【摘要】： 瘧疾是嚴(yán)重危害人類健康的疾病。腦型瘧疾(CM)是惡性瘧疾的癥狀之一，也是最主要的致死原因。CM的病理基礎(chǔ)是紅內(nèi)期晚期滋養(yǎng)體和裂殖體感染的紅細(xì)胞與宿主內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附。CM所涉及到的多因素和不同機(jī)制迄今尚未闡明。 前期文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，Clag9蛋白是感染紅細(xì)胞與人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HBMVEC)發(fā)生黏附的關(guān)鍵蛋白。本實驗室前期實驗通過生物信息學(xué)軟件對Clag9進(jìn)行抗原性和表面可能性分析，選取了Clag9的三個片段Cg1，Cg2，和Cg3，利用原核表達(dá)三種多肽片段的GST融合蛋白，檢測三種蛋白影響HBMVEC關(guān)鍵的黏附相關(guān)受體細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)表達(dá)的情況，以蛋白中檢測的對應(yīng)內(nèi)毒素劑量做為對照，結(jié)果表明，Cg3能夠上調(diào)宿主細(xì)胞受體ICAM-1的表達(dá)。但Cg1和Cg2沒有類似作用。 由于內(nèi)毒素具有很強(qiáng)的誘導(dǎo)ICAM-1表達(dá)的作用，為了更加明確Clag三個片段對于血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附功能的影響，必須去除蛋白中的內(nèi)毒素。本實驗的實驗策略是：通過構(gòu)建真核表達(dá)載體，，利用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)上述三種Clag9片段或用去除原核表達(dá)蛋白中內(nèi)毒素的方法獲得內(nèi)毒素含量不影響血管內(nèi)皮細(xì)胞表面ICAM-1表達(dá)的Clag9片段；用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)做為檢測蛋白黏附功能的前期實驗的靜態(tài)模型，在體外將蛋白與HUVEC共同孵育，用流式細(xì)胞儀檢測宿主細(xì)胞表面ICAM-1表達(dá)的情況。 實驗結(jié)果：去除內(nèi)毒素后的Cg3與對照組同等劑量的GST對HUVEC的作用結(jié)果無顯著差異，表明Cg3無明顯上調(diào)宿主細(xì)胞受體ICAM-1表達(dá)的作用，結(jié)合近期Clag9功能研究的相關(guān)文獻(xiàn)，Clag9在參與瘧原蟲感染紅細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附方面的功能可能并非通過直接作用于宿主黏附受體而實現(xiàn)，而是通過參與惡性瘧感染紅細(xì)胞表面黏附分子的轉(zhuǎn)運，其功能有待于進(jìn)一步研究。
[Abstract]:Malaria is a disease that seriously endangers human health. Cerebral malaria (CM) is one of the symptoms of falciparum malaria and the most important cause of death. The pathological basis of CM is the adhesion between erythrocytes and host endothelial cells infected with trophozoites and merozoites in the late erythrocytic phase. The multiple factors and different mechanisms involved in CM have not yet been clarified. It was found that Clag9 protein was the key protein for the adhesion of infected red blood cells to human microvascular endothelial cells (HBMVEC). In our laboratory, the antigenicity and surface possibility of Clag9 were analyzed by bioinformatics software. Three fragments of Clag9, Cg1,Cg2, and Cg3, were selected to express three polypeptide fragments in prokaryotic GST fusion proteins. The effects of three proteins on the expression of HBMVEC key adhesion related receptor cell adhesion molecule-1 (ICAM-1) were detected. The results showed that the corresponding endotoxin dose detected in the protein was used as control. Cg3 can up-regulate the expression of host cell receptor ICAM-1. But Cg1 and Cg2 have no similar effect. Because endotoxin can induce the expression of ICAM-1, in order to clarify the effect of three fragments of Clag on the adhesion function of vascular endothelial cells, it is necessary to remove endotoxin from the protein. The strategy of this experiment is to construct eukaryotic expression vector to express the above three Clag9 fragments by mammal cells or to obtain Clag9 fragments whose endotoxin content does not affect the expression of ICAM-1 on the surface of vascular endothelial cells by removing endotoxin from prokaryotic expression proteins. Human umbilical vein endothelial cell (HUVEC) was used as a static model to detect protein adhesion function. The protein was incubated with HUVEC in vitro, and the expression of ICAM-1 on the surface of host cells was detected by flow cytometry. The results showed that the effect of Cg3 on HUVEC was not significantly different from that of the control group, indicating that Cg3 did not up-regulate the expression of host cell receptor ICAM-1. Combined with the recent research on Clag9 function, the function of Clag9 in the adhesion of red blood cells to vascular endothelial cells infected with Plasmodium falciparum may not be realized by directly acting on the host adhesion receptor. However, by participating in the transport of erythrocyte adhesion molecules in falciparum malaria infection, its function needs to be further studied.
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R382

