【摘要】：目的建立一種體外分離、純化、培養(yǎng)和擴(kuò)增子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的方法,并對培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜MSCs進(jìn)行鑒定。方法采用機(jī)械和膠原酶消化相結(jié)合的方法分離、純化子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞,再利用克隆純化法分離子宮內(nèi)膜MSCs。對得到的子宮內(nèi)膜MSCs進(jìn)行傳代培養(yǎng)和擴(kuò)增。流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面抗原CD90、CD105、CD146、CD34和CD45的表達(dá)。將第3代子宮內(nèi)膜MSCs凍存1個(gè)月后再復(fù)蘇,鑒定復(fù)蘇后細(xì)胞的免疫表型。結(jié)果子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞可形成克隆,從大克隆可分離出MSCs。流式細(xì)胞術(shù)檢測得到的子宮內(nèi)膜MSCs表達(dá)MSCs的標(biāo)志物CD90、CD105和CD146,不表達(dá)造血干細(xì)胞的表面標(biāo)志物CD34和CD45。凍存再復(fù)蘇后的細(xì)胞活力達(dá)95%以上,細(xì)胞免疫表型與凍存前相似。結(jié)論該方法可以較好地分離子宮內(nèi)膜MSCs,是一種實(shí)用、可靠、高效的分離方法。
[Abstract]:Objective to establish a method for isolation, purification, culture and amplification of endometrial mesenchymal stem cell (MSCs) in vitro, and to identify the cultured endometrial MSCs. Methods the endometrial stromal cells were purified by mechanical and collagenase digestion, and the endometrial MSCs. was isolated by cloning and purification. The endometrial MSCs was subcultured and amplified. The expression of CD90,CD105,CD146,CD34 and CD45 was detected by flow cytometry. The third generation of endometrial MSCs was cryopreserved for 1 month before resuscitation to identify the immunophenotype of the cells after resuscitation. Results MSCs. could be isolated from endometrial stromal cells by cloning. Flow cytometry was used to detect the expression of MSCs in endometrial MSCs, CD90,CD105 and CD146, did not express the surface markers CD34 and CD45. of hematopoietic stem cells. After cryopreservation and resuscitation, the cell viability was over 95%, and the immunophenotype of the cells was similar to that before cryopreservation. Conclusion this method is a practical, reliable and efficient method for the isolation of endometrial MSCs,.
【作者單位】： 中國中醫(yī)科學(xué)院江蘇分院;江蘇省中醫(yī)藥研究院婦產(chǎn)科;
【基金】：江蘇省自然科學(xué)基金(BK20131457)
【分類號】：R329.2

【共引文獻(xiàn)】

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5 柳向東,柴岡,李東,崔磊,劉偉,曹誼林;成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)和表型鑒定[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2004年04期

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10 王運(yùn)濤;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).生物醫(yī)學(xué)工程分冊;2002年04期

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6 李鵬;模擬腦內(nèi)移植環(huán)境追蹤間充質(zhì)干細(xì)胞移植功能重建體外實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

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8 李陽;人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向雪旺細(xì)胞的誘導(dǎo)分化及對外周面神經(jīng)損傷修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

9 李大虎;CKIP-1負(fù)控間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

10 劉學(xué)娟;MiR-18b通過SMAD2調(diào)節(jié)TGF-β1誘導(dǎo)人毛囊間充質(zhì)干細(xì)胞分化為平滑肌細(xì)胞[D];吉林大學(xué);2013年

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10 吳海浩;小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定與成肌誘導(dǎo)分化研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

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