【摘要】：補(bǔ)體系統(tǒng)在抵抗微生物感染的天然免疫防御中起著重要作用，然而，補(bǔ)體異常(包括程度和部位)活化也參與許多疾病的發(fā)生和發(fā)展。臨床資料已證明許多疾病均與補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥有關(guān)。因此，抗補(bǔ)體治療一直是補(bǔ)體學(xué)研究中的重要領(lǐng)域之一。人們先后嘗試了許多抑制補(bǔ)體激活的方法，但迄今尚無(wú)真正能夠應(yīng)用于臨床的抗補(bǔ)體藥物。 本課題組另辟蹊徑，選擇補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑始動(dòng)分子C1q為靶標(biāo)，利用噬菌體肽庫(kù)技術(shù)，研究可抑制補(bǔ)體激活的C1qR模擬肽。以C1q為釣餌蛋白，親和篩選噬菌體線性十二肽庫(kù)并經(jīng)初步鑒定，獲得一批結(jié)合C1q的噬菌體克隆。本實(shí)驗(yàn)對(duì)之進(jìn)一步研究，包括以下三個(gè)部分。 一、C1q結(jié)合性噬菌體克隆的系統(tǒng)鑒定 采用U937細(xì)胞配體結(jié)合抑制實(shí)驗(yàn)和AIgG競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)，從結(jié)合C1q的噬菌體克隆中，篩選到14個(gè)強(qiáng)陽(yáng)性克隆。從其展示肽DNA測(cè)序結(jié)果推導(dǎo)氨基酸順序，得到9個(gè)序列(2個(gè)相同序列，4個(gè)沒有測(cè)出)：HWDPFSLSAYFP、WTPVRTNPFLLH、NGHLFSLSAYFP、RTQRNSPFFLCP、SPAFHPEHMGRG、SRAFHPFYRGRA、WYEGPFTLQTWP、LTQHNSPFFLLP和TSNPFFLWYPQP。 二、合成肽及其BSA偶聯(lián)物的活性研究 從上述9個(gè)序列中挑選抑制活性較高的5個(gè)序列指導(dǎo)人工合成短肽，一部分合成肽與BSA偶聯(lián)，，分別采用U937細(xì)胞配體結(jié)合抑制試驗(yàn)、AIgG競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)、CH50抑制試驗(yàn)測(cè)試其生物學(xué)活性。結(jié)果顯示，游離的合成肽對(duì)C1q的結(jié)合活性和溶血活性幾無(wú)影響，而偶聯(lián)肽對(duì)C1q與U937細(xì)胞表面受體、AIgG的結(jié)合以及C1q介導(dǎo)的溶血均有抑制作用，表明這5個(gè)C1qR模擬肽能抑制C1q與免疫復(fù)合物結(jié)合，從而阻斷補(bǔ)體經(jīng)典途徑的激活。 三、合成膚的改建及活性鑒定 根據(jù)前兩部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們選擇短膚 短膚a的序列為HWDPFSLSAY下P a加以改建并進(jìn)一步研究。 設(shè)計(jì)作如下改建:a1: 。G. GGGHYVDPFSLSAYFPSHS，a2: 以期獲 得結(jié)構(gòu)穩(wěn)定且具補(bǔ)體抑制活性的短膚。人工合成短膚后，鑒定了合成膚 al的活性，結(jié)果顯示al對(duì)clq與U937細(xì)胞表面受體、AlgG的結(jié)合以 及clq介導(dǎo)的溶血均有一定程度的抑制作用，表明線性膚經(jīng)過再設(shè)計(jì)， 可能恢復(fù)了其在噬菌體顆粒表面的結(jié)構(gòu)，因而重新獲得了Clq抑制活性。 我們篩選、鑒定了一些可抑制補(bǔ)體經(jīng)典途徑激活的ClqR模擬短膚， 它們對(duì)于補(bǔ)體異常激活有關(guān)疾病的治療具有潛在應(yīng)用價(jià)值，但尚需進(jìn)一 步深入研究，才可能使之發(fā)展成為有效的小分子補(bǔ)體抑制劑。
【圖文】：

