發(fā)布時間：2018-11-28 17:25

【摘要】：目的預測并鑒定粉塵螨3類變應原(Der f 3)的T細胞表位。方法運用生物信息學分析軟件預測Der f 3的T細胞抗原表位,并人工合成所預測的T細胞表位肽。采用改良MTT法,用預測表位肽刺激致敏鼠脾淋巴細胞進行脾淋巴細胞增殖試驗;酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測脾細胞培養(yǎng)上清液中白細胞介素-2(IL-2)、γ干擾素(IFN-γ)、IL-4及IL-5水平。結果成功預測了Der f 3的5個T細胞表位肽,通過脾淋巴細胞增殖試驗,其中3個表位肽序列可促進脾淋巴細胞增殖并刺激細胞因子IL-2和IFN-γ的分泌,抑制細胞因子IL-4和IL-5的分泌。其序列分別為37GDCPYQISLQSSSHFCGG54、98IYQHENYDSMTIDNDVALIKLKTPMT123和164SELQRVDIDVVSREQCDQLYS184。結論初步鑒定了Der f 3變應原中3個T細胞表位序列,為后續(xù)過敏性哮喘的診斷和特異性免疫治療奠定基礎。
[Abstract]:Objective to predict and identify T cell epitopes of allergen (Der f 3 of Dermatophagoides farinae. Methods the T cell epitopes of Der f 3 were predicted by bioinformatics analysis software, and the predicted T cell epitope peptides were synthesized. The spleen lymphocyte proliferation test was carried out by using the modified MTT method to stimulate the spleen lymphocytes of the sensitized mice with predicted epitope peptide. The levels of interleukin-2 (IL-2), interferon 緯 (IFN- 緯), IL-4 and IL-5 in the supernatant of splenocyte culture were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). Results five T cell epitope peptides of Der f 3 were successfully predicted. By splenocyte proliferation test, three epitope peptide sequences could promote the proliferation of spleen lymphocytes and stimulate the secretion of cytokines IL-2 and IFN- 緯. Inhibit the secretion of cytokines IL-4 and IL-5. The sequences were 37GDCPYQISLQSSHFG5FG5FN 98IYQHENYDSMTIDNDVALIKLKTPMT123 and 164SELQQRVDIDVSREQLVSREQLYS184. Conclusion three T cell epitope sequences of Der f 3 allergen were preliminarily identified, which laid a foundation for the diagnosis and specific immunotherapy of allergic asthma.
【作者單位】： 皖南醫(yī)學院醫(yī)學寄生蟲學教研室;皖南醫(yī)學院生理學教研室;
【基金】：國家自然科學基金(81270091、30872367、81172790)
【分類號】：R392

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 鐘志美;鄭傳東;王方;;塵螨主要變應原蛋白的IgE結合表位序列分析[J];南方醫(yī)科大學學報;2011年07期

2 趙金紅;王海寧;姜玉新;李朝品;;重組Der f1變應原誘導小鼠哮喘模型的建立[J];齊齊哈爾醫(yī)學院學報;2011年20期

【共引文獻】

相關期刊論文 前4條

1 張穎;;疫苗開發(fā)中的技術進展及新策略[J];北方藥學;2012年07期

2 李瑩;楊春莉;趙瑩;郭瑜琪;劉昌政;周曉紅;;利用反向遺傳學原理構建B、E型肉毒神經(jīng)毒素基因型特異性靶片段[J];南方醫(yī)科大學學報;2008年08期

3 劉春艷;王敬祥;林瑞慶;朱興全;;日本血吸蟲蛋白質(zhì)組學研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2010年01期

4 趙金紅;孫恩濤;劉婷;湛孝東;李朝品;;粉塵螨種群消長及空間分布型研究[J];齊齊哈爾醫(yī)學院學報;2012年11期

相關博士學位論文 前1條

1 金卉;副豬嗜血桿菌感染和應激相關基因的鑒定與功能研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2009年

相關碩士學位論文 前6條

1 吳朔;布魯氏菌外膜蛋白免疫蛋白質(zhì)組學的初步研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2008年