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 齊德廣;秦銀河;王云貴;陳俊國;;醫(yī)科大學(xué)“教學(xué)評價常態(tài)化”芻議[J];西北醫(yī)學(xué)教育;2011年03期

2 ;銳意進(jìn)取的天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院骨科[J];中國矯形外科雜志;2011年13期

3 李增烈;;教你幾招辨黃疸[J];家庭醫(yī)學(xué);2011年05期

4 ;南京醫(yī)科大學(xué)眼科醫(yī)院 南京醫(yī)科大學(xué)附屬眼科醫(yī)院 江蘇省紅十字眼科醫(yī)院 南京市眼科醫(yī)學(xué)重點�？芠J];江蘇衛(wèi)生事業(yè)管理;2011年04期

5 胡敬;;青春為理想閃光——南方醫(yī)科大學(xué)丁振華教授的人生之旅[J];科學(xué)中國人;2011年12期

6 劉少東;;首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院高級工程師 楊舒 用信息化建設(shè)現(xiàn)代化醫(yī)院[J];信息方略;2010年22期

7 ;天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院心臟科[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年11期

8 ;關(guān)于舉辦SCI論文寫作和科研設(shè)計培訓(xùn)班的通知[J];北京醫(yī)學(xué);2011年09期

9 ;首都醫(yī)科大學(xué)皮膚病與性病學(xué)系[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年04期

10 ;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院簡介[J];中國衛(wèi)生經(jīng)濟(jì);2011年08期

相關(guān)會議論文 前10條

1 劉國祥;;創(chuàng)建醫(yī)科大學(xué)研究型醫(yī)院的理論思考[A];中華醫(yī)學(xué)會第12次全國醫(yī)學(xué)科學(xué)研究管理學(xué)學(xué)術(shù)年會資料匯編[C];2010年

2 ;寧夏醫(yī)科大學(xué)簡介[A];全國第十二次中醫(yī)診斷學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

3 ;南京醫(yī)科大學(xué)簡介[A];中國毒理學(xué)會第三屆全國學(xué)術(shù)會議論文（摘要）集[C];2001年

4 ;南京醫(yī)科大學(xué)張振聲校長講話[A];江蘇省首屆性學(xué)研討會論文集[C];1996年

5 ;大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院簡介[A];中華醫(yī)學(xué)會急診分會第五屆全國危重病學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2004年

6 張立娟;;中國生理學(xué)會在首都醫(yī)科大學(xué)舉行PBL講習(xí)班[A];中國生理學(xué)會論文匯編2005年第五期[C];2005年

7 ;南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院簡介[A];江蘇省性學(xué)會第五次學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

8 喻林升;韓軍鴿;;溫州醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)專業(yè)本科教育的開始[A];2006年浙江省醫(yī)學(xué)教育學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

9 金鎮(zhèn);章麗;尚濤;王德智;;中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院2004～2006年孕產(chǎn)婦死亡狀況分析[A];2007年中華醫(yī)學(xué)會—強(qiáng)生西部學(xué)術(shù)講座全國產(chǎn)科危重癥學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2007年

10 薛揚;郭成鋼;;通過尿液三杯試驗初步鑒別血尿來源[A];中國法醫(yī)學(xué)會全國第十一次法醫(yī)臨床學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 李中奇　趙修娟;首都醫(yī)科大學(xué)：立足使命科學(xué)發(fā)展[N];科技日報;2009年

