發(fā)布時(shí)間：2020-05-17 06:58

【摘要】： 背景與目的 工頻磁場(chǎng)的生物學(xué)效應(yīng)，尤其是工頻磁場(chǎng)對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā) 展的影響，是當(dāng)前國(guó)際上熱點(diǎn)問題。工頻磁場(chǎng)對(duì)腦的影響研究較少。 在流行病學(xué)調(diào)查方面，工頻磁場(chǎng)輻射是否致腦腫瘤患病率增高尚有爭(zhēng) 議。有實(shí)驗(yàn)研究認(rèn)為工頻磁場(chǎng)可致腦細(xì)胞DNA單鏈、雙鏈斷裂率， DNA-DNA、DNA-蛋白交鏈形成率增高。近幾年來(lái)，細(xì)胞間隙連接通 訊（GJIC）的抑制被看作是檢測(cè)可疑促癌劑的一個(gè)重要指標(biāo)。本課題 試圖通過觀察50Hz正弦交變磁場(chǎng)對(duì)SD大鼠大腦星形膠質(zhì)細(xì)胞GJIC 的影響來(lái)研究工頻磁場(chǎng)是否致腦腫瘤或協(xié)同其他促癌劑（如：佛波酯） 致腦腫瘤。 材料與方法1．實(shí)驗(yàn)分組：（1）空白對(duì)照組（0mT工頻磁場(chǎng)）；（2）0.8mT 工頻磁場(chǎng)處理組；（3）1.6mT工頻磁場(chǎng)處理組：（4）TPA組：（5）0.8mT 工頻磁場(chǎng)+TPA組；（6）1.6mT頻磁場(chǎng)+TPA組。2．星形膠質(zhì)細(xì)胞培 養(yǎng)、鑒定：取生后3天內(nèi)SD大鼠大腦組織，原代培養(yǎng)9天，傳代一次， 培養(yǎng)6天。采用免疫組織化學(xué)方法——SP法，用GFAP鑒定星形膠質(zhì) 細(xì)胞，星形膠質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性率達(dá)98％以上。3．星形膠質(zhì)細(xì)胞處理：TPA 組細(xì)胞與3ng/ml TPA接觸1小時(shí)；磁場(chǎng)輻射組細(xì)胞接受0.8mT或1.6mT、 50Hz正弦交變磁場(chǎng)暴露24小時(shí)；TPA+磁場(chǎng)輻射組細(xì)胞接受0.8mT或 1.6mT，50Hz正弦交變磁場(chǎng)輻射23小時(shí)后，加入3ng/ml TPA，再共同 作用1小時(shí)�？瞻讓�(duì)照組置于假輻射器內(nèi)24小時(shí)。4．FRAP法檢測(cè) GJIC：細(xì)胞經(jīng)處理后，6-CFDA負(fù)載，然后在LSCM上用FRAP法檢測(cè)。 獲取漂白前、后各次掃描圖像，漂白細(xì)胞及校正細(xì)胞熒光強(qiáng)度的變化， 并得出相應(yīng)的時(shí)間－強(qiáng)度變化趨勢(shì)圖。5．SPSS10刀軟件包做Kruskal 。lid W8lliS’S檢驗(yàn)、Kefld。11’S等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)，，O＜0．05表示有顯著 性差異。 技果1．各處理組相對(duì)熒光強(qiáng)度恢復(fù)百分比（CFIRP）在漂白后omin為 0％，隨掃描時(shí)間延長(zhǎng)，CFIRP逐漸增高�？瞻讓�(duì)照組在漂白后10min時(shí)， CFIRP基本恢復(fù)至漂白前水平，所以選擇漂白后10min時(shí)的相對(duì)熒光強(qiáng) 度恢復(fù)速率（CFIRR）進(jìn)行比較。同時(shí)隨掃描時(shí)間延長(zhǎng)，各處理組CFIRR 逐漸下降。2．TPA是一種己知強(qiáng)促癌劑，能抑制多種細(xì)胞的GJIC， 其抑制效應(yīng)與濃度、作用時(shí)間有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)研究3ng／ml 1”PA作用1，J’時(shí)，結(jié)果得出：TPA濃度為3ng／ml時(shí)能夠明顯抑制星形 膠質(zhì)細(xì)胞 GJIC（CFIRRC。n；r。：：9．74；CFIRRTpA：4．53，H＝12，084， p＝0．00）。3．空白對(duì)照組、0．smT工頻磁場(chǎng)處理組、1．6mT工頻磁場(chǎng) 處理組CFIRR 分別為：9．74、8．25、6．68。由上述數(shù)據(jù)可知，隨著磁 場(chǎng)強(qiáng)度的增強(qiáng)，CFIRR逐漸下降，呈負(fù)相關(guān)（，＝－0．180，p＝0刀32），說 明工頻磁場(chǎng)對(duì) GJI的抑制作用隨磁場(chǎng)強(qiáng)度（0～1．6mT范圍內(nèi)）增強(qiáng)呈 遞增趨勢(shì)。但是 0．8或 1．6mT頻磁場(chǎng)不能夠抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞 GJIC （H—4．124，p—0．127，與空白對(duì)照組比較）。4．空白對(duì)照組、TPA組、 0．smT工頻磁場(chǎng)＋TPA組、互．6mT頻磁場(chǎng)＋TPA組 CFIRR分別為 9．74、 4．53、3．32、2．16。隨著與TPA共同作用的工頻磁場(chǎng)強(qiáng)度的增強(qiáng)，CFIRR 逐漸下降，呈負(fù)相關(guān)（T＝－0，338，p。0刀00）。0．smT或1石mT工頻磁場(chǎng) 與TPA（3ng／ml）共同作用能夠抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞GJIC（H＝32石17， p－0．000，與空白對(duì)照組比較）。5．TPA、0．smTI頻磁場(chǎng)＋TPA組、1．6mT 工頻磁場(chǎng)＋TPA組CFIRR分別為4．53、3．32、2．16。0石mT或1．6mT工 頻磁場(chǎng)與TPA（3ng／ml）無(wú)協(xié)同增強(qiáng)對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞GJIC 抑制作用 （H＝2．589，P＝0．274，與TPA組比較）。同時(shí)隨著與TPA共同作用的工 頻磁場(chǎng)強(qiáng)度的增強(qiáng)，CFIRR逐漸下降，但是CFIRR下降等級(jí)相關(guān)性檢 驗(yàn)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（，一0．136；p功．173人 結(jié)論 2 l．FRAP法是評(píng)價(jià)可疑促癌劑對(duì)GJIC作用的簡(jiǎn)便而可靠的方法。 2．3nglml TPA作用 1，J’時(shí)，能夠高度抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞 GJIC。 3．0．smT或1．6mT、50Hi正弦交變磁場(chǎng)單獨(dú)輻射24 ，J’時(shí)不能抑制星形 膠質(zhì)細(xì)胞GJIC，協(xié)同TPA也不能增強(qiáng)對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞GJIC的抑制 作用。但是磁場(chǎng)對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞GJIC的抑制作用隨著磁場(chǎng)強(qiáng)度 （0～1．6mT范圍內(nèi)）增強(qiáng)呈遞增趨勢(shì)。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：R363;R730.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2668124