2 李瑩;應對生物恐怖襲擊醫(yī)學防治技術的情報研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2008年

3 郭一;副豬嗜血桿菌外膜蛋白圖譜的建立及D15免疫原性鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2009年

4 王寶;大蒜素抑制人腦膠質(zhì)瘤U251細胞株生長及其機制的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學;2012年

5 李瑩;日本血吸蟲鈣網(wǎng)織蛋白活化抗原提呈細胞功能的分析[D];上海師范大學;2012年

6 常晨;豬嗜血支原體MSG1蛋白B細胞表位的解析及雙抗體夾心ELISA方法的建立[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2013年

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 張彥;RhD蛋白上的輔助T細胞表位對于一種預防Rh疾病的多肽疫苗的意義[J];國外醫(yī)學.輸血及血液學分冊;2001年01期

2 張彥;RhD蛋白上的輔助T細胞表位對于一種預防Rh疾病的多肽疫苗的意義[J];國外醫(yī)學.輸血及血液學分冊;2000年03期

3 王平忠,白雪帆,黃長形;漢灘病毒核衣殼蛋白C-端T細胞表位鑒定[J];中華微生物學和免疫學雜志;2004年05期

4 姜良勇,徐悅,王福慶,陳詩書,倪立青,勞志英,馮國璋;類風濕性關節(jié)炎患者單個核細胞對合成肽反應性研究[J];中國免疫學雜志;2000年01期

5 李杰,王立順,李一;T細胞表位疫苗的種類及其生物學意義[J];國外醫(yī)學.免疫學分冊;2000年04期

6 Waiyan Candy Ng,馮明釗;T輔助細胞在疫苗研制中的作用(英文)[J];熱帶醫(yī)學雜志;2002年03期

7 沈柱,王剛,劉玉峰,菅金龍;人角蛋白17的序列分析及輔助性T細胞表位預測[J];西北國防醫(yī)學雜志;2004年03期

8 王美亮,朱勇,王九平,劉京梅,方亮,金伯泉;漢灘病毒核蛋白T細胞表位的鑒定及其特異性T細胞應答規(guī)律的初步探討[J];細胞與分子免疫學雜志;2005年06期

9 伍小路;吳婷;歐山海;林春鑫;程通;李少偉;張軍;夏寧邵;;戊型肝炎病毒顆粒性蛋白疫苗H-2~d限制性Th表位的篩選[J];病毒學報;2006年03期

10 熊銳華;王昊亮;鄒麗云;李景怡;張晉宇;張榮華;萬瑛;;β2M-綠色熒光蛋白在MHC-Ⅰ肽親和力實驗中的應用[J];免疫學雜志;2009年04期

相關會議論文 前10條

1 劉英;朱平;胡亞美;;急性B淋巴細胞白血病免疫球蛋白重鏈可變區(qū)T細胞表位的研究[A];第九屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2003年

2 焦新安;劉秀梵;RichardLo—man;EdithDériaud;SophieBurgaudBrigitteGicquel;NathalieWinter;ClaudeLeclerc;;重組卡介苗表達的MalE蛋白T細胞表位的鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學會分會第十次學術研討會論文集[C];2000年

3 金明蘭;南文龍;韓松;朱占波;金寧一;;抗原表位及多表位疫苗研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學術研討會論文集（上冊）[C];2009年

4 王亞欣;周艷君;李國新;張善瑞;姜一峰;許傲天;于海;王礞礞;閆麗萍;陳宗艷;童光志;;高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒HuN4株M蛋白T細胞表位的初步鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學術研討會論文集（上冊）[C];2009年

5 李向明;肖亮;劉兢;;結核桿菌熱休克蛋白HSP70359-610和IL-2增強了HBV多表位DNA疫苗誘導的抗病毒免疫作用[A];中國細胞生物學學會醫(yī)學細胞生物學學術大會論文集[C];2006年

