【摘要】：背景:研究報道顯示豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離方法、效率、培養(yǎng)條件各不相同,并且尚無統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)。目的:建立一種高效、經(jīng)濟(jì)的豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定方法。方法:采集健康豬股骨骨髓,Ficoll密度梯度離心法分離單個核細(xì)胞,進(jìn)行原代和傳代培養(yǎng),流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞膜表面抗原表達(dá)情況,并觀察細(xì)胞成骨、成脂及成軟骨分化的能力。結(jié)果與結(jié)論:分離培養(yǎng)的單個核細(xì)胞活力旺盛,體外生長良好,細(xì)胞呈梭形、紡錘形和小多角形,具有穩(wěn)定的增殖分裂能力;細(xì)胞膜表面抗原CD29、CD44、CD90呈陽性表達(dá),而CD14、CD34、CD45、CD166、HLA-DR呈陰性表達(dá);在特定誘導(dǎo)條件下,該細(xì)胞可分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞。說明采用Ficoll密度梯度離心法成功分離培養(yǎng)出純化的豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,其生長狀態(tài)良好,具有多項(xiàng)分化潛能,可作為組織工程的種子細(xì)胞。
[Abstract]:Background: in vitro isolation of porcine bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) has been reported. Objective: to establish an efficient and economical method for isolation, culture and identification of porcine bone marrow mesenchymal stem cells. Methods: the bone marrow of healthy pig femur was collected and mononuclear cells were isolated by Ficoll density gradient centrifugation. The expression of cell surface antigen was detected by flow cytometry and osteogenesis was observed. The ability to differentiate into fat and cartilage. Results and conclusion: the mononuclear cells isolated and cultured had high activity, good growth in vitro, spindle shape, spindle shape and small polygonal shape, and had stable proliferative and mitotic ability. The cell membrane surface antigen (CD29,CD44,CD90) was expressed positively, but CD14,CD34,CD45,CD166,HLA-DR was negative. Under specific induction conditions, the cell could differentiate into osteoblasts, adipocytes and chondrocytes. The results showed that the purified porcine bone marrow mesenchymal stem cells were successfully isolated and cultured by Ficoll density gradient centrifugation. The MSCs grew well and had multiple differentiation potential, so they could be used as seed cells for tissue engineering.
【作者單位】： 解放軍第307醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【分類號】：R329

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2303951