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大鼠脂肪組織來(lái)源干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、誘導(dǎo)分化以及與絲素材料相容性的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2018-11-01 18:47
【摘要】:組織工程就是運(yùn)用工程學(xué)和生命科學(xué)的原則和方法,研究哺乳類動(dòng)物正常和病理組織的結(jié)構(gòu)與功能的相互關(guān)系,并發(fā)展可恢復(fù)、保留或改善組織功能的生物替代品。組織工程的一般原則涉及活細(xì)胞與一種自然的或者人工合成的載體或支架材料的結(jié)合,構(gòu)建一個(gè)三維的活性組織,使其在功能上、結(jié)構(gòu)上和機(jī)制上與原組織相同。種子細(xì)胞是其中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。近來(lái),有幾項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)可以從人脂肪組織中分離出一種間充質(zhì)干細(xì)胞,其可以向多方向分化。本課題主要探索大鼠脂肪組織中分離得到間充質(zhì)干細(xì)胞的方法以及其向各方向的分化能力。主要包括六個(gè)部分: 一、大鼠脂肪組織來(lái)源的干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定 目的探索從大鼠脂肪組織中分離得到間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,以及對(duì)其干細(xì)胞表型的研究,為組織工程提供理想的種子細(xì)胞。 方法從SD大鼠的附睪處切取脂肪組織,通過(guò)消化的方法獲得一群細(xì)胞,在體外完全培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),觀察其生物學(xué)特性以及細(xì)胞表面標(biāo)記。 結(jié)果可以從大鼠附睪的脂肪組織中分離得到一群類成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,可在體外穩(wěn)定擴(kuò)增傳代。免疫熒光組織化學(xué)顯示細(xì)胞表面CD44,Vimentin抗體陽(yáng)性。 結(jié)論本試驗(yàn)方法可成功的從大鼠的脂肪組織中分離得到一群間充質(zhì)干細(xì)胞,并且細(xì)胞表達(dá)CD44,Vimentin細(xì)胞表型,證明其來(lái)源于中胚層組織,在體外穩(wěn)定增殖,有希望成為理想的種子細(xì)胞。 二、大鼠脂肪組織來(lái)源的干細(xì)胞向成骨方向的誘導(dǎo)分化 目的研究從大鼠附睪處脂肪組織中分離得到的間充質(zhì)干細(xì)胞在體外誘導(dǎo)為
[Abstract]:Tissue engineering is to use the principles and methods of engineering and life science to study the relationship between the structure and function of normal and pathological tissues in mammals and to develop biological substitutes that can restore preserve or improve the function of tissues. The general principles of tissue engineering involve the binding of living cells to a natural or synthetic carrier or scaffold, and the construction of a three-dimensional active tissue that is functionally, structurally and mechanically the same as that of the original tissue. Seed cells are the key link. Recently, several studies have found that a mesenchymal stem cell can be isolated from human adipose tissue and can differentiate into many directions. The aim of this study was to explore the method of isolating mesenchymal stem cells (MSCs) from adipose tissue of rats and their ability to differentiate into various directions. It consists of six parts: first, the isolation of stem cells from adipose tissue in rats. Objective to explore the method of isolation and phenotype of mesenchymal stem cells from adipose tissue of rats and to provide ideal seed cells for tissue engineering. Methods Adipose tissue was removed from epididymis of SD rats. A group of cells were obtained by digestion and cultured in vitro. The biological characteristics and cell surface markers were observed. Results A group of fibroblast-like cells could be isolated from adipose tissue of rat epididymis and cultured stably in vitro. Immunofluorescence histochemistry showed that CD44,Vimentin antibody was positive on cell surface. Conclusion in this study, a group of mesenchymal stem cells were isolated from adipose tissue of rats, and the cells expressed phenotype of CD44,Vimentin cells, which proved that the cells derived from mesoderm tissue and proliferated stably in vitro. There is hope of becoming the ideal seed cell. Second, the induction and differentiation of adipose stem cells from rat adipose tissue to osteogenesis objective to study the differentiation of mesenchymal stem cells isolated from adipose tissue of rat epididymis in vitro
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號(hào)】:R329.2

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本文編號(hào):2304780

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