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人源胸腺素原—白介素融合蛋白基因克隆及其真核表達載體的構(gòu)建

發(fā)布時間:2020-04-20 09:41
【摘要】:人源胸腺素α原(Human prothymosinα,ProTα)是一個在體內(nèi)分布廣泛,進化上高度保守的強酸性蛋白質(zhì),ProTα作為免疫調(diào)節(jié)因子具有多種生理功能,其相對分子量為1.3×104Da,基因定位于第二號染色體上,目前已有6個亞家族成員被克隆和測序。其中高加索人種的ProTα基因,表達產(chǎn)物已作為抗腫瘤的一種生物制品已進入了臨床驗證階段。 白介素2(interleukin 2,IL-2)從前被認為是一種T細胞生長因子,它是由凝集素刺激或者被抗原激活的T細胞所產(chǎn)生有效的免疫調(diào)節(jié)因子。IL-2基因定位于人的第四條染色體上,分子量為1.5×104Da。IL-2不僅可以由受刺激的T細胞細胞產(chǎn)生,而且可以由某些T淋巴瘤細胞系產(chǎn)生。IL-2對于研究T細胞分化和產(chǎn)生時候的分子的特性具有重要的作用。它提高了自然殺傷細胞的活性,,可以用于治療癌癥。但是過度使用IL-2會帶來不良反應(yīng)。 IL-2和 ProTα協(xié)同作用于自體腫瘤的反應(yīng)比單獨使用IL-2所引起的反應(yīng)要強一些。IL-2和ProTα的聯(lián)合使用不僅能降低單獨使用IL-2產(chǎn)生的毒副作用,而且還能夠提高抗腫瘤的效果。 根據(jù)GenBank上發(fā)表的ProTα和IL-2序列,設(shè)計了兩對特異引物通過RT-PCR的方法分別從人T淋巴細胞和人HL-60白血病細胞的總RNA中擴增出ProTα和IL-2基因,然后再設(shè)計帶有連接子的引物把兩個單獨的基因連接成為一個融合基因 ProTα-IL-2。把 ProTα和 ProTα-IL-2分別克隆到質(zhì)粒pcDNA3.1(-)上,構(gòu)建成真核表達載體。分別對 ProTα和 ProTα-IL-2測序,測序結(jié)果基本上與Genbank上發(fā)表的序列一致。
【圖文】:

人源胸腺素原—白介素融合蛋白基因克隆及其真核表達載體的構(gòu)建


IL-2的PCR產(chǎn)物Fig1IL-2PCRproduct

人源胸腺素原—白介素融合蛋白基因克隆及其真核表達載體的構(gòu)建


胸腺素α原的PCR產(chǎn)物Fig2ProTαPCRproduct
【學(xué)位授予單位】:廣西師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2004
【分類號】:R346

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 張符光,劉佃辛,宋農(nóng),王新為,張兆山,馬清鈞;人胸腺素α原cDNA的克隆及在大腸桿菌中的表達[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;1996年04期



本文編號:2634412

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