2 本報記者 趙予歆;新疆醫(yī)科大學(xué)不斷提升綜合實力[N];中國改革報;2009年

3 通訊員龔宣;大力推進(jìn)高水平醫(yī)科大學(xué)建設(shè)[N];天津教育報;2009年

4 記者 邢琰;天津醫(yī)科大學(xué)148名留學(xué)生學(xué)成畢業(yè)[N];科技日報;2009年

5 記者 李林霞;山西醫(yī)科大學(xué)喜慶九十華誕[N];山西日報;2009年

6 記者 劉霞;英校長成首都醫(yī)科大學(xué)國際顧問[N];科技日報;2010年

7 記者 何建昆;韓啟德高度評價首都醫(yī)科大學(xué)50周年輝煌成就[N];科技日報;2010年

8 記者 辛向東　通訊員 何建國;首都醫(yī)科大學(xué)及北京宣武醫(yī)院專家到我州考察[N];大理日報(漢);2011年

9 張永勝 鄧旭林 寧習(xí)源;南方醫(yī)科大學(xué)開辟新“戰(zhàn)場”[N];健康報;2005年

10 蔣巧蓮;廣西醫(yī)科大學(xué)慶建校75年[N];科技日報;2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王東;鼠瘧紅內(nèi)期動力素蛋白亞單位、核酸疫苗與細(xì)胞顆粒疫苗免疫效果的比較研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2002年

2 韓志富;惡性瘧原蟲動力素蛋白Pfdyn功能研究及感染惡性瘧原蟲紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)組檢測數(shù)據(jù)分析[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

3 Salum Seif Salum Mchenga;rIL-25在急性潰瘍性結(jié)腸炎中的抗炎癥效應(yīng)[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

4 吳劍卿;新型高效重組腺相關(guān)病毒載體的構(gòu)建及其在肺癌基因治療中的應(yīng)用研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

5 王守林;人致癌物代謝酶及其自然變異體的功能研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

6 李璇;Urocortin對抗糖尿病腎病的發(fā)展及其機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

7 史娟;腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo)TRAIL及DR5單鏈抗體表達(dá)治療肺癌的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

8 高玲娟;Sublytic C5b-9誘導(dǎo)GMCs增殖和ECM分泌分子機(jī)制及其信號通路[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年

9 丁巖;MEKK1分子水平和高表達(dá)細(xì)胞模型的建立及應(yīng)用非那吲哚里西丁類生物堿CAT的抗腫瘤作用及機(jī)制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

10 葛明建;實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)（fqRT-PCR）法檢測外周循環(huán)肺癌細(xì)胞（CTCs）的臨床應(yīng)用研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 伊靜;惡性瘧原蟲基因clag9黏附功能研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

2 BITEGHE-BI-NZENG Alain-Pascal（阿蘭-比得戈）;顱腦創(chuàng)傷后的胃腸道出血與應(yīng)激激素變化關(guān)系的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

3 鄧柳麗;福建醫(yī)科大學(xué)2000-2009年科研項目績效分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

4 熊平;SD醫(yī)科大學(xué)兩關(guān)聯(lián)制藥企業(yè)經(jīng)營管理成敗比較分析[D];西南財經(jīng)大學(xué);2003年

5 哈曼德;蛇毒神經(jīng)生長因子對體外無血清培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突長度的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2007年

6 顧蔚莉;新疆醫(yī)科大學(xué)1994～2004年科技論文評價[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

7 李濤;一般自我效能感的提高對醫(yī)科大學(xué)新生社交焦慮的影響分析[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年

8 李紀(jì)慧;塑型性支氣管炎[D];山西醫(yī)科大學(xué);2005年

9 趙魯汀;增殖誘導(dǎo)配體（APRIL）與人類γδT細(xì)胞的功能相關(guān)性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

10 王建偉;肥厚型心肌左室流出道梗阻及心肌肥厚有關(guān)基因的生物信息學(xué)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

本文編號：2498726