【摘要】：白血病抑制因子(LIF)是一種多效性細(xì)胞因子,作用于多種細(xì)胞組織發(fā)揮不同的生物學(xué)作用,廣泛調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、增殖和分化。如抑制胚胎干細(xì)胞的體外分化;刺激血小板生成,造血細(xì)胞增殖;促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖;促進(jìn)神經(jīng)原形成,肌肉衛(wèi)星細(xì)胞的增殖,參與神經(jīng)肌肉修復(fù);參與肝的急性期反應(yīng),參與炎癥的生理病理過程等。這些生物學(xué)效應(yīng)有賴于其結(jié)合靶細(xì)胞膜上的LIF受體α亞基(gp190),與另一亞基(gp130)形成異源性二聚體,激活下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。gp190(LIFRα亞基)是低親和力的LIF特異性受體,屬于造血細(xì)胞素受體超家族,缺乏內(nèi)生激酶的活性。生理狀態(tài)下存在可溶性LIFR和跨膜LIFR。可溶性受體,游離于胞外,無跨膜區(qū)和細(xì)胞內(nèi)區(qū),對LIF發(fā)揮的正常生理效應(yīng)有拮抗效應(yīng)�？缒IFR(gp190)胞內(nèi)區(qū)含三個(gè)功能域——BOX1、2、3。YXXQ序列位于遠(yuǎn)膜端(Y酪氨酸,X任意氨基酸,Q谷氨酰胺),與STAT3的SH2位點(diǎn)特異性識別結(jié)合。細(xì)胞內(nèi)是否存在胞內(nèi)區(qū)游離受體,胞內(nèi)區(qū)受體游離后如何影響信號傳遞,發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)?有關(guān)膜受體信號啟動(dòng)位點(diǎn)的游離多肽對細(xì)胞增殖分化的影響已有報(bào)道,提示我們,單一亞基的單一信號啟動(dòng)位點(diǎn)在離膜狀態(tài)下完全能夠在細(xì)胞內(nèi)啟動(dòng)相應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。LIF信號傳導(dǎo)激活JAK-STAT途徑和RAS-MAPK途徑,我們前期研究根據(jù)gp190細(xì)胞內(nèi)區(qū)的不同功能域分別設(shè)計(jì)了兩種小分子——190CT2+3(含BOX2+3)和190CT3(含BOX3),發(fā)現(xiàn)gp190細(xì)胞內(nèi)區(qū)的多個(gè)功能域成為游離多肽在細(xì)胞內(nèi)存在時(shí),對細(xì)胞分化有不同的影響,激活不同的信號分子。為進(jìn)一步驗(yàn)證前期工作,研究發(fā)生機(jī)制,本研究成功獲得了重組190CT2+3和190CT3兩種白血病HL-60細(xì)胞株,并進(jìn)一步對190CT3的YXXQ基團(tuán)定點(diǎn)突變研究相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定表達(dá)重組目的基因(190CT2+3和190CT3)的腫瘤細(xì)胞,增殖均受到抑制,促進(jìn)細(xì)胞成熟分化,JAK/STAT3通路激活;通過該研究,我們明確了gp190不同的功能域190CT2+3、190CT3在胞內(nèi)游離存在時(shí),對急性早幼粒白血病細(xì)胞HL-60增殖分化的功能效應(yīng)和相
[Abstract]:Leukemia inhibitory factor (LIF) is a multipotent cytokine, which acts on various cell tissues and plays different biological roles, and regulates cell growth, proliferation and differentiation widely. Such as inhibiting the differentiation of embryonic stem cells in vitro, stimulating platelet formation, hematopoietic cell proliferation, promoting osteoblast proliferation, promoting neurogen formation, proliferation of muscle satellite cells, and participating in neuromuscular repair. Participate in the acute stage of liver reaction, participate in the physiological and pathological process of inflammation, etc. These biological effects depend on its binding to the LIF receptor 偽 subunit (gp190) on the target cell membrane, forming heterodimer with another subunit (gp130) and activating the downstream signal transduction pathway. Gp190 (LIFR 偽 subunit) is a low affinity LIF specific receptor. It belongs to the hematopoietic receptor superfamily and lacks the activity of endogenous kinase. Soluble LIFR and transmembrane LIFR. exist in physiological state Soluble receptors, free from extracellular, transmembrane and intracellular regions, have antagonistic effects on the normal physiological effects of LIF. Transmembrane LIFR (gp190) contains three functional domains-BOX1,2,3.YXXQ sequence located at the distal end of the membrane (Y tyrosine, X arbitrary amino acid, Q glutamine), which binds specifically to the SH2 site of STAT3. Is there a intracellular free receptor in the cell? how does the intracellular receptor affect signal transduction and exert its biological effect? The effects of free peptides on cell proliferation and differentiation at the membrane receptor signal initiation site have been reported, suggesting that we, The single signal priming site of the single subunit can activate the corresponding signal transduction pathway in the cell under the condition of membrane separation. LIF signal transduction activates the JAK-STAT pathway and the RAS-MAPK pathway. We designed two kinds of small molecules, 190CT2 3 (including BOX2 3) and 190CT3 (including BOX3), according to the different functional domains of the intracellular region of gp190. We found that many functional domains of the intracellular region of gp190 become free peptides in the cell. It has different effects on cell differentiation and activates different signal molecules. In order to further verify the previous work and study the pathogenesis, two leukemia HL-60 cell lines, recombinant 190CT2 3 and 190CT3, were successfully obtained in this study, and the signal transduction pathway related to the YXXQ group site-directed mutation of 190CT3 was further studied. It was found that the proliferation of tumor cells expressing recombinant target genes (190CT2 3 and 190CT3) was inhibited, the cell maturation and differentiation were promoted, and the JAK/STAT3 pathway was activated. Through this study, we have determined the functional effect and phase of 190CT2 3190CT3 on the proliferation and differentiation of acute promyelocytic leukemia cell line HL-60 in the presence of different functional domains of gp190 in the presence of intracellular 190CT2 3190CT3.
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R341

【共引文獻(xiàn)】

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6 劉厚奇!200433上海,單繼寬!200433上海,湯淑萍!200433上海,劉善榮!200433上海;Fas死亡結(jié)構(gòu)域調(diào)節(jié)白血病細(xì)胞Meg-01內(nèi)c-myc的表達(dá)[J];中華血液學(xué)雜志;2001年01期

7 楊玲,劉善榮,湯淑萍,王鳳玫,劉厚奇;白血病抑制因子受體α亞基胞內(nèi)區(qū)遠(yuǎn)膜端對HL-60細(xì)胞增殖分化的影響[J];中華血液學(xué)雜志;2004年11期

8 張明生;周云峰;謝叢華;張文杰;周福祥;屈雪菊;;阻斷細(xì)胞信號傳導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子6基因表達(dá)對人結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡的影響[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2006年02期

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本文編號：2307920