【摘要】：目的探討瘦素-p38絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路在高糖損傷H9c2心肌細(xì)胞中的作用。方法應(yīng)用35 mmol/L葡萄糖處理H9c2心肌細(xì)胞以建立高糖損傷細(xì)胞模型。應(yīng)用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞存活率;雙氯熒光素染色熒光顯微鏡照相測(cè)定胞內(nèi)活性氧水平;Hoechst 33258核染色檢測(cè)凋亡細(xì)胞形態(tài)與數(shù)量的改變;羅丹明123染色熒光顯微鏡照相測(cè)定線粒體膜電位;Western blot檢測(cè)瘦素和p38MAPK蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果 35mmol/L葡萄糖處理H9c2心肌細(xì)胞明顯促進(jìn)瘦素的表達(dá)。在高糖處理H9c2心肌細(xì)胞前,應(yīng)用50μg/L瘦素拮抗劑預(yù)處理24 h明顯抑制高糖對(duì)磷酸化p38MAPK表達(dá)的上調(diào)作用。瘦素拮抗劑預(yù)處理24 h或p38MAPK抑制劑(SB203580)預(yù)處理60 min均能抑制高糖對(duì)H9c2心肌細(xì)胞的損傷作用,使細(xì)胞存活率升高,凋亡細(xì)胞數(shù)量減少,活性氧生成及線粒體膜電位丟失減小。結(jié)論瘦素-p38MAPK通路參與高糖對(duì)心肌細(xì)胞的損傷。
[Abstract]:Objective to investigate the role of leptin-p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway in H9c2 cardiomyocytes injured by high glucose. Methods H9c2 cardiomyocytes were treated with 35 mmol/L glucose to establish the model of high glucose injury. Cell survival rate was detected by cell count kit, reactive oxygen species (Ros) level was detected by fluorescence microscopy with dichlorofluorescein staining, and morphology and number of apoptotic cells were detected by Hoechst 33258 nuclear staining. The expression of leptin and p38MAPK protein was detected by mitochondrial membrane potential (; Western blot) by fluorescence microscopy with Rhodamine 123 staining. Results 35mmol/L glucose could significantly promote the expression of leptin in H9c2 cardiomyocytes. Pretreatment with 50 渭 g / L leptin antagonist for 24 h significantly inhibited the up-regulation of phosphorylated p38MAPK expression by high glucose treatment in H9c2 cardiomyocytes. Pretreatment with leptin antagonist for 24 h or p38MAPK inhibitor (SB203580) for 60 min could inhibit the injury of H9c2 cardiomyocytes induced by high glucose, increase the cell survival rate, decrease the number of apoptotic cells, and decrease the production of reactive oxygen species and the loss of mitochondrial membrane potential. Conclusion leptin-p38MAPK pathway is involved in the injury of cardiac myocytes induced by high glucose.
【作者單位】： 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院黃埔院區(qū)內(nèi)科;廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科;中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(H0208) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2012B031800358)
【分類號(hào)】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2321552