【摘要】： 目的:肝再生增強因子(augmenter of liver regeneration, ALR)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種促肝細胞再生的細胞因子。ALR的生物學作用主要表現(xiàn)在直接刺激肝細胞增殖和再生、對肝臟的保護作用、參與組織器官的形成與發(fā)育、免疫調(diào)控作用以及促肝癌細胞增殖等效應(yīng)。盡管有上述重要生物學作用,但ALR究竟如何發(fā)揮生物學作用目前仍知之較少。如果能獲得與ALR發(fā)生相互作用的蛋白,并且鑒定出ALR受體,將有助于深刻理解ALR的生物學功能,特別是為深入了解ALR與肝癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。本實驗擬從人肝癌細胞的cDNA噬菌體表面展示文庫中篩選與人肝再生增強因子(human augmenter of liver regeneration, hALR)相互作用的特異噬菌體克隆,通過序列分析及生物學活性檢測確認hALR相互作用蛋白,構(gòu)建原核表達載體,為進一步鑒定ALR受體提供實驗基礎(chǔ)。 方法: 1.以hALR為靶蛋白,從人肝癌細胞cDNA噬菌體展示文庫中篩選與hALR相互作用的特異噬菌體克隆;對獲得的特異噬菌體克隆cDNA插入片段進行序列測序及生物信息學分析;利用3H-TdR摻入法測定hALR聯(lián)合陽性噬菌體展示肽及單獨陽性噬菌體展示肽對QGY肝癌細胞株的增殖效應(yīng)。
[Abstract]:Objective: (augmenter of liver regeneration, ALR) is a kind of cytokine found in recent years to promote the regeneration of hepatocytes. The biological effects of ALR are mainly manifested in the direct stimulation of hepatocyte proliferation and regeneration and the protective effect of ALR on the liver. Participate in the formation and development of tissues and organs, immune regulation and promote the proliferation of liver cancer cells. Despite these important biological roles, little is known about how ALR plays its biological role. If we can obtain the protein that interacts with ALR and identify the ALR receptor, it will be helpful to understand the biological function of ALR, especially to lay a foundation for further understanding the relationship between ALR and the occurrence and development of HCC. The aim of this study was to screen specific phage clones interacting with human liver regeneration enhancer (human augmenter of liver regeneration, hALR) from cDNA phage display library of human hepatoma cells. The hALR interacting protein was confirmed by sequence analysis and biological activity detection, and the prokaryotic expression vector was constructed, which provided the experimental basis for further identification of ALR receptor. Methods: 1. Using hALR as the target protein, the specific phage clones interacting with hALR were screened from the cDNA phage display library of human hepatoma cells, and the cDNA inserted fragments were sequenced and analyzed by bioinformatics. The proliferative effects of hALR combined with phage display peptide and single positive phage display peptide on QGY hepatoma cell line were determined by 3H-TdR incorporation.
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R341

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本文編號：2355769