本文關(guān)鍵詞：補(bǔ)腎祛痰活血湯對缺血再灌注損傷模型大鼠腦組織的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討補(bǔ)腎祛痰活血湯對血腦屏障的保護(hù)作用。研究其對腦缺血再灌注損傷后腦組織HE染色細(xì)胞形態(tài)的影響,腦組織含水量及血腦屏障通透性的影響,咬合蛋白(occludin)、閉鎖小帶蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的改變。方法:將50只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組、治療組和對照組,每組10只。采用改良Zea Longa線栓法建立SD大鼠腦缺血再灌注損傷模型。補(bǔ)腎祛痰活血湯預(yù)處理治療組,消栓通絡(luò)膠囊預(yù)處理對照組,正常組、假手術(shù)組、模型組給與等體積蒸餾水灌胃。在造模3d前對各組給藥物干預(yù),造模后,對大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評分,將1 3分的納入實(shí)驗(yàn)。模型組2分的7只,3分的1只。治療組2分的5只,3分的3只,對照組1分的1只,2分的7只。給藥進(jìn)行3d后,從尾靜脈注射2%伊文氏藍(lán)(EB),按0.2ml/100g體重注射,1h后斷頭取腦,多功能酶標(biāo)儀測定腦組織中伊文氏藍(lán)含量,比較腦缺血再灌注損傷大鼠血腦屏障通透性。取造模側(cè)腦組織入多聚甲醛固定,入蘇木素液染色,二甲苯透明中性樹膠封片,干后鏡下觀察并顯微采圖,進(jìn)行形態(tài)學(xué)比較。用免疫組織化學(xué)法測定損傷區(qū)ZO 1、Occludin蛋白的表達(dá)量,并對結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。取出大鼠左側(cè)前端大腦皮質(zhì),用電子天平稱其濕重后,置于60℃烤箱中烤干24h至恒重。腦組織含水量測定:含水量=(濕重—干重)÷濕重×100%。摘除右側(cè)眼球,靜脈取血3ml,30min內(nèi)室溫條件下置于離心機(jī)于以1500r/min,離心15min,取上清液,置于 80℃冰箱備檢,采用ELISA法測定腦缺血再灌注損傷大鼠VEGF水平,研究藥物對血腦屏障通透性的干預(yù)作用。結(jié)果:伊文氏藍(lán)(EB)在正常組、假手術(shù)組、模型組、治療組和對照組中腦組織濃度有顯著差異(P0.01)。預(yù)處理治療組濃度低于對照組,模型組濃度最高,正常組濃度最低。預(yù)處理治療組、對照組各組腦含水量較模型組明顯減低,預(yù)處理治療組低于對照組,正常組與假手術(shù)組沒有明顯差異(P0.01)。HE染色:左側(cè)大腦海馬C2區(qū),正常組與假手術(shù)組胞核成圓行,核質(zhì)分布均勻,核仁明顯,清晰圓潤。模型組胞核固縮,塌陷,核質(zhì)不清晰,部分細(xì)胞壞死消失,膠質(zhì)細(xì)胞增生,較其他組壞死比例明顯增加,治療組較對照組壞死細(xì)胞減少。模型組損傷腦組織區(qū)域ZO 1、Occludin蛋白表達(dá)明顯降低(P0.01),治療組高于對照組,對照組高于模型組。VEGF在正常組、假手術(shù)組、模型組、治療組和對照組中腦組織濃度有顯著差異(P0.01),治療組高于對照組,模型組濃度高于正常組,治療組VEGF濃度最高。結(jié)論:補(bǔ)腎祛痰活血湯能夠減輕SD大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷導(dǎo)致的腦組織水腫,對損傷區(qū)域ZO 1、Occludin蛋白含量降低有抑制作用,能減少腦組織細(xì)胞壞死,減輕血腦屏障破壞導(dǎo)致的通透性增加,影響血液內(nèi)皮生長因子[VEGF]蛋白表達(dá),促進(jìn)腦缺血區(qū)的血管增生,改善該區(qū)域微循環(huán)的血流供應(yīng),減少梗死面積,抑制血腦屏障通透性增高,減輕腦水腫形成,對血腦屏障具有一定的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：補(bǔ)腎祛痰活血湯 含水量 HE染色 VEGF ZO-1 Occludin 實(shí)驗(yàn)研究
【學(xué)位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 中英文縮略對照表13-14
• 前言14-16
• 材料與方法16-24
• 1、實(shí)驗(yàn)材料16-18
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物16
• 1.2 主要儀器16-17
• 1.3 主要試劑17-18
• 2、實(shí)驗(yàn)方法18-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)分組18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方案18-23
• 2.2.1 缺血性腦卒中模型制作18-19
• 2.2.2 評分標(biāo)準(zhǔn)19
• 2.2.3 模型成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)19
• 2.2.4 EB通透性測定19-20
• 2.2.5 腦水腫程度測定20-21
• 2.2.6 HE染色21
• 2.2.7 VEGF檢測21-22
• 2.2.7.1 VEGF樣品采集21
• 2.2.7.2 VEGF實(shí)驗(yàn)檢測主要步驟21-22
• 2.2.8 免疫組化22-23
• 2.2.8.1 免疫組化法測定Occludin濃度步驟22-23
• 2.2.8.2 免疫組化法測定ZO 123
• 2.3 統(tǒng)計(jì)方法23-24
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-28
• 1.1 EB 的含量24
• 1.2 腦組織含水量24-25
• 1.3 HE染色結(jié)果25
• 1.4 VEGF實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-26
• 1.5 Occludin實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-27
• 1.6 ZO 1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-28
• 討論28-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-40
• 結(jié)語40-41
• 綜述41-62
• 參考文獻(xiàn)54-62
• 致謝62-64
• 在校期間的主持課題、撰寫的書籍及發(fā)表的論文64-65

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