昆蟲、動(dòng)物、植物天然免疫模式識(shí)別的途徑Fig1Pathwaysofilmateirnln切吐tyPattemreeo娜tionininseets，mammalsants
【學(xué)位授予單位】：第一軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R392

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李文君,譚艷,陳政良;C1q結(jié)合十二肽的篩選與初步鑒定[J];免疫學(xué)雜志;2004年06期

2 李文君,張麗蕓,陳政良;從噬菌體隨機(jī)環(huán)七肽庫(kù)篩選可模擬C1qR的C1q結(jié)合肽[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2004年05期

3 栗志民;張士璀;;細(xì)菌逃避補(bǔ)體識(shí)別和攻擊的機(jī)制[J];中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年04期

4 譚艷,陳政良;C1q結(jié)合十二肽的活性研究[J];免疫學(xué)雜志;2004年06期

5 Chan AC;曾一鷗;;補(bǔ)體第四成分(C4)的20種變異體[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;1985年05期

6 李文君,陳政良;C1q受體研究進(jìn)展[J];免疫學(xué)雜志;2002年S1期

7 王連芳,崔燕燕,張鉜英,郭玲琳,張利增;放免法檢測(cè)血清補(bǔ)體免疫沉淀抑制作用的研究[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;1988年01期

8 謝佩蓉,王雪峰,陳云亮,馮慶和,鄭萍,朱錫華;分泌抗人C_(1q)單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1985年04期

9 胡靜;譚艷;陳政良;;C1q結(jié)合線性十二肽的改建及其活性鑒定[J];免疫學(xué)雜志;2006年03期

10 汪晗;孫黔云;;尖吻蝮蛇毒中一種具有抗補(bǔ)體活性金屬蛋白酶的分離純化及部分性質(zhì)鑒定[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2010年11期

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 楊惠琴;王婷;;治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的常用單味中藥[A];全國(guó)第八屆中西醫(yī)結(jié)合風(fēng)濕病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前5條

1 栗志民;青島文昌魚體液補(bǔ)體介導(dǎo)弧菌溶菌活性及弧菌逃避補(bǔ)體攻擊機(jī)制的研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2008年

2 胡瑜蘭;硬骨魚類補(bǔ)體關(guān)鍵因子C1q及免疫球蛋白分子克隆、進(jìn)化和功能的初步研究[D];浙江大學(xué);2009年

3 劉愛東;補(bǔ)體變化和重癥肌無(wú)力病情的關(guān)系[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

4 郭唐猛;PTX3介導(dǎo)的動(dòng)脈粥樣硬化晚期斑塊內(nèi)凋亡巨噬細(xì)胞吞噬清除機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2012年

5 董哲;血清淀粉樣蛋白A加速動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成及其致炎作用的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

1 譚艷;具C1q抑制活性C1q結(jié)合十二肽的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

2 丁鑫;補(bǔ)體成分C4d免疫組化染色的系列研究Ⅲ[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

3 卜憲敏;補(bǔ)體成分C4d免疫組化染色的系列研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2006年

4 郭立;柴胡對(duì)補(bǔ)體和大鼠急性肺損傷的作用[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

5 胡靜;具C1q抑制活性的C1q結(jié)合環(huán)七肽的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

6 沈良賢;脂多糖激活補(bǔ)體對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的作用及抑制補(bǔ)體對(duì)脂多糖致急性肺損傷的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2011年

7 程小芹;柴胡總多糖對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞免疫功能的調(diào)節(jié)及其對(duì)大鼠急性肺損傷的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

8 金桂花;重癥肌無(wú)力抗乙酰膽堿受體單鏈抗體基因的構(gòu)建[D];延邊大學(xué);2003年

9 張霞輝;補(bǔ)體C1q對(duì)Aβ1-40纖維誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞炎性反應(yīng)的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2622405