6 黃慶海;張儒祥;張建瓊;謝維;;應用位點特異性打分矩陣對MHC-PEPTIDE親和力的預測[A];江蘇省遺傳學會第七屆代表大會暨學術研討會論文摘要匯編[C];2006年

7 趙金存;黃前榮;王煒;高曉明;;SARS-CoV N蛋白小鼠T細胞表位篩選及其免疫功能研究[A];中國免疫學會第五屆全國代表大會暨學術會議論文摘要[C];2006年

8 吳煒;陳瑜;李蘭娟;;重型乙型肝炎患者血清HBV前S2基因變異檢測[A];2004年浙江省傳染病、肝病學術會議論文匯編[C];2004年

9 劉輝;朱平;林寧晶;張英;卜定方;王奕嘉;;構建免疫球蛋白與細胞因子融合基因做家族特異性抗淋巴瘤疫苗[A];第九屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2003年

10 劉英;朱平;胡亞美;;急性B淋巴細胞白血病免疫球蛋白重鏈可變區(qū)基因的分子特征[A];第九屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2003年

相關重要報紙文章 前2條

1 田庚善;乙肝病毒攜帶者的診治[N];健康報;2002年

2 通訊員 吳志軍;我國丙型肝炎疫苗研究進展獲突破[N];科技日報;2003年

相關博士學位論文 前10條

1 陳佳玉;丙型肝炎治療性DNA疫苗的實驗研究[D];吉林大學;2006年

2 閆若潛;雞BF2和β2m分子特征與二級結構及其復合體鑒定病毒表位的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2005年

3 何競;肝癌復合表位抗原的免疫原性研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2005年

4 李丹;CEA迷你基因串聯(lián)體基因疫苗的構建及其免疫學活性研究[D];吉林大學;2008年

5 太京華;微囊化CEA抗原肽表位/IL-18基因重組細胞疫苗的構建及其免疫學活性的研究[D];吉林大學;2006年

6 王群;H5N1亞型禽流感病毒核蛋白T細胞表位區(qū)的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2009年

7 劉濤;支持向量機方法在T細胞表位預測中的應用[D];大連理工大學;2009年

8 宋哲;PLS方法在T細胞表位預測中的應用[D];大連理工大學;2009年

9 王亞欣;PRRSV強弱毒感染后對PBMCs細胞嗜性和細胞因子產(chǎn)生情況的差異研究及HP-PRRSV T細胞表位的鑒定[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2012年

10 繆軍;惡性瘧原蟲紅內(nèi)期若干保護性抗原基因真核表達重組質(zhì)粒的構建及其免疫特性研究[D];第四軍醫(yī)大學;1999年

相關碩士學位論文 前10條

1 熊銳華;MHC-肽四聚體技術在CTL表位鑒定中的應用[D];第三軍醫(yī)大學;2009年

2 陳霞;結核桿菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗的制備及其免疫效果的初步研究[D];南京醫(yī)科大學;2008年

3 鄧仲元;EWS-FLI1融合蛋白在尤文肉瘤細胞的表達分布及其融合區(qū)抗原表位的預測[D];南昌大學;2008年

4 王學海;幽門螺桿菌UreB抗原表位預測及其有效表位噬菌體展示的篩選[D];浙江大學;2007年

5 徐海;禽流感病毒M2e、NP多表位抗原的制備及其免疫原性的初步研究[D];揚州大學;2008年

6 陳雷;日本血吸蟲童蟲期別體被蛋白T輔助細胞表位預測及初步鑒定[D];上海師范大學;2009年

7 隋傳宇;日本血吸蟲分泌型抗原T細胞表位的預測研究[D];上海師范大學;2006年

8 伍小路;抗原性相同而免疫原性差異顯著的兩個蛋白對T、B細胞的激活作用研究[D];廈門大學;2008年

9 陳進新;日本血吸蟲期別差異表達基因的Th細胞混合表位預測及童蟲期多表位的原核表達[D];上海師范大學;2007年

10 王麗珩;p210~（bcr-abl）限制性T細胞表位鑒定及其特異性CTL細胞檢測[D];揚州大學;2008年

，

本文編號：2363688