【摘要】： 本研究選擇酵母偏愛(ài)密碼子同義替換鼠源性抗CD3抗體輕鏈可變區(qū)基因(Vκ),與人源性輕鏈恒定區(qū)(Cκ)基因連接,構(gòu)建完整的人鼠嵌合抗體輕鏈。將構(gòu)建的完整的人鼠嵌合表達(dá)載體轉(zhuǎn)化X-33畢赤酵母,建立兼具原核系統(tǒng)良好操作性和真核系統(tǒng)后加工性的重組抗CD3抗體畢赤酵母真核表達(dá)體系。在初步研究了發(fā)酵最佳條件后在80L發(fā)酵罐中進(jìn)行大規(guī)模發(fā)酵表達(dá),并對(duì)后續(xù)下游純化條件做了初步探討。結(jié)果表明,本研究正確構(gòu)建了重組抗CD3抗體畢赤酵母真核表達(dá)體系,經(jīng)甲醇誘導(dǎo)能夠分泌重組抗CD3抗體輕鏈蛋白,重組抗CD3抗體輕鏈的表達(dá)具有累積效應(yīng),產(chǎn)量在一段時(shí)間內(nèi)隨表達(dá)時(shí)間延長(zhǎng)而增加。本研究為進(jìn)一步用畢赤酵母作為生物反應(yīng)器大規(guī)模生產(chǎn)抗CD3抗體提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2569838