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bFGF影響體外培養(yǎng)的不同分化階段成骨細胞活性及凋亡的實驗研究

發(fā)布時間:2020-03-21 06:49
【摘要】: 目的:探討bFGF(basic fibroblast growth factor,bFGF)調(diào)節(jié)成骨細胞活性和凋亡與細胞分化的關(guān)系。材料與方法:用組織塊培養(yǎng)方法作SD大鼠胎鼠骨源性成骨細胞的體外培養(yǎng),獲取實驗細胞模型并劃分其分化階段。在成骨細胞不同分化階段加入10μg/L的bFGF培養(yǎng)3天后,利用生物化學技術(shù)、放射免疫技術(shù)檢測不同分化階段成骨細胞活性及bFGF對成骨細胞活性的影響;并用流式細胞儀檢測法(flow cytometer,F(xiàn)CM)檢測DNA含量及Bcl-2、Fas的表達,分析bFGF對不同分化階段成骨細胞凋亡及其相關(guān)基因Bcl-2、Fas的影響。未加bFGF者為對照組。結(jié)果:取SD大鼠胎鼠顱骨利用組織培養(yǎng)方法分離培養(yǎng)出的細胞,經(jīng)形態(tài)學和ALP(alkaline phosphatas,ALP)、OC(osteocalcin,OC)測定,鑒定為高純度成骨細胞,且具有分化的階段性。bFGF組中ALP含量較對照組低,OC含量與對照組相比有增加趨勢。流式細胞儀檢測到bFGF組中各分化時期組成骨細胞凋亡率均較相對應的對照組低,Bcl-2的表達均較對照組高,F(xiàn)as抗原的表達顯著低于對照組。結(jié)論:bFGF(10μg/L)抑制分化中成骨細胞ALP活性,對OC增加影響不明顯;bFGF對分化中成骨細胞凋亡有抑制作用,其機理與調(diào)節(jié)Bcl-2和Fas的表達有關(guān)。
【圖文】:

周緣,細胞,第三,培養(yǎng)瓶


原代培養(yǎng)的前三天見培養(yǎng)瓶中有較多的組織碎屑,培養(yǎng)的第三天起己可看到個別碎骨塊周圍有細胞出現(xiàn),未完全貼壁的細胞大成圓形或類圓形,,有的細胞剛從骨塊游出,尚未完全脫離骨塊周緣(見圖1)。隨著游出,細胞體積增大,細胞有的單個存在,有的集成團,同時己可看到貼壁的細胞,

細胞


培養(yǎng)至第6天,局部細胞呈集落樣生長100X
【學位授予單位】:昆明醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2003
【分類號】:R329

【引證文獻】

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 張娜;脈沖電磁場對成骨細胞增殖、分化功能和Osterix基因表達的影響[D];山東大學;2011年



本文編號:2592948

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