達譜及與GATA4靶序列單核苷酸多態(tài)性的關(guān)聯(lián)研究[D];山東大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高智紅;應(yīng)用多樣性增量方法識別人類基因組microRNA前體序列[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2010年

2 王娜娜;microRNA進化關(guān)系及編碼特性研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2007年

3 王玫;小麥microRNA的鑒定與分析[D];南昌大學(xué);2007年

4 秦保東;原發(fā)性膽汁性肝硬化microRNA表達譜的檢測及其功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 吳曉妍;基于納米復(fù)合材料及生物放大技術(shù)構(gòu)建的電化學(xué)microRNA傳感器的研究[D];西南大學(xué);2015年

6 周景輝;2型糖尿病microRNA表達譜及其信號通路研究[D];華南理工大學(xué);2015年

7 姜溪;血漿microRNA-486、microRNA-499在肺癌中的表達及臨床價值的研究[D];河北大學(xué);2015年

8 林杉;營養(yǎng)誘導(dǎo)舍飼綿羊非繁殖季節(jié)發(fā)情相關(guān)microRNA篩選及其靶基因功能驗證[D];石河子大學(xué);2015年

9 林妹妹;microRNA-192 和 microRNA-21 在 IBD 患者中的表達情況[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

10 徐嬌陽;循環(huán)microRNA用于低氧性肺動脈高壓早期診斷的實驗研究[D];石河子大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：細胞中microRNA的分析及細胞形態(tài)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：267305