【摘要】： 目的:初步探討糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的亮氨酸拉鏈蛋白(GILZ)在炎癥反應(yīng)過程中的作用機理。 方法:用無血清培養(yǎng)基分兩組培養(yǎng)人單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞,其中一組加入地塞米松刺激,12小時后提取兩組細(xì)胞總RNA和總蛋白,運用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法在轉(zhuǎn)錄水平檢測GILZ基因;運用蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)方法在翻譯水平檢測轉(zhuǎn)錄因子NF- B與AP-1的表達(dá)。收集10例臨床創(chuàng)傷患者傷后24小時內(nèi)的外周血,提取白細(xì)胞后分兩組給予無血清培養(yǎng)基,并在其中一組加入地塞米松刺激,培養(yǎng)12小時后提取白細(xì)胞總RNA和總蛋白,運用半定量RT-PCR方法在轉(zhuǎn)錄水平檢測GILZ基因;運用Western blotting方法在翻譯水平檢測NF- B與AP-1的表達(dá)。 結(jié)果:在地塞米松刺激下,刺激組THP-1細(xì)胞和創(chuàng)傷患者外周血白細(xì)胞的GILZ mRNA表達(dá)水平比對照組升高(P0.01);刺激組的NF- B與AP-1蛋白表達(dá)水平低于對照組(P0.01),差異具有極顯著性。 結(jié)論:糖皮質(zhì)激素可上調(diào)GILZ基因的表達(dá);GILZ的高表達(dá)可以抑制轉(zhuǎn)錄因子NF- B與AP-1的活性,具有抗炎癥反應(yīng)作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the mechanism of glucocorticoid-induced leucine zipper (GILZ) in inflammatory reaction. Methods: two groups of human monocytes THP-1 cells were cultured in serum-free medium. One group was stimulated with dexamethasone and the total RNA and total protein were extracted 12 hours later. Semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect GILZ gene at transcription level. Western blot (Western blotting) was used to detect the expression of transcription factor NF- B and AP-1 at translation level. The peripheral blood of 10 patients with clinical trauma was collected within 24 hours after injury. After extracting white blood cells, they were divided into two groups and given serum-free medium, and one group was stimulated by dexamethasone. After 12 hours of culture, total RNA and total protein of white blood cells were extracted. Semi-quantitative RT-PCR was used to detect GILZ gene at transcription level. Western blotting method was used to detect the expression of NF- B and AP-1 at the translation level. Results: under the stimulation of dexamethasone, the expression of GILZ mRNA in THP-1 cells and peripheral blood leukocytes in the stimulation group was higher than that in the control group (P0.01). The expression level of NF- B and AP-1 protein in stimulation group was significantly lower than that in control group (P0.01). Conclusion: glucocorticoid can up-regulate the expression of GILZ gene, and the high expression of GILZ can inhibit the activity of transcription factor NF- B and AP-1, and has anti-inflammatory effect.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R363

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2438781