【摘要】： 目的 探討胸腺基質(zhì)細(xì)胞對(duì)正常及熱應(yīng)激損傷小鼠胸腺細(xì)胞的調(diào)節(jié) 作用及其機(jī)制。 方法 取5周齡BALB/c雄性小鼠胸腺，制成小鼠胸腺細(xì)胞懸液， 43℃熱應(yīng)激1h后，與初代培養(yǎng)的小鼠胸腺基質(zhì)細(xì)胞（TSC）及50％初 代胸腺基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)上清（TSC-SN）共同培養(yǎng)，在培養(yǎng)的第0、6、12、 24、48h收集胸腺細(xì)胞，計(jì)數(shù)胸腺細(xì)胞總數(shù)及存活率，，用流式細(xì)胞儀分 析胸腺細(xì)胞的凋亡率、表達(dá)Fas、Fas-L和HSP70的陽性率及CD4CD8 細(xì)胞亞群變化情況，并用光鏡和電鏡觀察TSC與胸腺細(xì)胞的相互作用。 結(jié)果（1）熱應(yīng)激使胸腺細(xì)胞凋亡率、Fas、Fas-L及HSP70表達(dá) 增高，胸腺細(xì)胞凋亡與Fas、Fas-L的表達(dá)密切相關(guān)。（2）非應(yīng)激的胸腺 細(xì)胞與TSC共培養(yǎng)后，存活率增高，凋亡率及Fas、Fas-L表達(dá)降低， 但細(xì)胞總數(shù)及CD4~+CD8~+（DP）細(xì)胞均顯著減少，CD4~+CD8~-和CD4~-CD8~+（SP） 的細(xì)胞比例明顯增加。（3）與TSC共培養(yǎng)的熱應(yīng)激胸腺細(xì)胞，細(xì)胞總 數(shù)顯著減少，DP細(xì)胞與SP細(xì)胞均減少，HSP70的表達(dá)比熱應(yīng)激對(duì)照 組增加，凋亡率及Fas、Fas-L的表達(dá)均低于單獨(dú)培養(yǎng)的熱應(yīng)激對(duì)照組， 但明顯高于與TSC共培養(yǎng)的非應(yīng)激的胸腺細(xì)胞組。（4）光鏡和電鏡可 觀察到TSC大量粘附和吞噬正常及熱應(yīng)激胸腺細(xì)胞，其中被TSC吞入 的胸腺細(xì)胞和一些被粘附的胸腺細(xì)胞已凋亡。（5）TSC-SN可使體外培 養(yǎng)的熱應(yīng)激胸腺細(xì)胞凋亡率和Fas、Fas-L表達(dá)陽性率下降，使正常胸 腺細(xì)胞凋亡率和Fas表達(dá)陽性率下降，但對(duì)正常及熱應(yīng)激胸腺細(xì)胞HSP70 的表達(dá)無明顯影響。 結(jié)論（1）Fas/Fas-L介導(dǎo)的凋亡是體外培養(yǎng)胸腺細(xì)胞自發(fā)的及熱 應(yīng)激誘導(dǎo)的主要死亡形式，熱應(yīng)激主要誘導(dǎo)DP胸腺細(xì)胞凋亡，HSP70 表達(dá)增高是熱應(yīng)激胸腺細(xì)胞損傷的標(biāo)志；（2）TSC與正常胸腺細(xì)胞的直 接接觸具有兩種生物作用，①吞噬清除DP細(xì)胞；②可能促進(jìn)部分DP 細(xì)胞分化為成熟的SP細(xì)胞，使DP細(xì)胞減少，SP胸腺細(xì)胞增加；（3） 熱應(yīng)激胸腺細(xì)胞中的DP細(xì)胞和SP細(xì)胞均可被TSC吞噬，TSC促進(jìn)熱應(yīng) 激胸腺細(xì)胞HSP70表達(dá)增高可能具有雙重意義，既可保護(hù)胸腺細(xì)胞，又 l 可促進(jìn)TSC識(shí)別和吞噬己受損或凋亡的胸腺細(xì)胞，發(fā)揮免疫監(jiān)視作用，l IHSP70在抗原提呈中的作用，可能是熱應(yīng)激損傷胸腺細(xì)胞中刃細(xì)胞也 l D 可被HC識(shí)別和吞噬的分子基礎(chǔ)；N）TSC對(duì)非應(yīng)激胸腺細(xì)胞保護(hù)作用D l 明顯強(qiáng)于對(duì)熱應(yīng)激胸腺細(xì)胞，胸腺細(xì)胞表達(dá)Fas、Fas千與凋亡的密切l(wèi) l 關(guān)系提示一種胸腺細(xì)胞排除的機(jī)制；門）在體外，T％｛N對(duì)正常和熱 l D 應(yīng)激損傷的胸腺細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：第一軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2000
【分類號(hào)】：R392.12

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 白楊;表達(dá)幽門螺桿菌粘附素保守區(qū)的減毒鼠傷寒沙門菌的構(gòu)建及其免疫治療作用的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2002年

本文編號(hào)：2650870