【摘要】：目的 探討大鼠精原細(xì)胞的分離純化及雙酚A對(duì)精原細(xì)胞活力和結(jié)構(gòu)的影響。方法 三種酶兩步消化法制備10dWister大鼠睪丸的單細(xì)胞懸液;Percoll不連續(xù)密度梯度分離精原細(xì)胞;用貼壁速度的差異純化精原細(xì)胞。光電鏡觀察精原細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征;應(yīng)用c-kit免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定精原細(xì)胞。苔盼藍(lán)計(jì)數(shù)法探討不同劑量組雙酚A(1×10~(-4)mol/L、1×10~(-5)mol/L、1×10~(-6)mol/L、1×10~(-7)mol/L)對(duì)離體培養(yǎng)精原細(xì)胞活力的影響;吉姆莎染色觀察不同劑量組雙酚A對(duì)離體培養(yǎng)精原細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果 精原細(xì)胞主要分布于28%～36%(Ⅱ帶)間的Percoll梯度;分離純化的精原細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與組織切片上精原細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)一致,其純度達(dá)55.68%;c-kit在精原細(xì)胞呈陽(yáng)性表達(dá),在睪丸其他細(xì)胞呈弱陽(yáng)性或陰性表達(dá)。雙酚A可降低離體培養(yǎng)精原細(xì)胞活力,增加精原細(xì)胞核固縮數(shù)量,改變精原細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。結(jié)論 利用三種酶兩步消化法、Percoll不連續(xù)密度梯度及體外培養(yǎng)貼壁速度的差異分離純化的精原細(xì)胞滿足體外實(shí)驗(yàn)要求;精原細(xì)胞表達(dá)特異的c-kit受體。雙酚A對(duì)精原細(xì)胞有直接的細(xì)胞毒性作用。
【圖文】：

時(shí)間(天)圖4隨著時(shí)間的延長(zhǎng)各劑量組對(duì)離體培養(yǎng)精原細(xì)胞活力的影響結(jié)果表明:隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，各劑量組均可降低離體培養(yǎng)精原細(xì)活力:與正常對(duì)照組比較，雙酚A各劑量組隨劑量增加，對(duì)離體培原細(xì)胞活力影響越大。

離體培養(yǎng)的精原細(xì)胞散在或成堆成串:單個(gè)精原細(xì)胞胞體大，圓形;胞質(zhì)少;核大成圓形，可見1一3個(gè)核仁;存在凋亡細(xì)胞離體培養(yǎng)的精原細(xì)胞成堆成串或散在;單個(gè)精原細(xì)胞胞體大圓形，胞質(zhì)少，核大圓形或橢圓形，可見1~3個(gè)核仁;凋亡細(xì)胞少。圖16雙酚A(低劑量)組(Giemsa)10X100離體培養(yǎng)的精原細(xì)胞散在或成串成堆;部分細(xì)胞可見細(xì)胞間橋;多數(shù)細(xì)胞形態(tài)同正常對(duì)照組;少部分細(xì)胞胞體縮小，核固縮，核仁不明顯。圖17雙酚A(中劑量)組(Giemsa)10X100離體培養(yǎng)的精原細(xì)胞散在或成堆成串，形態(tài)同正常對(duì)照組;部分細(xì)胞胞體縮小，胞膜皺縮，核固縮，核仁不明顯;部分細(xì)胞胞漿內(nèi)可見嗜堿性顆粒。
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R329.2

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