【摘要】： 本文運用蛋白質(zhì)組學(xué)中的雙向電泳分離技術(shù)、質(zhì)譜分析技術(shù)和蛋白質(zhì)信息學(xué)方法及免疫蛋白質(zhì)組學(xué)中的Western-blotting技術(shù)主要對歐洲多房棘球絳蟲原頭節(jié)蛋白及抗原表達(dá)譜進(jìn)行研究。利用ImageMaster軟件分析歐洲多房棘球絳蟲原頭節(jié)的雙向電泳圖譜,共分離到485±18個蛋白斑點,這些蛋白質(zhì)斑點大部分分子量介于10-120kD、等電點3.5-9的區(qū)域。挑選出其中豐度較高的蛋白斑點進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,結(jié)果鑒定出一些與寄生蟲生長、發(fā)育、運動、調(diào)控相關(guān)的蛋白,包括鈣網(wǎng)蛋白、微管蛋白、轉(zhuǎn)醇酮酶、硫氧還過氧化物酶、谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶、HSP90、HSP20、HSP70、肌動蛋白結(jié)合與切割蛋白(actin-binding and severin family group-like protein)、副肌球蛋白、肌動蛋白、肌球蛋白樣蛋白(myosin-like protein)、78KD葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白、胱冬酶3、14-3-3蛋白、原肌球蛋白、包蟲病診斷性抗原P-29等。分析其抗原蛋白表達(dá)譜發(fā)現(xiàn),參與寄生蟲-宿主相互作用的抗原主要是細(xì)胞骨架類蛋白及分子伴侶類蛋白。深入研究這些主要抗原成分,將有利于闡明寄生蟲-宿主相互作用機制,并且為尋找有效的疫苗候選分子及藥物作用靶標(biāo)奠定基礎(chǔ)。 此外,本文還比較了歐洲多房棘球絳蟲原頭節(jié)與西伯利亞棘球絳蟲原頭節(jié)蛋白表達(dá)譜、抗原蛋白譜之間的差異,結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者之間在總體蛋白表達(dá)上差異不明顯,但是它們的抗原蛋白譜之間確有較明顯的差異,如歐洲多房棘球絳蟲在約120kDa處出現(xiàn)特異的免疫印跡條帶,鑒定結(jié)果表明,該處蛋白可能為類似于海膽的轉(zhuǎn)座酶,而西伯利亞棘球絳蟲在副肌球蛋白、HSP70等處的抗原抗體反應(yīng)明顯強于歐洲多房棘球絳蟲。這一結(jié)果表明,兩蟲種在免疫學(xué)上存在差異
[Abstract]:In this paper, two dimensional electrophoretic separation of Echinococcus multilocularis, mass spectrometry, protein informatics and Western-blotting technique in immuno proteomics were used to study the expression profiles of protoganglion proteins and antigens of Echinococcus multilocularis (Echinococcus multilocularis). A total of 485 鹵18 protein spots were isolated from Echinococcus multilocularis by using ImageMaster software. The molecular weight of most of these spots ranged from 10 to 120 KD and the isoelectric point was 3.5-9. Some proteins related to the growth, development, movement and regulation of the parasite were identified, including calcium reticin, tubulin, transketonase, thioredoxidase, and thioredoxidase. Glutathione S-transferase, HSP90,HSP20,HSP70, actin binding and cleavage protein (actin-binding and severin family group-like protein), accessory myosin, actin, myosin-like protein), 78KD glucose-regulated protein) Cysteinase 314-3-3 protein, promyosin, hydatidosis diagnostic antigen P-29, etc. It was found that cytoskeleton proteins and molecular chaperones were the main antigens involved in parasita-host interaction. Further study of these major antigens will help to clarify the mechanism of parasite-host interaction and lay a foundation for finding effective vaccine candidate molecules and drug action targets. In addition, the differences of protein expression profiles and antigenic protein profiles between Echinococcus multilocularis and Echinococcus Siberia were compared. The results showed that there was no significant difference in total protein expression between Echinococcus multilocularis and Echinococcus Siberia. However, there are obvious differences between their antigenic protein profiles. For example, Echinococcus multilocularis has a specific Western blotting band at about 120kDa, which may be a transpose-like enzyme similar to sea urchin. The antigen-antibody responses of Echinococcus Siberia were stronger than those of Echinococcus multilocularis in Europe. The results show that there are immunological differences between the two species.
【學(xué)位授予單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R383;S852.7

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本文編號：2367770