【摘要】：目的 探索建立一種快速、敏感、特異檢測(cè)深部真菌方法。 方法 以5′端標(biāo)記有生物素來(lái)源于真菌28S rDNA保守序列的真菌通用引物對(duì)三屬九種真菌進(jìn)行PCR擴(kuò)增后，，分別進(jìn)行瓊脂糖電泳和與5′端標(biāo)記有地高辛的真菌通用探針或種特異性探針在PCR儀上90℃2分鐘，55℃1分鐘進(jìn)行液相雜交，并將雜交產(chǎn)物固定于鏈親和素包埋的微孔板中，經(jīng)酶標(biāo)抗地高辛抗體結(jié)合，底物顯色。 結(jié)果 1．真菌通用引物可廣譜地?cái)U(kuò)增九種真菌，擴(kuò)增片段為260bp，與文獻(xiàn)報(bào)告一致。2．真菌通用探針可有效地檢測(cè)九種真菌PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。3．真菌PCR產(chǎn)物經(jīng)微孔板液相雜交法檢測(cè)較瓊脂糖電泳敏感32倍，分別為32fg、1fg。4．白色念珠菌種特異探針、新生隱球菌種特異探針、煙曲霉種特異探針在微孔板液相雜交過(guò)程中表現(xiàn)高度的特異性。5．微孔板液相雜交可同時(shí)檢測(cè)多種深部真菌。6．微孔板液相雜交重復(fù)性良好。 結(jié)論 微孔板液相雜交可快速、簡(jiǎn)便、敏感、特異地檢測(cè)深部真菌，可成為臨床早期診斷深部真菌感染有效方法之一。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類(lèi)號(hào)】：R379

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 夏曉輝;豬附紅細(xì)胞體PCR-ELISA檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用[D];延邊大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2594912